本文主要研究内容
作者张文立（2019）在《我国欧洲型PRRSV的流行病学调查与单克隆抗体的制备》一文中研究指出：猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的母猪流产、死胎和木乃伊胎等繁殖障碍和仔猪呼吸障碍症状的疾病。PRRSV可分为2个基因型,分别是以欧洲Lelystad virus毒株为代表的欧洲型(基因1型)和以美洲VR-2332为代表的美洲型(基因2型)。目前,国内有关欧洲型PRRSV流行病学研究较少,为了了解欧洲型PRRSV在中国的流行情况,加强对欧洲型PRRSV的监测十分重要。2016~2018年,本研究从全国350份疑似PRRSV感染的病料中检测到5株欧洲型PRRSV,并命名为ZD1株、WK14株、WK141株、WG9株和HN7株。对这5株病毒进行了全基因组序列分析及遗传演化分析。核苷酸比对结果显示,与美洲型参考株VR2332的全基因组核苷酸同源性为60.0%~60.4%,与欧洲型参考株Lelystad virus毒株核苷酸同源性为88.3%~88.9%。ZD1、WG9、HN7株与LNEU12株的核苷酸同源性最高分别为93.5%、93.3%、93.2%,WK14株与BJEU06-1核苷酸同源性最高为89.7%,WK141与NVDC-NM3核苷酸同源性最高为93.5%。Nsp2、ORF3和ORF4推导aa序列比对结果表明,本研究中ZD1株的ORF3提前26个aa终止,另外WK14、WK141、WG9和HN7株在ORF3的246位存在1个aa的缺失;WK14、WK141、WG9、HN7和ZD1株PRRSV在ORF4的66位皆存在1个aa的缺失;此外,这5株欧洲型PRRSV在Nsp2的357~360和411位分别存在4+1个aa的缺失。这种缺失或提前终止增加了欧洲型PRRSV的变异程度,然而这种变化对PRRSV生物学特性的影响尚不清楚。重组是造成PRRSV变异的主要原因之一,关于美洲型PRRSV发生重组的报道屡见不鲜,但目前为止关于欧洲型PRRSV重组现象的报道较少。重组分析表明,本研究分离的5株欧洲型PRRSV中,WK14是BJEU06-1和NVDC-FJ的重组病毒,重组区域位于第951~3251位碱基处;WK141是NVDCNM1-2011和HENZMD-10的重组病毒,重组区域位于7131~9111位碱基处。这种重组现象在欧洲型PRRSV中出现较少的原因比较复杂,推测可能与这类病毒株的特性有关。目前国内针对PRRSV抗体检测方法大多是针对N蛋白,但是欧洲型和美洲型PRRSV N蛋白血清抗体有交叉反应,无法通过检测抗体来判断欧洲型PRRSV在中国的流行情况,因此建立针对欧洲型PRRSV特异性抗体检测方法有十分重要的意义。本研究以超离纯化的PRRSV ZD1全病毒作为免疫原免疫小鼠,成功制备2株杂交瘤细胞株2C5和2C6。亚型鉴定表明,杂交瘤细胞2C5和2C6分泌的单克隆抗体重链均属于IgG2a亚类,轻链为kappa链。杂交瘤细胞2C5和2C6培养上清和制备的腹水中抗体的IFA效价分别为1:320,1:16000和1:320,1:8000。IFA试验表明2C5和2C6能区分欧洲型和美洲型PRRSV,说明2C5和2C6具有较好的特异性。用纯化的DV全病毒作为包被抗原,单克隆抗体2C5和2C6与病毒的结合可以被猪欧洲型PRRSV阳性血清阻断。本研究制备的2C5和2C6单克隆抗体为建立特异性检测欧洲型PRRSV抗体方法提供了基础。
Abstract
zhu fan shi yu hu xi zeng ge zheng (Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)shi you zhu fan shi yu hu xi zeng ge zheng bing du (Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)yin qi de mu zhu liu chan 、si tai he mu nai yi tai deng fan shi zhang ai he zai zhu hu xi zhang ai zheng zhuang de ji bing 。PRRSVke fen wei 2ge ji yin xing ,fen bie shi yi ou zhou Lelystad virusdu zhu wei dai biao de ou zhou xing (ji yin 1xing )he yi mei zhou VR-2332wei dai biao de mei zhou xing (ji yin 2xing )。mu qian ,guo nei you guan ou zhou xing PRRSVliu hang bing xue yan jiu jiao shao ,wei le le jie ou zhou xing PRRSVzai zhong guo de liu hang qing kuang ,jia jiang dui ou zhou xing PRRSVde jian ce shi fen chong yao 。2016~2018nian ,ben yan jiu cong quan guo 350fen yi shi PRRSVgan ran de bing liao zhong jian ce dao 5zhu ou zhou xing PRRSV,bing ming ming wei ZD1zhu 、WK14zhu 、WK141zhu 、WG9zhu he HN7zhu 。dui zhe 5zhu bing du jin hang le quan ji yin zu xu lie fen xi ji wei chuan yan hua fen xi 。he gan suan bi dui jie guo xian shi ,yu mei zhou xing can kao zhu VR2332de quan ji yin zu he gan suan tong yuan xing wei 60.0%~60.4%,yu ou zhou xing can kao zhu Lelystad virusdu zhu he gan suan tong yuan xing wei 88.3%~88.9%。ZD1、WG9、HN7zhu yu LNEU12zhu de he gan suan tong yuan xing zui gao fen bie wei 93.5%、93.3%、93.2%,WK14zhu yu BJEU06-1he gan suan tong yuan xing zui gao wei 89.7%,WK141yu NVDC-NM3he gan suan tong yuan xing zui gao wei 93.5%。