论文摘要
目的神经元退行性变疾病（neurodegenerative diseases, NDD）是一类临床表现各异,以相关神经系统结构和功能进行性减退为特征的疾病。随着人口老龄化,此类疾病对人类健康威胁日益增加。脑组织对缺血缺氧十分敏感,缺血/再灌注是导致NDD的重要因素之一。研究缺血/再灌注致NDD,探讨其发病机制,对于开发新药、拓展治疗新途径具有重要意义。超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）是脑内清除自由基的主要酶,SOD1（Cu-ZnSOD）和SOD2（Mn-SOD）是参与SOD抗氧化应激的主要亚型。以往研究主要集中在SOD1和SOD2在急性脑缺血/再灌注损伤中的作用,对于SOD1和SOD2在神经元退行性变进程中的作用尚缺乏相关报道。本课题旨在从整体、亚细胞、分子等不同水平研究缺血/再灌注致神经元退行性变的发病机制,探讨SOD1和SOD2与缺血/再灌注致神经元退行性变的关系,以期为进一步研究缺血/再灌致神经元退行性变,开发新的有效的神经保护剂奠定基础。方法1.模型建立:以40 g.L-1水合氯醛溶液400 mg.kg-1 ip麻醉小鼠,从颈总静脉抽取并回输约40%总血量加双侧颈总动脉夹闭20 min建立I/R损伤模型。假手术组仅麻醉并分离暴露双侧颈总动脉和右侧颈总静脉20 min。2.分别于术后5 d、15 d、30 d和60 d进行行为学和病理组织学检测,并检测脑组织丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量以评价缺血/再灌注致神经元退行性变进程及脑氧化应激情况。3.采用RT-PCR和Western blot分别检测术后5 d、15 d、30 d和60 d大脑皮层和海马SOD1、SOD2 mRNA水平和蛋白表达水平,探讨SOD1和SOD2与神经元退行性变的关系及其作用机制。4.分别于术后5 d、15 d、30 d和60 d采用分光光度法检测脑组织线粒体呼吸链复合体Ⅰ-Ⅳ活性,研究线粒体功能异常与缺血/再灌注致神经元退行性变的关系,探讨神经元退行性变的发病机制。结果1.与假手术组相比,脑缺血/再灌注组小鼠空间学习记忆能力显著进行性降低,脑组织MDA含量进行性显著升高（P<0.05）;病理组织学检测显示海马出现进行性神经元核固缩加重和神经元丢失。2.生化检测显示缺血/再灌注组小鼠脑组织SOD1活性表现为先降低后升高,术后5 d和15 d显著低于各自假手术组（P<0.05）,术后30 d和60 d与假手术组相比无显著差异（P>0.05）;RT-PCR检测大脑皮层和海马SOD1 mRNA表达水平与假手术相比无显著差异（P>0.05）;Western blot检测显示术后5 d和15 d大脑皮层和海马SOD1蛋白表达较假手术组显著降低（P<0.05）,术后30 d和60 d SOD1蛋白表达较假手术组显著增加（P<0.05）。3.生化检测显示缺血/再灌注组小鼠脑组织SOD2活性显著低于假手术组（P<0.05）;RT-PCR检测大脑皮层和海马SOD2 mRNA表达水平与假手术相比无显著差异（P>0.05）;Western blot检测显示术后各时间点大脑皮层和海马SOD2蛋白表达均较假手术组显著降低（P<0.05）。4.线粒体功能检测显示,缺血/再灌注术后5 d组各脑组织线粒体呼吸链复合体Ⅰ-Ⅳ活性均显著低于假手术组（P<0.01）;术后15 d、30 d和60 d各时间点,线粒体呼吸链复合体Ⅰ和复合体Ⅱ活性与假手术组相比差异无统计学意义（P>0.05）,复合体Ⅲ和复合体Ⅳ活性显著低于假手术组（P<0.05）。结论本研究结果提示:1.采取本实验方法可有效建立缺血/再灌注致神经元退行性变动物模型。2.缺血/再灌注致神经元退行性变涉及脑氧化应激反应增强,SOD2表达降低及SOD1表达和活性不平行。3.线粒体呼吸链复合体III和IV的功能异常也涉及缺血/再灌注致神经元退行性变的发生。综上所述,SOD功能异常参与了缺血/再灌注致神经元退行性变的发生。其作用机制可能涉及SOD2表达降低及出现功能异常的SOD1表达;SOD表达和功能异常导致氧化应激平衡失调,后者损伤线粒体呼吸链复合体,引发神经元退行性变。
