大鼠兴奋性毒性模型中胶质细胞的激活及其与NF-κB信号通路间的关系

论文摘要

目的:研究小胶质细胞的激活及其在NMDA受体介导的兴奋性毒性中的作用。方法:采用脑立体定位纹状体内给药法,建立NMDA受体介导的大鼠神经兴奋性毒性模型,尼氏染色法检测大鼠纹状体神经元的损伤,免疫组织化学法观察小胶质细胞的激活,Western Blot检测纹状体内IκB-α,TNF-α,FasL的蛋白水平和NF-κB的核转移,Real-Time PCR法检测CD40和NF-κB靶基因p-53的表达。结果:QA注射入纹状体后,免疫组化法观察到小胶质细胞显著激活并呈时间相关性,24小时达到高峰,Western Blot检测TNF-α,FasL的表达增高,Real-Time PCR发现CD40的表达显著增高,Western Blot观察到NF-κB抑制蛋白IκB-α水平下降,NF-κB核转移增加,同时Real-Time PCR显示p53的表达显著上升,尼氏染色表明抑制NF-κB的活性可以保护神经元。结论: NMDA受体介导的神经兴奋性毒性可以引起大鼠脑内炎症相关细胞因子的释放,同时激活NF-κB信号转导通路,引起下游凋亡相关基因的表达,造成神经元的损伤。

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摘要

Abstract

前言

一、谷氨酸受体、兴奋性毒性与神经退行性疾病

二、炎症激活与脑损伤

三、NF-kB 信号传导通路

第一部分 NMDA 受体介导的神经兴奋性毒性模型中炎症的激活

一、NMDA 受体介导的神经兴奋性毒性模型中小胶质细胞的激活

材料与方法

实验结果

二、NMDA 受体介导的神经兴奋性毒性模型中的炎症因子的释放

材料与方法

实验结果

三、NMDA 受体介导的神经兴奋性毒性模型中NF-κＢ信号传导通路的激活

材料与方法

实验结果

小结

第二部分抑制NF-κB 对神经元的保护作用

一、SN50 对NF-κB 通路的抑制作用

材料和方法

实验结果

二、抑制NF-κB 的核转移对下游基因的影响

材料与方法

实验结果

三、抑制NF-κB 对神经元的保护作用

材料和方法

实验结果

小结

讨论

结论

参考文献

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附录一 NF-κB 在喹啉酸引起的大鼠兴奋性毒性模型中的表达

附录二英文缩写词表

致谢

详细摘要

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