Nsp2、ORF3he ORF4tui dao aaxu lie bi dui jie guo biao ming ,ben yan jiu zhong ZD1zhu de ORF3di qian 26ge aazhong zhi ,ling wai WK14、WK141、WG9he HN7zhu zai ORF3de 246wei cun zai 1ge aade que shi ;WK14、WK141、WG9、HN7he ZD1zhu PRRSVzai ORF4de 66wei jie cun zai 1ge aade que shi ;ci wai ,zhe 5zhu ou zhou xing PRRSVzai Nsp2de 357~360he 411wei fen bie cun zai 4+1ge aade que shi 。zhe chong que shi huo di qian zhong zhi zeng jia le ou zhou xing PRRSVde bian yi cheng du ,ran er zhe chong bian hua dui PRRSVsheng wu xue te xing de ying xiang shang bu qing chu 。chong zu shi zao cheng PRRSVbian yi de zhu yao yuan yin zhi yi ,guan yu mei zhou xing PRRSVfa sheng chong zu de bao dao lv jian bu xian ,dan mu qian wei zhi guan yu ou zhou xing PRRSVchong zu xian xiang de bao dao jiao shao 。chong zu fen xi biao ming ,ben yan jiu fen li de 5zhu ou zhou xing PRRSVzhong ,WK14shi BJEU06-1he NVDC-FJde chong zu bing du ,chong zu ou yu wei yu di 951~3251wei jian ji chu ;WK141shi NVDCNM1-2011he HENZMD-10de chong zu bing du ,chong zu ou yu wei yu 7131~9111wei jian ji chu 。zhe chong chong zu xian xiang zai ou zhou xing PRRSVzhong chu xian jiao shao de yuan yin bi jiao fu za ,tui ce ke neng yu zhe lei bing du zhu de te xing you guan 。mu qian guo nei zhen dui PRRSVkang ti jian ce fang fa da duo shi zhen dui Ndan bai ,dan shi ou zhou xing he mei zhou xing PRRSV Ndan bai xie qing kang ti you jiao cha fan ying ,mo fa tong guo jian ce kang ti lai pan duan ou zhou xing PRRSVzai zhong guo de liu hang qing kuang ,yin ci jian li zhen dui ou zhou xing PRRSVte yi xing kang ti jian ce fang fa you shi fen chong yao de yi yi 。ben yan jiu yi chao li chun hua de PRRSV ZD1quan bing du zuo wei mian yi yuan mian yi xiao shu ,cheng gong zhi bei 2zhu za jiao liu xi bao zhu 2C5he 2C6。ya xing jian ding biao ming ,za jiao liu xi bao 2C5he 2C6fen bi de chan ke long kang ti chong lian jun shu yu IgG2aya lei ,qing lian wei kappalian 。za jiao liu xi bao 2C5he 2C6pei yang shang qing he zhi bei de fu shui zhong kang ti de IFAxiao jia fen bie wei 1:320,1:16000he 1:320,1:8000。IFAshi yan biao ming 2C5he 2C6neng ou fen ou zhou xing he mei zhou xing PRRSV,shui ming 2C5he 2C6ju you jiao hao de te yi xing 。yong chun hua de DVquan bing du zuo wei bao bei kang yuan ,chan ke long kang ti 2C5he 2C6yu bing du de jie ge ke yi bei zhu ou zhou xing PRRSVyang xing xie qing zu duan 。ben yan jiu zhi bei de 2C5he 2C6chan ke long kang ti wei jian li te yi xing jian ce ou zhou xing PRRSVkang ti fang fa di gong le ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国农业科学院的张文立，发表于刊物中国农业科学院2019-07-05论文，是一篇关于欧洲型论文,流行病学调查论文,单克隆抗体论文,中国农业科学院2019-07-05论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国农业科学院2019-07-05论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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