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- [1].犀角地黄汤对缺血性脑卒中再灌注大鼠模型自噬水平的调节机制分析[J]. 临床和实验医学杂志 2020(04)
- [2].瘦素在肝缺血/再灌注致肾损伤中作用的研究[J]. 感染.炎症.修复 2009(02)
- [3].再灌注早期高血糖加重脑卒中脑糖的增加[J]. 神经药理学报 2015(04)
- [4].牛磺酸增强渐增再灌注心肌保护作用的实验研究[J]. 中国药理学通报 2012(06)
- [5].核因子κB与缺血/再灌注肺损伤[J]. 医学综述 2008(11)
- [6].针刺对缺血/再灌注脑组织基因表达影响的研究进展[J]. 医学综述 2008(14)
- [7].己酮可可碱对大鼠离体心脏缺血/再灌注及缺钙/复钙损伤的保护作用[J]. 中国药理学通报 2008(07)
- [8].炎性因子在脑缺血——再灌注不同时期的基因表达[J]. 济宁医学院学报 2014(04)
- [9].再灌注方法对急性前壁心肌梗死预后的影响[J]. 山东医药 2008(34)
- [10].浮针配合再灌注活动治疗原发性痛经32例临床研究[J]. 江苏中医药 2020(02)
- [11].浮针疗法配合再灌注活动治疗痛证研究进展[J]. 按摩与康复医学 2020(12)
- [12].体外再灌注血在缺血/再灌注诱导人肾小管上皮细胞凋亡模型构建中的应用[J]. 山东医药 2013(32)
- [13].缺血/再灌注肺损伤机制的研究进展[J]. 医学综述 2011(04)
- [14].大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型改良的实验研究[J]. 宁夏医学院学报 2008(01)
- [15].限制性再灌注对脑缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 中国微侵袭神经外科杂志 2020(04)
- [16].浮针再灌注疗法治疗腰椎间盘突出症的疗效观察[J]. 智慧健康 2020(19)
- [17].浮针扫散结合再灌注活动治疗桡骨茎突狭窄性腱鞘炎医案1则[J]. 天津中医药大学学报 2020(05)
- [18].C型利尿钠肽在大鼠心肌缺血/再灌注肾脏损伤中的作用及机制[J]. 中国老年学杂志 2013(13)
- [19].急性心肌梗死后冠状动脉自发再灌注对临床预后影响的观察研究[J]. 中国老年保健医学 2012(01)
- [20].七氟烷对肾脏缺血/再灌注糖尿病大鼠肝功能的影响[J]. 中南医学科学杂志 2012(05)
- [21].T淋巴细胞在缺血肝脏再灌注早期表达的实验研究[J]. 现代预防医学 2011(18)
- [22].基于压力相平面推导的τ和K在评价离体缺血/再灌注大鼠心脏左心室舒张功能中的作用[J]. 中国病理生理杂志 2010(02)
- [23].大鼠局灶性脑缺血/再灌注后血脑屏障通透性改变时相的研究[J]. 中风与神经疾病杂志 2010(02)
- [24].红景天苷抑制缺血/再灌注诱导的心肌微血管内皮细胞凋亡[J]. 中国心血管杂志 2015(01)
- [25].急性心肌梗死自发再灌注预测因素及其短期预后[J]. 中国心血管杂志 2014(01)
- [26].小胶质细胞在大鼠暂时性局灶脑缺血再灌注后脑损伤区活化反应的初步研究[J]. 神经解剖学杂志 2014(03)
- [27].线栓法致大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型的制作及思考[J]. 医学综述 2011(21)
- [28].早期抗炎治疗对脑缺血/再灌注大鼠BDNF表达的影响[J]. 重庆医科大学学报 2008(S1)
- [29].α-酮戊二酸脱氢酶复合物在缺血性脑卒中后的适应性再灌注中的保护作用研究[J]. 中国临床药理学与治疗学 2020(09)
- [30].右美托咪定预处理对局灶性脑缺血/再灌注星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白表达的影响[J]. 中国现代应用药学 2015(07)