脂肝方对非酒精性脂肪肝大鼠线粒体的影响

论文摘要

目的：探讨脂肝方对非酒精性脂肪性肝病线粒体功能紊乱的作用机制。方法：健康雄性SD大鼠32只,所有大鼠均自由进水进食,随机分成四组：正常对照组8只,喂饲标准鼠食；模型组、中药组和西药组各8只,喂饲高脂饲料。中药组大鼠给予脂肝方灌胃,西药组大鼠给予立普妥灌胃。各组动物喂养至16周末处死取材。称量肝脏湿重计算肝指数（肝湿重/体重×100%）。测定血清ALT、AST、TG、TC,测定血清MDA、SOD等脂质过氧化标志物水平。常规制备肝脏染色,光镜观察肝脏病理学变化,RT-PCR检测肝组织UCP-2mRNA情况。所有数据采用SPSS13.0统计软件包分析。结果：中药组、西药组和模型组的肝湿重和肝指数之间无统计学差异（P>0.05）,但都显著高于正常组（P<0.05）。模型组的ALT和AST显著高于正常组（P<0.05）；中药组的ALT和AST较模型组显著下降（P<0.05）。西药组的ALT和AST较中药组增高（P<0.05）。与正常组TG、TC、HDL-c、LDL-c比较,中药组、西药组差异均有显著性（P<0.05）。与模型组TG、TC、HDL-c、LDL-c比较,中药组、西药组均有显著性差异（P<0.05）,中药组与西药组比较无显著性差异（P>0.05）。模型组血清MDA较正常组显著升高（P<0.05）,中药组血清MDA较模型组显著降低（P<0.05）,中药组血清MDA较西药组降低（P<0.05）。模型组血清SOD水平较正常组略有升高,但是无统计学差异（P>0.05）,中药组血清SOD水平高于模型组和西药组（P<0.05）。与模型组SOD/MDA比较,正常组、中药组、西药组均有显著性差异（P<0.05）；中药组SOD/MDA较西药组略有升高,但是无统计学差异（P>0.05）。肝脏UCP-2RT-PCR结果显示,模型组表达高于正常对照组（P<0.01）,治疗后中药组和西药组均较模型组下降（P<0.01）；但是两个治疗组之间差异意义（P>0.05）结论：本实验成功制备了大鼠非酒精性脂肪肝模型,非酒精性脂肪肝大鼠存在明显线粒体功能紊乱。脂肝方在一定程度上可减轻高脂喂养的大鼠肝脏脂肪变的程度,这一作用可能与提高大鼠肝组织抗氧化能力,减轻肝组织线粒体能量代谢障碍和氧化应激损害有关。线粒体功能受损在非酒精性脂肪肝进展中起关键作用,调控解偶联蛋白2表达是具有潜能的治疗手段之一。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 第一章 文献研究
• 1 现代医学对非酒精性脂肪肝的认识
• 1.1 NAFLD的概念
• 1.2 NAFLD的临床表现和病理改变
• 1.3 NAFLD的致病机理
• 1.4 西医治疗现状
• 2 祖国医学对非酒精性脂肪肝的认识
• 2.1 祖国医学对病因病机的分析
• 2.2 中医药治疗
• 3 小结
• 第二章 实验研究
• 1 材料与方法
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验药品
• 1.3 实验试剂
• 1.4 引物
• 1.5 主要仪器
• 2 试验方案
• 2.1 造模及分组
• 2.2 给药方法
• 2.3 标本的制备
• 2.4 血清生化指标
• 3 大鼠肝脏病理切片的制备及染色
• 3.1 固定、包埋及切片
• 3.2 HE染色
• 4 UCP-2的RT-PCR检测
• 5 统计方法
• 6 结果
• 6.1 体重、肝湿重和肝指数测定
• 6.2 ALT、AST测定
• 6.3 血脂测定
• 6.4 血清SOD、MDA测定
• 6.5 肝脏UCP-2 RT-PCR测定
• 6.6 病理学观察
• 第三章 讨论
• 1 导师对非酒精性脂肪肝病机、治法的认识
• 1.1 脾失健运、浊邪入血为主要病机
• 1.2 从脾论治
• 1.3 脂肝方组方及意义
• 2 线粒体功能受损与非酒精性脂肪肝
• 2.1 非酒精性脂肪肝肝细胞线粒体形态学改变
• 2.2 线粒体的能量代谢障碍与NAFLD
• 2.3 氧应激与脂质过氧化
• 2.4 线粒体与肝细胞凋亡
• 2.5 线粒体DNA与非酒精性脂肪肝
• 3 UCP-2与非酒精性脂肪肝
• 3.1 UCP-2与脂肪酸的相互作用
• 3.2 UCP-2与ROS的生成
• 3.3 UCP-2与胰岛素的分泌
• 3.4 UCP-2与细胞凋亡
• 3.5 UCP-2与脂肪性肝炎
• 3.6 NAFLD时UCP-2表达的细胞特异性
• 4 结论分析
• 5 总结与展望
• 结语
• 参考文献
• 附录
• 致谢