SGT促凋亡作用及Cyclin D3与VDR相互作用对其转录调控的影响研究

论文题目: SGT促凋亡作用及Cyclin D3与VDR相互作用对其转录调控的影响研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 生物化学与分子生物学

作者: 王汉洲

导师: 顾建新

关键词: 凋亡,线粒体,转录调控

文献来源: 复旦大学

发表年度: 2005

论文摘要: 第一部分 SGT的促凋亡功能研究 1990年最早在酵母细胞CDC蛋白中发现的TPR基序,是一个包含34个具有简并性氨基酸残基的多肽重复序列,它介导了多种生物学过程,比如细胞周期控制、转录抑制、蛋白质折叠、蛋白质运输和神经发生。SGT是含有TPR基序蛋白质家族的一员,1998年被证实能够与细小病毒H1的非结构蛋白NS1相互作用的蛋白,后来的研究表明生长激素受体、TGFD超家族的Myostatin和HIV的Vpu蛋白也可有相互作用,而在突触囊泡表面Csp/Hsc70/SGT形成分子伴侣复合物并表现出一种依赖ATP的分子伴侣活性,这种活性极有可能与突触传递有关,在线虫中用RNAi抑制SGT表达可提高Hsc70的分子伴侣活性从而导致β样淀粉肽超表达的线虫转基因模型中淀粉样斑块明显减少。而最近的一项研究表明SGT在细胞有丝分裂中有一定作用,但其分子机制尚不明确。近年来一些TPR蛋白如CHIP、Strap和Tpr2等被发现参与了细胞凋亡信号通路,提示SGT可能也有类似的功能,本研究则提供有力的证据表明SGT是具有促凋亡活性的。我们首先建立了SGT超表达的稳定细胞株,接下来用来诱导细胞凋亡实验结果显示SMMC-7721细胞中超表达SGT可以加速细胞凋亡并表现出细胞核碎裂等细胞凋亡特征;分别用CHX和STS诱导细胞凋亡的过程中,SGT的mRNA水平也有一定程度升高;用RNAi技术下调SGT的内源性表达可减少化学因子引发的细胞凋亡。缺失突变分析表明SGT的TPR结构域对于SGT的促凋亡活性是必要的。进一步研究表明在SMMC-7721细胞中超表达SGT并不改变细胞增殖和细胞周期,不仅如此,超表达SGT所致的细胞凋亡过程中伴随有PARP的剪切和细胞色素C的释放,且可被广谱的Caspases抑制剂所抑制,表明其凋亡途径是线粒体依赖的。已知Hsc70可以保护有DAN损伤、紫外辐射、血清饥饿和一些化学药物引起的细胞凋亡,且这种促凋亡功能是依赖其分子伴侣活性的,考虑到SGT可以调控Hsc70的分子伴侣活性,我们在细胞中超表达Hsc70,然而结果显示它并不能阻止SGT的促凋亡活性,因此表明存在另外的信号途径介导了这一生物学过程,本室以SGT为诱饵进行酵母双杂交的方法筛导了一些凋亡相关蛋白PIASI、Hsp90和BCl2L12可能有助与阐明SGT促凋亡机制。

论文目录:

中文摘要

Abstract

第一部分 SGT促凋亡功能的研究

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分 Cyclin D3与VDR相互作用及对其转录调控的影响研究

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第三部分 TPR蛋白质结构与功能研究进展

TPR的结构

TPR的功能

TPR与疾病

TPR与蛋白质工程

结论与展望

参考文献

后记

研究生期间发表论文和所受奖励

致谢

发布时间: 2005-09-19

参考文献

[1].中国儿童急性淋巴细胞白血病患者Cyclin D1、ERCC1基因多态性的研究[D]. 王思力.吉林大学2006
[2].细胞周期蛋白Cyclin D1与PACSIN2在影响细胞迁移中的作用及其机制的研究[D]. 孟辉.山东大学2010
[3].细胞凋亡中Cyclin A-Cdk2底物的筛选及其功能研究[D]. 何侃.吉林大学2009
[4].细胞周期调节关键分子Rb和CDK的分子进化分析[D]. 曹立环.复旦大学2013

SGT促凋亡作用及Cyclin D3与VDR相互作用对其转录调控的影响研究

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