鼻咽癌干细胞的初步研究

论文摘要

2002年，Al-Hajj发现人乳腺癌组织中，肿瘤细胞存在不同表型，只有一小群表型为ESA+CD44+CD24-的细胞亚群，能在裸鼠体内形成移植瘤，第一次证实了实体瘤干细胞的存在。此后，人脑胶质瘤干细胞、前列腺癌干细胞相继发现。肿瘤干细胞的存在，改变了我们对肿瘤的认识。肿瘤组织中的肿瘤细胞存在功能上的异质性，只有一小群肿瘤干细胞能形成肿瘤，大部分细胞为非肿瘤干细胞；肿瘤干细胞生成肿瘤时，分裂产生大量的非肿瘤干细胞，重建肿瘤组织的异质性。肿瘤干细胞是肿瘤转移和复发的根源。肿瘤干细胞可能来源与正常组织干细胞的突变。分离和鉴定肿瘤干细胞成为肿瘤研究的热点。 与EB病毒感染相关的鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）是高发于我国南方及东南亚地区的鼻咽部低分化鳞癌，虽然鼻咽癌的研究有了极大的进展，其5年生存率仍徘徊于50-60％，并未得到根本性的改善。导致鼻咽癌治疗失败的主要原因是远处转移和局部复发。鼻咽癌是否存在肿瘤干细胞，尚无文献报道，本实验将对此进行探讨。 目前肿瘤干细胞的研究多借鉴于正常干细胞的标志物。而正常鼻咽上皮干细胞研究不多、其标志物不清楚，直接分离鼻咽癌干细胞存在难度，只能从干细胞功能特性着手。造血干细胞的研究发现，干细胞能将荧光染料Hoechst 33342泵出细胞外，在流式细胞仪中显示为小群侧群（side population，SP）细胞。研究表明，侧群细胞的大部分细胞为造血干细胞，而且，Hoechst染料的泵出是通过ABC转运蛋白ABCG的作用产生。由于在肌肉、骨骼、胰腺等多种组织中都发现SP细胞的存在，并具有干细胞的特性，因此，引起SP表征的ABCG2蛋白被认为是干细胞的通用标志物。我们对鼻咽癌细胞株5-8F和6-10B细胞，进行流式细胞仪检测，显示NPC中ABCG2+细胞的含量为1—2％，与文献报道的实体瘤细胞中SP细胞为1％—20％相似。为此，我们拟通过分离鼻咽癌细胞株中的ABCG2+细胞，检测其在裸鼠体内成瘤能力，探讨鼻咽癌细胞株中ABCG2+细胞的肿瘤干细胞特征。 第一章 NPC细胞株中ABCG2+与ABCG2-细胞的分选、鉴定及其成瘤能力的比较 1．NPC细胞株中ABCQ2+与ABCG2-细胞的分选和鉴定

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 2⁺与ABCG₂^-细胞分选和鉴定及成瘤性比较'>第一章 NPC细胞株中ABCG₂⁺与ABCG₂^-细胞分选和鉴定及成瘤性比较
• 1.材料与方法
• 2.结果
• 2⁺与ABCG₂^-细胞分选和鉴定'>2.1 5-8F和6-10B中ABCG₂⁺与ABCG₂^-细胞分选和鉴定
• 2⁺与ABCG₂^-细胞裸鼠体内成瘤比较'>2.2 5-8F和6-10B中ABCG₂⁺与ABCG₂^-细胞裸鼠体内成瘤比较
• 3.讨论
• 3.1 肿瘤干细胞分离方法
• 3.2 分离鼻咽癌干细胞的方法选择及体会
• 3.3 肿瘤干细胞与细胞周期
• 2⁺与ABCG₂^-细胞的基因表达谱分析'>第二章 NPC细胞株中ABCG₂⁺与ABCG₂^-细胞的基因表达谱分析
• 1.技术路线
• 2.芯片技术平台
• 3.结果
• 2⁺与ABCG₂^-细胞样品的芯片检测'>3.1.5-8F和6-10B中ABCG₂⁺与ABCG₂^-细胞样品的芯片检测
• 2⁺细胞成瘤性相关基因的筛选验证'>3.2 5-8F和6-10B中ABCG₂⁺细胞成瘤性相关基因的筛选验证
• 2⁺细胞较ABCG₂^-细胞表达增强基因的筛选'>3.2.1 6—10B中ABCG₂⁺细胞较ABCG₂^-细胞表达增强基因的筛选
• 2⁺细胞较ABCG₂^-细胞表达增强基因的筛选'>3.2.2 5—8F中ABCG₂⁺细胞较ABCG₂^-细胞表达增强基因的筛选
• 2⁺细胞成瘤相关基因的筛选'>3.2.3 5-8F和6-10B中ABCG₂⁺细胞成瘤相关基因的筛选
• 2⁺细胞成瘤相关基因定量PCR验证'>3.2.4 5-8F和6-10B中ABCG₂⁺细胞成瘤相关基因定量PCR验证
• 2⁺细胞成瘤相关基因的生物信息学分析'>3.3 5-8F和6-10B中ABCG₂⁺细胞成瘤相关基因的生物信息学分析
• 2⁺细胞较ABCG₂^-细胞表达降低的基因的筛选和生物信息学分析'>3.4 5-8F和6-10B中ABCG₂⁺细胞较ABCG₂^-细胞表达降低的基因的筛选和生物信息学分析
• 4.讨论
• 全文小结
• 参考文献
• 综述
• 缩写词简表
• 致谢
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