Ki67、CD133、Ezrin及RhoA在SW-13细胞株及肾上腺皮质肿瘤的表达及其临床意义

论文摘要

目的 检测增殖细胞核抗原Ki67、肿瘤干细胞标志物CD133、侵袭转移相关蛋白Ezrin、RhoA在SW-13细胞株体内外实验及肾上腺皮质肿瘤组织的表达,分析其与肾上腺皮质肿瘤临床病理参数的相关性,探讨上述指标在肾上腺皮质肿瘤发生发展的生物学意义。方法1、基础研究：将1×107/ml的SW-13细胞悬液分别接种于10只裸鼠双侧腹股沟皮下及10只裸鼠腹腔内,建立裸鼠皮下移植瘤模型和腹腔内转移模型,分析和比较两种模型的形成特点,HE染色观察组织病理形态,免疫组化检测Ki67、CD133、Ezrin及RhoA在SW-13细胞及其裸鼠移植瘤、转移瘤的表达；2、临床病理标本研究：采用免疫组化检测Ki67、CD133、Ezrin及RhoA在64例肾上腺皮质肿瘤（肾上腺皮质增生9例,ACA39例,ACC16例）及10例正常肾上腺皮质组织中的表达,分析它们的表达与患者临床病理参数的关系及它们之间的表达相关性。结果1、成功构建了SW-13细胞裸鼠皮下移植瘤及腹腔内转移模型。皮下移植瘤模型中10只裸鼠双侧腹股沟皮下均能成瘤,成瘤率为100%,剖腹发现10只裸鼠双侧肾上腺体积增大,皮下瘤最大的1只裸鼠出现腹腔内转移；腹腔内转移模型中10只裸鼠均能在接种部位的腹壁形成肿瘤,成瘤率为100%,腹腔内转移瘤结节主要分布在肠系膜和大网膜上,3只裸鼠胰腺及2只裸鼠的一侧肾脏可见到种植转移瘤。HE染色显示瘤组织病理性核分裂象多见,可见肿瘤性多核巨细胞,转移瘤结节为肠系膜淋巴结癌转移,完整结构已被破坏,受累的胰腺和肾脏均有明显的癌细胞浸润,双侧肾上腺体积为反应性增大。2、Ki67、Ezrin及RhoA在SW-13细胞株体内外实验中均呈强阳性或阳性表达。CD133在SW-13细胞呈阳性表达,在移植瘤和转移瘤呈弱阳性表达。3、Ki67在正常肾上腺皮质组织及肾上腺皮质增生组织不表达,在ACA和ACC阳性表达率分别为12.8%（5/39）、68.8%（11/16）,Ki67在ACC的表达程度明显高于ACA组、增生组及正常组（P均=0.000）,Ki67蛋白表达与患者性别、年龄、血压、肿瘤包膜侵犯及远处转移均无显著相关（P>0.05）,但与肿瘤大小、核分裂象数目及出血坏死密切相关（P<0.01）；CD133在正常肾上腺皮质组织、增生组织、ACA及ACC阳性表达率分别为30%（3/7）,33.3%（3/9）,35.9%（14/39）,37.5%（6/16）,其在4组间的表达无统计学差异（P>0.05）,CD133蛋白表达与患者性别、年龄、血压、肿瘤大小、包膜侵犯、核分裂象数目、出血坏死及远处转移均无显著相关（P均>0.05）；Ezrin在正常肾上腺皮质组织、增生组织及ACA中的阳性表达率分别为20%（2/10）、22.2%（2/9）、43.6%（17/39）,主要分布在细胞膜,在ACC阳性表达率为75%（12/16）,细胞膜及胞浆均有分布,Ezrin在ACC的表达程度明显高于ACA组、增生组及正常组（（P均<0.01））,Ezrin蛋白表达与患者性别、年龄、血压、肿瘤核分裂象数目、出血坏死及远处转移均无显著相关（P均>0.05）,但与肿瘤大小、包膜侵犯有关（P<0.05）；：RhoA在正常肾上腺皮质组织中不表达,在肾上腺皮质增生组织、ACA及ACC阳性表达率分别为11.1%（1/9）、33.3%（13/39）、56.3%（9/16）,RhoA在ACC的表达程度明显高于ACA组、增生组及正常组（P均<0.01）,在ACA组表达也高于正常皮质组（P<0.05）,RhoA蛋白表达与患者性别、年龄、血压、肿瘤核分裂象数目、出血坏死均无显著相关（P均>0.05）,但与肿瘤大小、包膜侵犯及远处转移有关（P<0.05）。4、肾上腺皮质肿瘤中Ki67表达程度与Ezrin、RhoA表达程度均呈正相关（γ分别为0.762、0.661,P<0.01）,Ezrin与RhoA表达程度亦呈正相关（7为0.745,P<0.01）。5、诊断性试验评价：Ki67、Ezrin及RhoA合并灵敏度81.3%,合并特异度89.6%,合并阳性似然比7.82,合并阴性似然比0.19,合并正确诊断指数0.709。结论1、利用SW-13细胞株构建了裸鼠皮下移植瘤模型和腹腔内转移模型两种模型,为研究不同组织微环境对SW-13细胞中Ki67、CD133、Ezrin、RhoA表达的影响提供了有意义的动物模型。2、Ki67、Ezrin、RhoA在ACC中均呈高表达,可作为判断肾上腺皮质肿瘤恶性潜能有意义的参考指标,联合检测三者有助于提高肾上腺皮质肿瘤良恶性鉴别的准确性。

论文目录

• 部分缩略语英汉对照表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 Ki67、CD133、Ezrin及RhoA在SW-13细胞株体内外实验的表达
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 第二部分 Ki67、CD133、Ezrin及RhoA在肾上腺皮质肿瘤的表达及其临床意义
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 全文结论
• 参考文献
• 综述： 肾上腺皮质肿瘤小鼠模型的研究进展
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文及参与的科研工作