论文摘要
诱导型和内皮型一氧化氮合酶在外阴癌前疾病和外阴鳞癌中的表达及意义目的一氧化氮(NO)具有通过多种途径促进血管生成的作用，一氧化氮合酶(NOS)作为NO合成的关键酶，其活性的增高与血管扩张、血管生成、肿瘤的发展和浸润密切相关。NOS包括三种同工酶，即神经型(nNOS)，诱导型(iNOS)和内皮型(eNOS)。本研究检测iNOS和eNOS在外阴正常皮肤、外阴上皮内非瘤样病变(NNEDV)、外阴上皮内瘤变(VIN)及外阴鳞癌(VSCC)中的表达，并以人原始造血细胞抗原(CD34)标记微血管内皮细胞，测量各组织的微血管密度(MVD)，探讨iNOS和eNOS与外阴癌前疾病和外阴鳞癌的关系。材料与方法一、实验材料1、标本选取中国医科大学附属第一医院病理教研室1996年至2006年经手术切除及活检存档的蜡块：外阴鳞癌(VSCC)30例；外阴上皮内瘤变(VIN)35例，其中VINⅠ～Ⅱ20例，VINⅢ15例；外阴上皮内非瘤样病变(NNEDV)60例，其中外阴鳞状上皮增生(SH)30例，外阴硬化性苔藓(LS)30例；外阴正常皮肤10例。收集外阴鳞癌患者的临床病理资料进行统计分析，包括：年龄、临床分期、病理分级、有无淋巴结转移。2、试剂兔抗人iNOS、eNOS多克隆抗体(工作浓度1：100)，兔抗人CD34多克隆抗体(工作浓度1：80)，即用型SABC试剂盒。二、实验方法免疫组织化学SABC法。三、结果判定iNOS和eNOS蛋白定位在细胞浆中，CD34蛋白主要定位于细胞浆中，少量在细胞膜亦有表达，均以棕黄色颗粒细胞为阳性细胞。计数每高倍镜下(40×10)阳性细胞数和微血管数目，选5个计数数值的平均数作为iNOS、eNOS的阳性表达数和MVD。四、统计学处理所有数据资料用SPSS13.0进行处理，各组计量资料的结果采用t检验，比较iNOS和eNOS表达的相关性采用Kappa检验，P＜0.05有统计学意义。结果1、iNOS在外阴癌前疾病和外阴鳞癌中的表达情况iNOS在SH中表达阳性的细胞数(14.83±3.79)与在LS中的(8.00±3.35)相比较有显著性差异(P＜0.05)。iNOS在VINⅢ中表达阳性的细胞数(20.13±4.91)与在VINⅠ～Ⅱ中的(13.60±4.16)比较有显著性差异(P＜0.05)。iNOS在VSCC中表达阳性的细胞数为44.18±5.08。2、eNOS在外阴癌前疾病和外阴鳞癌中的表达情况eNOS在SH中表达阳性的细胞数(17.86±4.82)与其在LS中的(6.43±3.87)相比较有显著性差异(P＜0.05)。eNOS在VINⅢ中表达阳性的细胞数(21.75±5.28)与在VINⅠ～Ⅱ中的(20.57±4.72)比较无显著性差异(P＞0.05)。eNOS在VSCC中表达阳性的细胞数为20.82±3.43。3、CD34在外阴不同疾病中的表达情况及其MVD值在不同外阴组织中CD34均呈阳性表达。SH的MVD值(21.58±2.48)与LS的(10.34±2.83)相比较有显著性差异(P＜0.05)。LS的MVD值与外阴正常皮肤的(20.44±3.66)相比较有显著性差异(P＜0.05)。VINⅠ～Ⅱ的MVD值(21.83±3.18)与VINⅢ(34.71±4.01)的相比较有显著性差异(P＜0.05)。VSCC的MVD值(39.88±7.65)与VIN的(31.91±3.93)相比较有显著性差异(P＜0.05)。4、iNOS和eNOS与VSCC临床病理特征的关系iNOS的表达与VSCC患者的临床分期、病理分级及有无淋巴结转移有关(P＜0.05)。eNOS的表达与VSCC患者的年龄、临床分期、病理分级及有无淋巴结转移均无关(P＞0.05)。5、iNOS和eNOS在VSCC中的表达与MVD的关系iNOS呈阳性表达肿瘤的MVD(46.35±4.36)与其呈阴性表达肿瘤的(31.50±4.77)相比较差异具有显著性意义(P＜0.05)，iNOS与MVD表达呈正相关。eNOS呈阳性表达肿瘤的MVD(42.25±6.50)与其呈阴性表达肿瘤的(38.56±9.67)比较差异无显著性意义(P＞0.05)。6、iNOS和eNOS在NNEDV中表达的关系在NNEDV中，iNOS和eNOS均阳性者为17例，iNOS阳性而eNOS阴性者为1例，eNOS阳性而iNOS阴性者为4例。iNOS表达与eNOS表达具有明显的正相关性(Kappa=0.811，P＜0.05)。结论1、iNOS和eNOS参与SH真皮内炎症过程中的血管扩张。2、iNOS和eNOS在LS真皮中扩张血管，代偿性地改善LS的血液循环状态。3、iNOS参与VIN真皮内的血管形成过程。4、iNOS对外阴鳞癌的血管生成具有促进作用，与VSCC的临床分期、病理分级和有无淋巴结转移均呈正相关，与VSCC的恶性进展有关。
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