论文摘要
目的:本课题针对目前COPD发病机理不清且缺乏有效地治疗方法,根据目前国际上对细胞凋亡与COPD关系的研究,研究COPD大鼠凋亡基因和凋亡抑制基因的表达情况,同时给予止咳化痰苗药及糖皮质激素干预,观察其对凋亡基因和凋亡抑制基因表达的影响。方法:1.采用烟熏加脂多糖方法复制大鼠COPD模型,2.应用HE染色、半定量病理分析观察COPD大鼠肺组织结构变化。3.采用免疫组化和RT-PCR技术对凋亡调控基因(caspase-3/survivin)进行蛋白定性及转录水平定量分析研究,观察COPD组与对照组表达的差异。4.给予苗药灌胃及地塞米松治疗,观察治疗后上述指标在肺组织中表达的变化。结果:1、造模2月后,大鼠肺组织病理检查出现肺大泡、细支气管及肺间质有大量淋巴细胞等炎细胞浸润及小支气管平滑肌增生等表现。COPD组平均肺内衬间隔(MLI)较对照组明显增加,平均肺泡数(MAN)较对照组明显下降,与对照组比较有差异(P<0.01);COPD组肺支气管管壁增厚,管壁面积增加,管壁厚度占外径的百分比(WT%)和管壁横断面积占支气管总面积的百分比(WA%)显著高于正常组,与对照组比较有显著差异(P<0.01)。2、COPD模型组大鼠肺caspase-3蛋白阳性表达率高于对照组(P<0.05),主要表达在肺泡细胞及肺泡间质;caspase-3 mRNA半定量检测显示COPD组高于对照组(P<0.01)。各组平均肺内衬间隔(MLI)及平均肺泡数(MAN)均与caspase-3 mRNA的表达有较好的相关性(P<0.05)3、COPD组survivin蛋白主要表达在细小支气管和血管平滑肌阳性表达率与对照组比较明显增加(P<0.05);与对照组比较,COPD组survivin mRNA的表达增高(P<0.01),COPD组WT%及WA%值与survivinmRNA均成正相关(P<0.05).4、苗药干预治疗后大鼠一般症状减轻,肺组织病理检查发现肺组织炎细胞浸润明显减轻,与COPD组比较,平均肺内衬间隔(MLI)明显减小(P<0.01);平均肺泡数(MAN)较COPD明显增加(P<0.01);支气管管壁增厚,管壁面积增加,管壁厚度占外径的百分比(WT%)较COPD组明显降低(P<0.05);管壁横断面积占支气管总面积的百分比(WA%)较COPD组明显降低(P<0.01)。苗药组肺组织caspase-3/survivin蛋白表达较COPD组减轻,差异显著(P<0.05)。苗药组肺组织caspase-3/survivinmRNA表达较COPD组减轻,差异显著(P<0.01)。5.地米组与COPD组比较,平均肺内衬间隔(MLI)明显减小(P<0.01);平均肺泡数(MAN)较COPD明显增加(P<0.01),支气管管壁增厚,管壁面积增加,管壁厚度占外径的百分比(WT%)较COPD组降低(P<0.05);管壁横断面积占支气管总面积的百分比(WA%)较COPD组明显降低(P<0.01)。地米组肺组织caspase-3/survivin蛋白表达较COPD组减轻,有差异(P<0.05);caspase-3/survivinmRNA表达较COPD组减轻,差异显著(P<0.01)。
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