论文摘要
目的:探讨细胞凋亡相关蛋白Caspase-3和Bcl-2、NF-kB基因在大鼠酒精性肝病中的表达及意义。方法:1.酒精性肝病动物模型的制备:Wistar大鼠(清洁级)随机分为两组,模型组给予40%酒精8g/kg/d,分二次灌胃,共12周;对照组给予等量的生理盐水灌胃。实验第8、12周末处死动物,左心室采血离心保存。2.利用全自动生化分析仪检测血清ALT和AST值。3.肝组织病理学检测:全部肝标本经10%中性福尔马林固定,常规石蜡包埋,切片厚5μm,做HE染色及天狼星红染色,观察肝组织的病理变化及纤维组织增生程度。4.细胞凋亡检测:采用TUNEL法检测肝细胞凋亡;免疫组化染色方法(采用SABC法)观察Caspase-3、Bcl-2和NF-kB的表达。结果:1.模型组与对照组比较血清ALT、AST值明显升高,ALT/AST比值>2,有显著性差异(P<0.05)。2.模型组与对照组比较,肝细胞明显肿胀,可见大小不等的脂肪空泡,部分处可见点状、灶壮坏死,肝组织内胶原纤维轻度增生,随造模时间延长模型组病变加重。3.凋亡的肝细胞主要位于肝组织中点状、灶状和碎屑样坏死区及其周围,模型组肝细胞凋亡指数明显高于对照组(P<0.05)。4.Caspase-3、Bcl-2和NF-kB阳性细胞主要分布在中央静脉及肝细胞坏死灶周围,模型组中凋亡相关蛋白Caspase-3和Bcl-2、NF-kB基因表达强度明显高于对照组(P<0.05)。结论:大鼠酒精性肝病发生与肝细胞调亡密切相关。大鼠酒精性肝病的发生、发展过程中Caspase-3、Bcl-2和NF-kB参与肝细胞凋亡。
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