电针促进面神经损伤修复的JAK1-STAT3信号转导机制研究

电针促进面神经损伤修复的JAK1-STAT3信号转导机制研究

论文摘要

目的从与面神经修复密切相关的JAK1-STAT3信号通路入手,探讨电针促进面神经损伤修复的分子信号机制,为临床应用电针治疗面瘫提供坚实、可靠的实验证据,促进针灸优势病种的推广应用。方法选用由四川省实验动物专委会养殖场提供的日本大耳白兔66只(质量合格证号:SCXK[川]2008-14),体重1.9-2.1kg,80-85日龄,雌雄各半,采用随机数字表法将动物随机分为术前对照组、假手术组、模型组、电针组,模型自愈组,其中假手术组、模型组、电针组按疗程随机分为3个亚组,每组动物6只。除术前对照组、假手术组外,其余各组动物用特制止血钳压榨右侧面神经造成面神经损伤模型,电针组在术后第1天即进行治疗,5天为1个疗程,两疗程之间间隔2天,治疗3个疗程,模型组术后不进行任何治疗,术前对照组为适应性喂养3天后取材,模型自愈组为术后5周取材。观察电针术侧“地仓”、“颊车”、“翳风”、“合谷”对面神经损伤模型兔面神经组织形态学、CNTFR、CNTFR mRNA、JAK1、STAT3表达的影响。结果1.组织形态学定量结果:1个疗程后,电针组髓鞘数目及厚度与模型组相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。2-3个疗程后,电针组髓鞘数目及厚度明显下降,与模型组比较,差异没有统计学意义(P>0.05)。2.血清CNTFR表达结果:术前对照组CNTFR存在微量表达,1个疗程后,电针组血清CNTFR表达明显下调,与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.01);2-3个疗程后,电针组血清CNTFR表达上调,与模型组比较,差异没有统计学意义(P>0.05)。3. CNTFR mRNA表达结果:术前对照组CNTFR mRNA存在微量表达,1个疗程后,电针组CNTFR mRNA表达明显下调,与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.01);2-3个疗程后,电针组CNTFR mRNA表达上调,与模型组比较,差异没有统计学意义(P>0.05)4.JAK1表达的结果:术前对照组JAK1存在微量表达,1个疗程后,电针组JAK1表达明显下调,与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.01);2-3个疗程后,电针组JAK1表达开始上调,与模型组比较,差异没有统计学意义(P>0.05)。5. STAT3表达的结果:术前对照组STAT。存在微量表达,1个疗程后,电针组STAT3表达明显下调,与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.01);2-3个疗程后,电针组STAT3表达开始上调,与模型组比较,差异没有统计学意义(P>0.05)。结论1.髓鞘化程度与神经损伤程度呈负相关;CNTFR、CNTFR mRNA、JAK1、STAT3表达水平同神经损伤程度呈正相关。2.急性期电针可明显加快面神经髓鞘化进程,迅速将CNTFR、CNTFR mRNA、JAK1、STAT3表达调节至正常水平,促进面神经快速修复。3.电针的过度刺激会引发损伤反应,引起髓鞘化程度降低,并激活CNTFR、CNTFR mRNA、JAK1、STAT3再次表达。4.以上结论提示,急性期电针可以通过CNTFR介导的JAK1-STAT3信号转导通路促进面神经损伤修复,但是电针治疗需要把握“中病即止”的原则,过度刺激会引发损伤反应。

论文目录

  • 中文摘要
  • ABSTRACT
  • 前言
  • 1 课题来源
  • 2 研究背景
  • 英文缩略词对照表
  • 实验研究
  • 1 实验材料
  • 1.1 实验动物
  • 1.2 主要试剂
  • 1.3 主要仪器
  • 2 实验方法
  • 2.1 动物分组
  • 2.2 动物模型的建立
  • 2.3 处理方法
  • 2.4 电针治疗
  • 2.5 标本采集和处理
  • 2.6 观察指标及检测方法
  • 2.6.1 一般情况观察
  • 2.6.2 电镜组织形态学观察
  • 2.6.3 CNTFR指标检测
  • 2.6.4 CNTFR mRNA指标检测
  • 2.6.5 CNTFR mRNA积分光密度指标检测
  • 1、STAT3蛋白水平检测'>2.6.6 JAK1、STAT3蛋白水平检测
  • 2.7 统计方法
  • 3 实验结果
  • 3.1 实验兔大体情况
  • 3.2 电镜观察
  • 3.3 血清CNTFR表达
  • 3.4 CNTFR mRNA表达
  • 3.5 CNTFR mRNA积分光密度值
  • 1蛋白磷酸化水平表达'>3.6 JAK1蛋白磷酸化水平表达
  • 3蛋白磷酸化水平表达'>3.7 STAT3蛋白磷酸化水平表达
  • 讨论
  • 1 祖国医学对本病的认识
  • 2 现代医学对本病的认识
  • 3 电针疗法的选用依据
  • 3.1 电针疗法在实验研究领域具有独特优势
  • 3.2 波形是影响电针疗效的重要参数
  • 4 本实验的选穴
  • 4.1 配穴方案的选用
  • 4.2 选用患侧穴位的原因
  • 5 电针介入时机的选择
  • 6 本实验电针效应指标的设立
  • 6.1 病理形态学变化
  • 6.2 血清CNTFR的表达
  • 6.3 实时荧光定量PCR法检测CNTFR mRNA水平表达
  • 6.4 原位杂交法检测CNTFR mRNA积分光密度
  • 1、STAT3蛋白磷酸化水平'>6.5 Western Blot法检测JAK1、STAT3蛋白磷酸化水平
  • 7 本实验样本含量估算的依据
  • 8 压榨性面神经损伤模型的建立和评估
  • 8.1 动物模型的建立
  • 8.2 模型评估指标的设立
  • 9 关于本实验研究结果的讨论
  • 9.1 电针对面神经损伤模型兔形态学的影响
  • 9.2 电针对CNTFR及CNTFR mRNA表达的影响
  • 1-STAT3信号通路的影响'>9.3 电针对JAK1-STAT3信号通路的影响
  • 9.4 电针效应与刺激量的关系
  • 1-STAT3信号转导机制探讨'>10 电针作用的JAK1-STAT3信号转导机制探讨
  • 11 RNA干扰技术在本实验研究中的应用探索
  • 12 关于本实验研究设计的讨论
  • 12.1 标准化原则
  • 12.2 随机化原则
  • 12.3 可重复性原则
  • 12.4 指标注重可量化原则
  • 结论
  • 问题与展望
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附录一 附图
  • 1. 实验兔大体情况观察和造模过程
  • 2. 电针治疗过程
  • 3. RT-PCR检测
  • 4. 电镜观察
  • 5. 原位杂交
  • 1蛋白印迹'>6. JAK1蛋白印迹
  • 3蛋白印迹'>7. STAT3蛋白印迹
  • 附录二 综述
  • 参考文献
  • 公开发表的学术论文、专著及科研成果
  • 相关论文文献

    • [1].安心颗粒对心力衰竭大鼠JAK_1-STAT_3信号通路的影响[J]. 新中医 2011(07)

    标签:;  ;  

    电针促进面神经损伤修复的JAK1-STAT3信号转导机制研究
    下载Doc文档

    猜你喜欢