论文摘要
本实验探讨了骨髓间充质干细胞（MSCs）体外原代的培养方法,及MSCs传代后在某些诱导条件下,分化为胰岛样细胞的实验方法。通过免疫细胞化学实验及动物实验,验证了MSCs在体外成功诱导分化为胰岛样细胞,并且可以修复坏死胰腺细胞。在MSCs的原代培养过程中,采用高速离心法及贴壁法分离纯化细胞。选用含10%胎牛血清（FBS）的低糖DMEM培养基作为扩增细胞的培养基。选择第三代状态良好的MSCs,进行诱导实验。采用三种不同的诱导途径,对诱导过程进行比较。发现最佳诱导方法如下:向生长状态稳定的第三代MSCs内加入内含碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）（10ng/ml）,表皮细胞生长因子（EGF）（10ng/ml）的无血清的LG-DMEM培养基,培养6～7d;然后,换用无血清的高糖DMEM培养基,添加胰腺条件培养液、胰岛素（25mg/ml）、地塞米松（10μg/l）、尼克酰胺（10mM/l）,继续培养6～7d;在显微镜下观察MSCs,可以看到细胞形态渐发生改变,细胞由原来的梭形渐变为圆形及不规则形,最后细胞聚集成团、悬浮逐渐增多。经过细胞鉴定实验,证明已成功诱导分化为胰岛样细胞。这一研究,为临床胰腺类疾病（如胰腺炎及糖尿病等）的治疗提供了一个新的方向。
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