论文摘要
苯是一种在工业上用途极其广泛的有机溶剂,它作为重要的生产原料及有机溶剂广泛应用于多个生产领域,长期接触苯可致苯中毒、再生障碍性贫血和白血病,但是迄今对苯中毒、苯致白血病的发病机理尚未完全阐明。近年来随着分子生物学技术的发展,苯致白血病机制得以从基因的水平进行探讨,但至今尚未有关于苯中毒人群基因差异表达的系统研究。 目的:研究不同程度苯中毒工人外周血白细胞肿瘤相关基因差异表达改变的情况,探讨接触苯导致肿瘤发生的分子机制。 方法:选择被法定职业病诊断机构确诊的6名制鞋作业苯中毒工人和1名疑似苯中毒工人作为实验组,6名苯中毒工人分别为慢性轻度苯中毒2例、慢性中度苯中毒2例、慢性重度苯中毒1例、再生障碍性贫血1例;将未接触毒物的非苯作业工人作为对照。实验组和对照组在我们跟踪调查的3个月内均无服用药物史,且实验组与对照组按年龄（差别3岁以内）、性别（均为女性）、文化程度、吸烟史、饮酒史等一比一配对。 用白细胞分离液分离出外周血白细胞,Trizol法提取RNA,琼脂糖凝胶电泳鉴定RNA的质量,纯化RNA,随后进行逆转录杂交探针标记,实验组样品采用反转录Cy3荧光标记cDNA（呈红色）,对照组样品采用反转录Cy5荧光标记cDNA（呈绿色）。利用七张含有2780个cDNA克隆的微阵列肿瘤相关基因芯片进行杂交,杂交信号用扫描仪进行扫描,然后将图像转化为基于荧光强度的数字信号,运用聚类分析软件,对筛选出的具有特异性表达的肿瘤相关基因进行分析。 实验结果:在测试的七张2780条肿瘤相关基因芯片中共发现特异性差异表达基因44个,这些基因出现上调或下调趋势。所有基因均已在GENEBANK中登录。上调表达的癌基因按蛋白产物的功能分为:① 生长因子类:GRO1、GRO2、TGFBR3基因;② 蛋白激酶类:RAF-1、PIM2、LYN基因;③ 线粒体膜因子类:BCL2基因;④ RAS家族类:RAP1A、RALB基因;以及mRNA干扰素诱导的跨
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