HIF-1α对甲状腺滤泡状癌和乳腺癌EMT发生的影响及机制研究

论文摘要

目的：通过体内外研究初步探讨低氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α）对甲状腺滤泡状癌（follicularthyroid carcinoma, FTC）和乳腺癌上皮间质转化（epithelial-mesenchymaltransition，EMT）的影响及机制研究。方法：采用免疫组化SP法，检测42例FTC组织中HIF-1α、锌指转录因子Snail、波形蛋白（Vimentin）和钙黏蛋白E（E-cadherin）的表达和69例乳腺癌组织中HIF-1α、金属硫蛋白（MT）、锌指转录因子Snail、Slug、Twist、Zeb1和E-cadherin的表达。MTT法检测低氧化学模拟剂CoCl2在不同浓度下对FTC WRO细胞和乳腺癌MCF-7细胞活力的影响，RT-PCR法检测在不同浓度CoCl2处理下WRO细胞和MCF-7细胞HIF-1α的表达。免疫荧光法观察WRO细胞HIF-1α蛋白的亚细胞定位。Western blot检测WRO细胞CoCl2处理不同时间对HIF-1α、Snail、Vimentin和E-cadherin表达的影响及MCF-7细胞CoCl2处理不同时间对HIF-1α、Snail、Slug、Twist、Zeb1和E-cadherin表达的影响，RT-PCR检测MCF-7细胞CoCl2处理不同时间对MT2A表达的影响。Transwell实验检测CoCl2处理对WRO细胞侵袭转移的影响。结果：在42例FTC组织中，HIF-1α、Snail、Vimentin和E-cadherin的表达与多项临床指标相关且四者表达显著相关（P<0.05）。在WRO细胞中，随着CoCl2处理浓度的增高HIF-1α mRNA表达逐渐增高。CoCl2处理的WRO细胞内HIF-1α发生核转位。CoCl2处理的WRO细胞随着HIF-1α表达的增多，Snail和Vimentin表达逐渐增多，E-cadherin表达逐渐减小（P<0.05）。CoCl2处理后WRO细胞侵袭、转移细胞数目较对照组明显增加。在69例乳腺癌组织中，HIF-1α、MT、Snail、Slug、Twist、Zeb1和E-cadherin的表达与多项临床指标相关（P<0.05）。在MCF-7细胞中，随着CoCl2处理浓度的增高HIF-1α mRNA表达逐渐增高。CoCl2处理的MCF-7细胞随着HIF-1α表达的增多，MT2A、Snail、Slug、Twist和Zeb1表达逐渐增多，E-cadherin表达逐渐减小（P<0.05）。结论：HIF-1α能够通过上调Snail与Vimentin的表达，下调E-cadherin的表达进而促进FTC EMT的发生；HIF-1α可通过上调MT的表达来增强Snail、Slug、Twist和Zeb1的表达，进而下调E-cadherin的表达，促进乳腺癌EMT的发生。

论文目录

• 符号说明
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 HIF-1α对甲状腺滤泡状癌 EMT 发生的影响及机制研究
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第二部分 HIF-1α对乳腺癌 EMT 发生的影响及机制研究
• 1 材料和方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 全文总结
• 参考文献
• 文献综述
• 参考文献
• 附图
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的论文