论文摘要
本实验着重研究人乳腺癌组织中活化型MMP-2的分布以及MMP-2活化的分子机制。通过DQ 明胶原位酶谱分析的方法,在组织原位明确活化型MMP-2在乳腺癌组织的分布及意义; 同时又以人乳腺癌细胞系MCF-7 进行了体外实验来着重研究MMP-2 活化的相关分子机制。用Ⅰ型胶原包被培养介质后,培养细胞,利用酶谱分析方法检测瘤细胞条件培养基中MMP-2 在包被Ⅰ型胶原成分前后表达和活化的情况,用RT-PCR 的方法检测MT1-MMPmRNA 的表达,观察MT1-MMP 激活的MMP-2 在细胞侵袭中的作用。从而为明确MMP-2 活化的分子机制提供直接依据,进一步了解MMP-2 在肿瘤演进过程中的功能及其相互调控。结果显示,绿色荧光出现在乳腺癌细胞中,在癌巢部位均有较强的绿色荧光出现,而在癌旁组织中,绿色荧光表达的强弱不同,在肿瘤分级、淋巴结转移中有显著差异。在乳腺癌组织和癌旁组织中荧光表达的强弱也有显著差异。而在3 例正常乳腺组织中则未出现绿色荧光。MCF-7 细胞在包被后出现活化型的MMP-2,其MT1-MMPmRNA 表达水平均较对照组增高,差异有统计学意义;Boyden 小室检测用抗MT1-MMP 抗体处理组MCF-7 细胞侵袭力明显低于对照组,差异有统计学意义。因此,我们认为,乳腺癌组织中活化型MMP-2 定位于肿瘤细胞,其分布在肿瘤的演进过程中发挥重要作用; 同时,MT1-MMP 在MMP-2 的活化过程中发挥重要作用。
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