松香类手性衍生试剂在毛细管电泳手性分离中的应用研究

论文摘要

手性是自然界中普遍存在的现象,很多具有生物活性的物质（包括药物）都具有手性中心。氨基酸是与肽、蛋白质和酶等生物大分子相关的生物活性物质,由于对称性及光学活性的不同,氨基酸的D、L 异构体在生物体内吸收、消化、新陈代谢和分泌等过程中的作用是不同的。生物体内不同构型的氨基酸在传递神经信息、调节代谢通路及肽和蛋白质的合成等许多生理过程中起着不同的作用。在医学和药学领域,在现有的1850 种药物（包括天然药物和合成药物）中,1045种药物具有手性中心。但是,往往只是其中一种对映体具有药理活性,而另一种对映体的存在会影响药效,甚至是有害的。因此,对映体的分离和检测,对于生命科学及其它相关科学领域均具有重要意义。本文首次将松香类手性衍生试剂应用于毛细管电泳手性分离分析,研究了氨基酸及多巴、氨己烯酸等氨基药物的衍生、分离条件,建立了氨基化合物对映体的间接手性分离新体系,并对血浆样品中的氨己烯酸药物进行了分离分析。论文的主要内容包括三个方面: 1. 首次采用松香类手性衍生试剂—脱氢松香基异硫氰酸酯,来衍生氨基酸及多巴对映体,以毛细管电泳在非手性介质中分离对映体衍生物。氨基酸衍生物的对映体分离可在pH 9.5 的硼砂缓冲液中进行,并加入5 mmo/L 十二烷基硫酸钠（sodium dodecyl sulfate,SDS）和20%CH3CN 作为添加剂。多巴对映体衍生物的分离则在pH 8.0,含有17 mmol/LSDS 及25%CH3CN 的磷酸氢二钠缓冲液中进行。分别考察了添加剂、缓冲液的pH 及浓度、毛细管柱温度、分离电压等因素对衍生物的分离及迁移时间的影响,确立了最佳分离条件。五种氨基酸对映体衍生物的分离度在0.9-2.0范围之间,多巴对映体衍生物的分离度为1.4。2. 将脱氢松香基异硫氰酸酯用于手性药物氨己烯酸的衍生,并对其衍生产物的毛细管电泳分离进行了详细的研究。实验发现,氨己烯酸对映体经该试剂衍生后,也可在非手性介质中得到良好的分离,其最佳分离条件为:50 mmo/L Na2HPO4 缓冲液,pH 9.0 ,含25%CH3CN 及17 mmo/L SDS,分离电压20 kV,

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一章 综述
• 1. 引言
• 2. 毛细管电泳分离模式
• 2.1 毛细管区带电泳
• 2.2 毛细管凝胶电泳
• 2.3 胶束电动色谱
• 2.4 毛细管等电聚焦
• 2.5 毛细管等速电泳
• 3. 毛细管电泳手性分离方法
• 3.1 直接分离
• 3.2 间接分离
• 3.2.1 胶束准固定相中的间接手性分离
• 3.2.2 聚合物修饰的准固定相中的间接手性分离
• 3.2.3 疏水相互作用的选择性
• 3.2.4 间接分离方法的优点及局限性
• 4. 本文主要研究工作
• 参考文献
• 第二章 脱氢松香基异硫氰酸酯用于氨基酸和多巴对映体的毛细管电泳手性分离研究
• 1. 引言
• 2. 实验部分
• 2.1 仪器与试剂
• 2.2 缓冲液和样品溶液的配制
• 2.3 衍生方法
• 2.4 毛细管电泳
• 3. 结果与讨论
• 3.1 衍生条件的优化
• 3.1.1 TEA 浓度对衍生反应的影响
• 3.1.2 反应温度对衍生反应的影响
• 3.1.3 反应时间对衍生反应的影响
• 3.1.4 衍生试剂与氨基酸的物质的量之比对反应的影响
• 3.2 分离条件的优化
• 3.2.1 缓冲液及添加剂对分离的影响
• 3.2.2 缓冲液pH 对分离的影响
• 3.2.3 缓冲液浓度对分离的影响
• 3.2.4 毛细管柱的温度对分离的影响
• 3.2.5 分离电压对分离的影响
• 4. 结论
• 参考文献
• 第三章 脱氢松香基异硫氰酸酯用于毛细管电泳分离氨己烯酸对映体的研究
• 1. 引言
• 2. 实验部分
• 2.1 仪器与试剂
• 2.2 缓冲液和样品溶液的配制
• 2.3 血浆样品处理
• 2.4 衍生方法
• 2.5 毛细管电泳
• 3. 结果与讨论
• 3.1 分离条件的优化
• 3.1.1 SDS 浓度对分离的影响
• 3.1.2 乙腈含量对分离的影响
• 3.1.3 缓冲液pH 对分离的影响
• 3.1.4 缓冲液浓度对分离的影响
• 3.1.5 毛细管柱的温度对分离的影响
• 3.1.6 分离电压对分离的影响
• 3.2 血浆样品分析
• 3.2.1 迁移时间和峰面积的重现性
• 3.2.2 线性关系
• 3.2.3 血浆样品中氨己烯酸对映体的分析
• 4. 结论
• 参考文献
• 第四章 降解脱氢松香基异硫氰酸酯应用于毛细管电泳分离氨基酸和氨己烯酸对映体的研究
• 1. 引言
• 2. 实验部分
• 2.1 仪器与试剂
• 2.2 缓冲液和样品溶液的配制
• 2.3 血浆样品处理
• 2.4 衍生方法
• 2.5 毛细管电泳
• 3. 结果与讨论
• 3.1 衍生条件的优化
• 3.1.1 TEA 浓度对衍生反应的影响
• 3.1.2 反应温度对衍生反应的影响
• 3.1.3 反应时间对衍生反应的影响
• 3.1.4 衍生试剂与氨基酸的物质的量之比对反应的影响
• 3.2 分离条件的优化
• 3.2.1 缓冲液及添加剂对手性分离的影响
• 3.2.2 缓冲液pH 对分离的影响
• 3.2.3 缓冲液浓度对分离的影响
• 3.2.4 毛细管柱的温度对分离的影响
• 3.2.5 分离电压对分离的影响
• 3.3 血浆样品中氨己烯酸对映体的分析
• 3.3.1 迁移时间及峰面积重现性试验
• 3.3.2 线性关系
• 3.3.3 血浆样品分析
• 4. 结论
• 参考文献
• 附录
• 攻读硕士学位期间发表（或待发表）的论文
• 致谢