诱发电位评价细胞移植治疗大鼠脊髓损伤效果的研究 ——雪旺细胞和嗅鞘细胞联合移植

2020-12-03阅读(998)

论文摘要

目的:观察运动诱发电位（motor evoked potentials MEP）和感觉诱发电位（sensoryevoked potentials SEP）在评价雪旺细胞（Schwann cell s,SCs）与嗅鞘细胞（olfactoryensheathing cells,OECs）联合移植修复SCI大鼠效果中的作用,并进行诱发电位与大鼠后肢运动功能BBB评分相关性分析,以寻找客观、可靠、定量的评价细胞移植治疗SCI大鼠效果的方法,判定雪旺细胞与嗅鞘细胞联合移植治疗SCI大鼠的效果。方法:1将48只SD大鼠随机分为损伤对照组（A组）、实验对照组（B组）及雪旺细胞与嗅鞘细胞联合移植组（C组）,每组16只。2用NYU脊髓打击器,以25mm高度落下打击T9脊髓造成大鼠中度损伤模型,细胞移植组接受细胞移植,方法为:将Hoechst标记的浓度为50,000/ul的SCs和OECs悬液分别于脊髓损伤3、4、5、6周时移植到脊髓远近断端距离挫伤区边缘1mm的脊髓中线上,深度分别为1.75mm、1.5mm、1.0mm、0.5mm处,注入细胞悬液各1ul左右,注入后留针5分钟。实验对照组在相同部位注入相同剂量无血清的DF-12培养液;损伤对照组不进行干预。3从SCs和OECs联合移植组随机选取8只大鼠,分为环孢素注射组和对照组,每组4只,环孢素注射组自移植前一天开始皮下注射环孢素注射液每天一次,每次10mg/Kg,直到取材,对照组注射相同剂量生理盐水。4观察指标:1)诱发电位:记录脊髓损伤前,损伤即刻,移植前及取材前的SEP及MEP的潜伏期与波幅的变化情况。2)后肢运动功能BBB评分:于脊髓损伤后2天、移植无血清DF-12培养液后2天及SCs和OECs联合移植后2天进行一次BBB运动功能评分,以后每周进行一次,直到取材。结果:1各组动物在脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）后即刻SEP、MEP的潜伏期明显延长,波幅明显降低。伤后即刻各组SEP、MEP的潜伏期和波幅的值分别是A组潜伏期（13.1±7.62）ms,波幅（0.9±0.23）uV,B组潜伏期（11.8±1.70）ms,波幅（0.9±0.12）uV,C组潜伏期（6.6±1.20）ms,波幅（0.9±0.11）uV。2伤后6～12周发现SCs和OECs联合移植组的BBB评分较实验对照组明显提高（P＜0.01）,伤后12周SCs和OECs联合移植组的BBB评分与损伤对照组比较未见明显提高（P＞0.05）,其值分别是损伤对照组为（12.0±0.63）分,SCs和OECs联合移植组为（12.2±0.81）分。3伤后15周SCs和OECs联合移植组SEP和骨MEP与损伤对照组比较不具有显著性差异（P＞0.05）,与实验对照组比较有恢复（P＜0.01）。其值分别为损伤对照组SEP的潜伏期为（5.0±0.42）ms,波幅为（1.8±0.18）uV;实验对照组SEP的潜伏期为（8.1±1.51）ms,波幅为（1.5±0.10）uV:SCs和OECs联合移植组SEP的潜伏期为（4.2±0.79）ms,波幅为（2.0±0.29）uV:损伤对照组MEP潜伏期为（4.5±1.01）ms,波幅为（11.9±1.65）uV;实验对照组MEP潜伏期为（6.3±1.72）ms,波幅为（10.3±1.27）uV;SCs和OECs联合移植组MEP潜伏期为（3.8±0.50）ms,波幅为（12.5±1.47）uV。4伤后3周进行SCs和OECs移植比6周移植恢复的明显;伤后3周SEP的潜伏期为（2.2±0.19）ms,波幅为（2.3±0.19）uV,伤后3周MEP的潜伏期为（2.2±0.29）ms,波幅为（17.1±0.68）uV。在SCs和OECs移植前后进行免疫抑制治疗,脊髓损伤大鼠恢复的较为明显;取材前,用免疫抑制治疗SEP的潜伏期为（3.0±0.71）ms,波幅为（2.1±0.62）uV,MEP的潜伏期为（2.4±0.67）ms,波幅为（15.2±2.33）uV。结论:诱发电位及BBB评分的检查结果显示,SCs和OECs联合移植对SCI后大鼠的后肢运动功能及神经传导功能的恢复有一定的作用。早期进行SCs和OECs移植对于脊髓损伤大鼠的功能恢复较为明显,细胞移植前后进行免疫抑制治疗,有利于大鼠运动功能的恢复。诱发电位的变化可以反映脊髓传导功能的受损程度,诱发电位技术可以用于SCI定性、定位诊断及预后判断。

论文目录

摘要

ABSTRACT

1 前言

1.1 选题依据

1.2 文献综述

1.2.1 细胞移植在脊髓损伤修复中的作用

1.2.2 诱发电位在评价脊髓损伤大鼠中的应用

1.2.3 诱发电位在评价细胞移植修复脊髓损伤大鼠中的应用

1.2.4 脊髓损伤的其他评价方法

2 研究方法

2.1 研究对象和分组

2.2 脊髓损伤模型的建立

2.3 术后动物护理

2.4 细胞移植

2.5 诱发电位检查

2.5.1 感觉诱发电位检查

2.5.2 运动诱发电位检查

2.6 大鼠后肢的运动功能观察

2.7 统计学分析

3 研究结果与讨论

3.1 研究结果

3.1.1 术后动物一般情况

3.1.2 诱发电位检查结果

3.1.3 大鼠后肢运动功能评分

3.1.4 诱发电位与大鼠后肢运动功能BBB评分相关性分析

3.2 讨论

3.2.1 诱发电位作为评价脊髓损伤后功能恢复的重要客观指标

3.2.2 对感觉诱发电位和运动诱发电位的探讨

3.2.3 诱发电位与大鼠后肢运动功能BBB评分检查结果及二者的相关性

4 结论与建议

4.1 结论

4.2 建议

参考文献

致谢

附件

附件1

附件2

附件3

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标签：脊髓损伤论文; 细胞移植论文; 诱发电位论文; 运动功能评分论文;

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