论文摘要
目的:糖尿病视网膜病变(Diabetic retinopathy,DR)是糖尿病最常见和严重的微血管并发症之一,是糖尿病代谢紊乱和内分泌系统与血液系统损害在视网膜上的反映。DR发病机制复杂,是多因素协同作用的结果,但是在DR的发生发展过程中,它的一个中心病理变化是血液中白细胞与视网膜毛细血管内皮细胞的粘附与聚集。该过程主要依赖于内皮细胞表面粘附分子与单核细胞上相应配体的相互作用。在内皮细胞分泌的粘附分子中,细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule -1,ICAM-1)对糖尿病视网膜病变的发生和发展有着重要的作用。阿司匹林具有阻断血栓素A2(TXA2)、抑制血小板聚集、防止血栓形成等作用。本研究通过腹腔注射链尿佐菌素(streptozocin,STZ)诱导糖尿病大鼠模型,观察细胞间粘附分子-1(ICAM-1)在早期糖尿病大鼠视网膜上的表达,并用阿司匹林(aspirin)进行干预治疗,旨在探讨糖尿病视网膜病变早期的发病机制,并为临床用药提供一定的理论依据。方法:选择体重为180-220g雄性SD大鼠30只,并随机分为10只正常组(C组)用大鼠和20只建立糖尿病模型用大鼠。采用STZ诱导糖尿病大鼠模型,确认未用药且血糖<5mmol/l为对照组(C组);多饮、多食、多尿、血糖>16.9mmol/l为糖尿病大鼠模型。后者平均分为阿司匹林组(A组)和糖尿病组(D组)。三个月后,在预定时间点处死动物,取视网膜,用蛋白质印迹免疫分析(Western Blot Analysis)方法测定各组视网膜中ICAM-1在蛋白水平的表达,表达的产物进行SDS-PAGE凝胶电泳成像分析;摘取眼球标本,进行HE染色及免疫组化SABC染色,光镜下观察网膜结构损伤及ICAM-1表达情况,并应用图像分析对后者进行量化。结果:(1)血糖测定结果:与正常对照组相比,糖尿病组大鼠血糖明显升高(p<0.01),阿司匹林组与糖尿病组相比无统计学差异。(2)视网膜形态学观察:光镜下正常对照组大鼠视网膜的基本结构共分为10层,各层次分明,排列有序。糖尿病模型组大鼠视网膜组织各层次结构明显疏松,细胞排列松散、不规则,视网膜节细胞层及内核层水肿,内外核层分离。阿司匹林治疗组视网膜组织病理变化较糖尿病模型组有明显的改善。(3)免疫组化结果:糖尿病组大鼠视网膜中ICAM-1的含量比正常对照组明显增加,阿司匹林不但降低视网膜中ICAM-1的含量,而且可明显减弱其分子表达。(4)Western blot结果:各组均有ICAM-1蛋白表达,在糖尿病组明显高于正常对照组(P<0.05);阿司匹林组明显低于糖尿病组。阿司匹林组与正常对照组之间的ICAM-1在蛋白水平上无明显差别。结论:(1)三个月时,糖尿病大鼠视网膜内即存在ICAM-1含量的增加。(2)三个月时,糖尿病大鼠视网膜内即存在ICAM-1蛋白水平上的增加。(3)阿司匹林可以改善糖尿病大鼠早期视网膜的组织病理学改变并抑制ICAM-1的表达。
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