论文摘要
对本实验室保藏的绿色木霉（Trichoderma viride）菌株。进行液态发酵，并对产酶发酵条件作了优化。优化的液态发酵条件如下：以10％玉米芯粉为碳源，0.5％的蛋白胨为氮源，100mL三角瓶20％装液量，2％接种量，培养基初始pH为4.0，30℃，180rpm条件下培养72h。将在此条件下培养得到的发酵液离心，加入50％饱和度的（NH4）2SO4盐析，得到粗酶液。经测定，酶活为449U／mL，比活184．9U／mg。对此酶液进行部分基本酶学性质研究。测得该酶的最适反应温度为60℃；最适pH为4.0；有一定的热稳定性，40℃下能较长时间地保持较高活性，当高于40℃时，酶活迅速下降，作用20min后，相对酶活仅为4.5％；此酶在酸性环境下有较强的稳定性，但随着pH值的上升，酶的稳定性迅速下降，当pH值达到6.0时几乎检测不到酶活。考察了部分金属离子对该酶酶活的影响：当加入较低浓度金属离子时，Cu2+对木聚糖酶有较强的抑制作用，其抑制率达到了41％。Al3+次之，此外CO2+、Cr3+在此浓度对酶也有不同程度的抑制作用。随着金属离子浓度的增加，先前起抑制作用的金属离子对酶活力的抑制减弱，其中Cu2+对木聚糖酶的抑制率从41％降低到8％。Al3+、CO2+、Cr3+对木聚糖酶的抑制率也有不同程度的降低。其它金属离子K+、Ba2+、Ca2+、Mn2+、Fe3+、Mg2+等对酶活力无明显影响。此外，考察了将木聚糖酶与不同浓度保护剂：蔗糖、麦芽糖和葡萄糖作用后，木聚糖酶热稳定性和酸稳定性的变化。发现木聚糖酶与蔗糖和麦芽糖作用后，其热稳定性和酸稳定性均有不同程度的提高。其中，蔗糖的效果相对较好，当蔗糖浓度达到3％时，木聚糖酶的残余酶活达到最大值。此后。保护剂浓度的增大对酶活影响己不明显。葡萄糖对酶的保护作用极小。
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研究论文 木聚糖酶产生菌的培养条件优化及部分酶学性质研究中文摘要英文摘要1 引言2 材料、试剂与仪器3 实验方法3.1 蛋白质浓度的测定3.2 木聚糖酶活性的测定3.3 木糖标准曲线的制作3.4 菌种的活化3.5 产酶发酵条件的优化3.5.1 不同氮源的影响3.5.2 培养基初始pH值对产酶的影响3.5.3 温度对产酶发酵的影响3.5.4 不同培养时间对产酶的影响3.6 木聚糖酶的制备3.7 木聚糖酶部分酶学性质研究3.7.1 最适温度的测定3.7.2 最适pH值的测定3.7.3 酶的热稳定性3.7.4 酶的酸碱稳定性3.7.5 部分金属离子对酶活性的影响3.9 保护剂对木聚糖酶的影响3.9.1 保护剂对酶热稳定性的影响3.9.2 保护剂对酶酸稳定性的影响4 实验结果4.1 发酵条件优化4.1.1 不同氮源对产酶的影响4.1.2 培养基初始pH值对产酶的影响4.1.3 温度对产酶发酵的影响4.1.4 不同培养时间对产酶的影响4.2 木聚糖酶的制备4.2.1 蛋白质含量标准曲线4.2.2 木糖标准曲线4.2.3 木聚糖酶的提取结果4.3 木聚糖酶的部分酶学性质4.3.1 木聚糖酶的最适温度4.3.2 木聚糖酶的最适pH值4.3.3 木聚糖酶的热稳定性4.3.4 木聚糖酶的酸碱稳定性4.3.5 部分金属离子对木聚糖酶活性的影响4.4 保护剂对木聚糖酶的影响4.4.1 保护剂对木聚糖木聚糖酶热稳定性的影响4.4.2 保护剂对木聚糖酶酸稳定性的影响5 讨论5.1 木聚糖酶发酵条件的优化5.2 木聚糖酶的部分酶学性质5.3 保护剂对木聚糖酶的影响参考文献综述1.引言2.木聚糖酶的分类3 木聚糖酶的酶学性质3.1 木聚糖酶的最适作用pH值3.2 木聚糖酶的最适反应温度3.3 木聚糖酶的等电点3.4 金属离子对木聚糖酶活性的影响3.5 糖苷键类型的影响3.6 取代基对酶活性的影响3.7 糖基化对酶活性的影响4 木聚糖酶的分子结构与功能4.1 木聚糖酶的催化残基4.2 木聚糖酶的热稳定性4.3 木聚糖酶的最适作用pH值和等电点4.4 木聚糖酶的底物亲和性5 木聚糖酶的分子生物学5.1 木聚糖酶基因的分子进化5.2 木聚糖酶基因的克隆和表达6 木聚糖酶的应用6.1 木聚糖酶在造纸工业中的应用6.2 木聚糖酶在饲料行业中的应用6.3 木聚糖酶在食品行业中的应用6.4 木聚糖酶在其它行业中的应用参考文献附录: 硕士阶段发表论文致谢
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