论文摘要
肿瘤是环境因素和机体遗传因素交互作用经过多个阶段的发展而产生的。随着人类基因组计划和国际人类基因组单体型图计划的完成,肿瘤的遗传易感基因研究成为当前功能基因组学的研究热点。肿瘤易感基因的鉴定对于指导肿瘤的预警、预防和个体化诊疗等具有重要意义。流行病学研究显示,肝癌主要由病毒感染和黄曲霉毒素等环境因素的暴露导致,但并不是所有的风险因素暴露者都患癌,提示机体的遗传因素对致癌机制也有重要的影响。鼻咽癌也是我国流行的有明显的种族性和地域性的恶性肿瘤,比如在中国南方,发病率高达15-50/100000,几乎是白种人发病率的100倍。鼻咽癌的发生是由EB病毒感染、环境风险因素和基因易感性共同作用的结果。检测和确定与上述疾病相关的易感基因及易感单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP),将有助于上述疾病的诊断,治疗和预防。p53通路的基因与肿瘤的发生及发展关系密切。已有研究显示该通路基因的多态性可以影响p53通路的活性进而影响肿瘤的发生和发展。我们课题组之前已经对p53通路中的2个功能性SNP(p53 Codon72和MDM2 SNP309位点)进行了研究,结果发现在中国人群中,这两个SNP位点与肝癌的易感性之间没有相关性,但MDM2 SNP309与鼻咽癌的发生风险及更严重的淋巴结转移之间具有遗传学关联。p53通路中的基因很多,除上述2个SNP位点外,其它基因的多态性与肝癌和鼻咽癌的遗传易感性的关系也很密切。目前p53通路基因中重要的SNPs还包括p53 Codon47、PTEN IVS4+109ins5和-9C→G、p73 G4C14- A4T14以及AKT1基因的5个SNPs(rs3803300、rs1130214、rs3730358、rs2498799和rs2494732)等,对这些SNPs开展研究同样具有重要意义。我们采用聚合酶链式反应-限制性酶切片段多态性(Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP)方法,在434例肝癌病例、593例鼻咽癌病例和480例健康对照中对PTEN IVS4+109ins5和-9C→G、p73 G4C14- A4T14以及AKT1基因的5个SNPs(rs3803300、rs1130214、rs3730358、rs2498799和rs2494732)进行基因分型,采用PCR产物测序的方法对p53 Codon47位点进行频率验证和分型。研究结果表明,在肝癌总体样本中AKT1基因SNP1多态性位点(rs3803300)位点与肝癌的易感性之间不存在关联,但进一步根据HBV携带状态进行分层分析后发现,在非HBV携带者中,AKT1 SNP1多态性位点与肝癌的易感性显著相关,携带G等位的基因型显著增加了肝癌的患病风险(OR=1.93, 95%CI =1.21-3.09, P=0.006)。另外,我们还对AKT1基因的5个SNP(srs3803300、rs1130214、rs3730358、rs2498799和rs2494732)构建了单体型并进行了关联分析,结果显示所有关联的单体型均以SNP1-SNP2的GG单体型为核心风险单体型与肝癌的高发风险相关,而且在进一步的分层分析中,关联仍然显著。在鼻咽癌总体样本中,p73 G4C14-A4T14与鼻咽癌的易感性相关联,AT等位型与鼻咽癌的高发风险相关。以往研究显示,AKT1与许多肿瘤的发生发展的关系极为密切,但至今还没有关于AKT1基因多态性与肝癌和鼻咽癌遗传易感性的研究报道。我们对关联的SNP1多态性位点进行了初步的功能研究,但是通过报告基因和EMSA实验,我们发现这个位点不具有功能。为了进一步寻找功能性SNP,我们随机选择了招募自广西的96个正常个体,在关联位点周围约40Kb的区域采用间隔测序的方法构建连锁不平衡模块(LD模块)图谱,同时我们从国际人类单体型图计划(International HapMap Project,简称HapMap计划)数据库中下载了北京人群AKT1-SIVA-ADSSL1基因区域约115Kb的SNP基因型数据。结果发现,广西人群和HapMap计划中北京人群在该区域的LD模式非常相似,并且还发现在AKT1的上游有两个基因(SIVA和ADSSL1),他们与肿瘤的发生也非常密切。因此,我们从HapMap数据库中下载了AKT1-SIVA-ADSSL1基因区域约115Kb的数据,采用Haploview软件选择标签SNP进行分型。在增加的12个标签SNP中,又发现了一个关联的SNP,这个SNP(命名为hSNP2)和之前关联的SNP1位于同一个LD模块中。我们对第二个关联位点hSNP2进行了初步的功能研究,通过EMSA和mRNA定量实验发现,hSNP2的G等位具有显著增加的转录活性,并且免疫组化实验显示,与携带C/C基因型的个体相比,携带G/G基因型的个体肝癌组织中AKT1蛋白的表达水平更高。总之,通过对中国人群中p53通路基因多态性与肝癌和鼻咽癌的遗易感性的研究,我们发现AKT1基因的SNP1和hSNP2位点与肝癌的遗传易感性相关联,p73基因G4C14- A4T14多态性位点与鼻咽癌的易感性相关联,这可能为肝癌和鼻咽癌的人群预防和治疗提供了新的遗传标记和靶标。
