妊高征患者胎盘滋养细胞凋亡基因表达谱的研究

论文摘要

目的：分析妊娠高血压综合征（妊高征）患者胎盘组织中的滋养细胞凋亡特征，探讨胎盘组织滋养细胞凋亡现象与妊高征病因及病理生理学之间的关系。方法：采用电镜扫描、原位细胞凋亡标记（TUNEL）、及流式细胞仪等技术，获得妊高征患者胎盘组织中的滋养细胞凋亡证据。结果：（1）电镜下，妊高征患者胎盘组织滋养细胞的超微结构均存在细胞核形态不规则、核膜固缩、异染色质异常分布、细胞质内线粒体基质变深、嵴模糊或排列紊乱、滋养细胞空泡化等凋亡形态学变化；（2）TUNEL法检测发现，妊高征患者胎盘组织中存在较多凋亡滋养细胞，而正常胎盘组织中少见凋亡滋养细胞；（3）正常胎盘组织流式细胞检测图中凋亡细胞峰（Apo峰）不明显，妊高征患者胎盘组织的流式细胞检测图中均存在较明显的亚二倍体DNA含量细胞峰（Apo峰）。结论：妊高征患者胎盘组织存在滋养细胞凋亡特征，可能与妊高征的发生发展密切相关。目的：采用基因芯片技术筛查妊高征胎盘组织滋养细胞凋亡基因的差异表达，探讨滋养细胞凋亡与妊高征发病的关系。方法：妊高征患者20例为妊高征组，正常孕妇10例为对照组。采用上海博星公司生产的基因芯片进行凋亡基因表达谱的筛查。判断基因差异表达的标准为：（1）cy5（妊高征组）／cy3（对照组）的自然对数绝对值＞0.69，cy3与cy5的信号相差2倍以上；（2）cy3或cy5、cy3和cy5的信号值其中之一必须＞800。结果：基因芯片筛查有差异表达的凋亡相关基因10个，占基因芯片筛查凋亡基因总数的5％。妊高征胎盘组织中的凋亡基因表达均明显下调，即cy5与cy3的比值＜1。其中包括具有明显抗凋亡作用的SFRP2、IAP2、DHCY24及ATPIA1基因。结论：在妊高征胎盘滋养细胞存在显著凋亡现象的形态学证据支持下，妊高征患者胎盘中具有抗凋亡作用的基因表达明显下调，将可能导致胎盘滋养细胞凋亡，从而导致妊高征发生发展。目的：实验验证部分差异表达基因在妊高征患者胎盘组织中的表达水平，论证芯片杂交实验结果的可靠性和可信度。方法：提取妊高征患者及正常胎盘组织总RNA，采用RT-PCR、Western Blot技术检测部分差异表达基因在妊高征患者胎盘组织中的表达水平。结果：验证的10个差异表达基因，在妊高征患者胎盘组织中的表达水平均明显低于正常对照。结论：所选验证基因的表达趋势与在基因表达谱中的变化一致，提示本研究中基因表达谱的实验结果具有较好的可信度和可靠性，深入分析差异表达基因与妊高征之间的关系将可能为阐明妊高征的病因及病理生理学提供新的理论依据。

论文目录

• 缩略语
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 参考文献
• 第一部分:妊高征患者胎盘滋养细胞凋亡现象的观察
• 一、材料与方法
• 二、结果
• 三、讨论
• 四、小结
• 五、参考文献
• 第二部分:妊高征患者胎盘滋养细胞凋亡基因表达谱的研究
• 一、材料与方法
• 二、结果
• 三、讨论
• 四、小结
• 五、参考文献
• 第三部分:差异表达基因表达水平的实验验证
• 一、材料与方法
• 二、结果
• 三、讨论
• 四、小结
• 五、参考文献
• 致谢
• 附录
• 综述
• 发表的论文