论文目录
相关论文文献
- [1].不同级别宫颈上皮内瘤变与人乳头状瘤病毒感染及p53蛋白表达的相关性[J]. 延边大学医学学报 2019(03)
- [2].云南汉族非综合征性唇腭裂与p53基因多态性的相关性研究[J]. 中国美容医学 2020(04)
- [3].p53突变与结肠癌的研究进展[J]. 岳阳职业技术学院学报 2020(02)
- [4].Ki-67、p53的表达水平在不同分子分型的乳腺浸润性导管癌中的临床意义[J]. 实用癌症杂志 2020(07)
- [5].头颈部鳞状细胞癌中与p53突变相关基因的鉴定[J]. 现代肿瘤医学 2020(17)
- [6].p53和Ki-67与子宫内膜癌患者临床病理特征的关系研究[J]. 当代医学 2020(21)
- [7].老年非小细胞肺癌化疗患者p53及VEGF水平与生存状况的相关性[J]. 中国老年学杂志 2020(15)
- [8].p53基因家族与甲状腺癌的相关研究进展[J]. 中国普外基础与临床杂志 2019(11)
- [9].检测p53蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义[J]. 中外医学研究 2019(31)
- [10].p53与消化系统恶性肿瘤的研究进展[J]. 实用肿瘤学杂志 2016(05)
- [11].胰岛素受体酪氨酸激酶底物p53蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及其对患者预后的影响[J]. 肿瘤防治研究 2017(04)
- [12].子宫内膜癌中P53、Ki-67和CA125的表达[J]. 肿瘤基础与临床 2017(01)
- [13].P53和Ki-67在喉鳞状细胞癌中的表达及与短期预后的关系[J]. 临床与病理杂志 2017(03)
- [14].p53在胶质瘤中的研究进展[J]. 海南医学 2017(08)
- [15].p53免疫组化判定肾母细胞瘤预后的研究[J]. 临床小儿外科杂志 2016(02)
- [16].抑癌基因p53、PTEN与子宫内膜癌预后相关性分析[J]. 河南科技大学学报(医学版) 2017(02)
- [17].Bcl-2,Cox-2,HSPs和p53在骨肉瘤患者中的表达及临床意义[J]. 临床与病理杂志 2017(06)
- [18].VEGF、P53的表达与食管癌临床特征及预后的关系[J]. 河北医药 2017(12)
- [19].P53在肿瘤微环境、细胞代谢中的调控机制及检测技术的研究进展[J]. 临床检验杂志 2017(08)
- [20].p53和鼠双微粒体2在肾母细胞瘤中的表达[J]. 中华实用诊断与治疗杂志 2016(02)
- [21].黄芪多糖注射液联合吉非替尼对肺癌患者组织P53及Ki-67蛋白表达的影响[J]. 中国生化药物杂志 2016(03)
- [22].p53和Ki-67表达在乳腺癌中的临床意义[J]. 国际检验医学杂志 2016(05)
- [23].乳腺浸润性导管癌X线征象与Ki-67、p53表达的关系及临床意义[J]. 解放军医学院学报 2016(04)
- [24].P53蛋白表达与晚期卵巢浆液性腺癌预后的相关性[J]. 中国医学科学院学报 2016(02)
- [25].p53与胃肠道恶性肿瘤相关性的研究进展[J]. 中国中西医结合消化杂志 2016(04)
- [26].胸腺瘤组织中P53、Ki-67、VEGF表达的相关性[J]. 临床和实验医学杂志 2016(11)
- [27].p53蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达及意义探究[J]. 中国实用医药 2016(18)
- [28].P53在结节性甲状腺肿合并甲状腺癌中的表达及其相关性研究[J]. 实用癌症杂志 2016(10)
- [29].PTEN和P53蛋白与子宫内膜癌发生发展的相关性研究[J]. 临床和实验医学杂志 2016(21)
- [30].COX-2、P53在胃癌组织中表达的意义[J]. 临床合理用药杂志 2014(34)