肾络癥瘕的生物学基础及肾炎防衰液的干预研究

论文摘要

目的根据慢性肾脏疾病的临床研究基础,结合中医络病和癥瘕理论,提出了肾络癥瘕病机理论。研究5/6肾切除肾小球硬化动物模型的病理机制,探讨肾络癥瘕致“肾络病”的病机及物质、结构基础,以肾炎防衰液作为载体,研究其治疗肾小球硬化的分子机制,为中西医结合防治肾纤维化提供理论基础和动物实验的资料,实现中医药学的基础理论与现代医学理论实质性的链接。方法1采用5/6肾切除的方法制备大鼠肾小球硬化的动物模型。于造模后17w采血,检测血清CRE、BUN含量;取大鼠肾组织常规石蜡包埋、切片,做HE染色、Mallory染色、六胺银和Masson染色。2以正常大鼠做阴性对照,采用免疫组化法检测肾组织CTGF、FN及LN蛋白表达;采用原位杂交法检测肾组织CTGF表达;采用Western-blot法检测肾组织CTGF蛋白含量。3造模结束后,将大鼠随机分成8组:A正常大鼠作阴性对照（生理盐水灌胃）,B假手术组（生理盐水灌胃）,C模型组（生理盐水代替药物灌胃）,D阳性药治疗组（洛汀新）,E阳性药治疗组（尿毒清）,F肾炎防衰液高剂量治疗组,G肾炎防衰液中剂量治疗组,H肾炎防衰液低剂量治疗组,分别检测术后1w,4w、8w、12w、15w五个时间点大鼠24h尿蛋白,血压的变化,术后0w,2w、4w、6w、8w、10w、12w、14w八个时间点的体重变化,治疗15w后取材。采用生化分析的方法检测血清CRE、BUN含量;肾组织常规石蜡切片HE染色、Mallory染色、六胺银和Masson染色;肾组织石蜡切片CTGF、FN及LN免疫组化显色;原位杂交法检测肾组织CTGF表达;肾组织CTGF蛋白含量Western-blot分析。4采用SPSS11.0软件对相关实验数据进行统计学处理,求平均数,作单因素方差分析。结果通过以上实验得到下列结果:1肾纤维化进行阶段,血清中CRE、BUN含量显著升高;2实验性肾纤维化存在不同的发病机制,5/6肾切除肾小球硬化主要病理特征是细胞外基质的过度积聚,主要表现是系膜基质的增多或系膜区增宽,基底膜增厚及不规则,肾小球毛细血管袢的闭塞并伴过滤面积的减少;3 CTGF过度表达是肾纤维化的关键因子,细胞外基质FN,LN高表达是肾纤维化形成的重要因素;4从肾小球硬化的病理机制得到肾络癥瘕病机理论,中医病机包括5个连续的病理阶段:血行不畅、络脉失养、气血瘀滞、津凝痰结、络毒蕴结;5肾炎防衰液抗肾纤维化的作用机制主要为:5.1通过某种机制抑制机体产生CTGF,从而抑制细胞外基质的积聚;

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 英文缩略语
• 第一部分 文献综述
• 综述一 肾络癥瘕理论的学术渊源
• 1 肾络癥瘕病机理论的形成
• 2 “肾络”的结构载体
• 3 “肾络”的信息载体
• 小结
• 参考文献
• 综述二 结缔组织生长因子（CTGF）与肾纤维化
• 1 CTGF 的家族成员、结构和受体
• 2 CTGF 的生物合成
• 3 CTGF 的作用机制
• 4 CTGF 的生物学特性
• 5 CTGF 与肾纤维化
• 小结
• 参考文献
• 综述三 细胞外基质与肾小球硬化
• 1 细胞外基质的组成、肾内分布及功能
• 2 与基质代谢相关的蛋白酶
• 3 与基质结合的细胞因子
• 4 基底膜和基层
• 5 系膜细胞与细胞外基质
• 6 细胞外基质与肾小球疾病
• 7 FN，LN 与肾小球硬化
• 小结
• 参考文献
• 第二部分 理论探讨 从肾络癥瘕病机理论探讨中医药治疗肾纤维化的思路与方法
• 前言
• 1 肾络癥瘕与肾纤维化
• 2 肾络癥瘕的病理层次
• 3 从消癥散结法论治肾纤维化
• 参考文献
• 第三部分 实验研究
• 前言
• 实验一 肾炎防衰液对5/6肾切肾纤维化大鼠的体重、血压、24h尿蛋白的影响
• 实验二 肾炎防衰液对5/6 肾切肾纤维化大鼠的肾功能和形态学的影响
• 实验三 肾炎防衰液对5/6 肾切肾纤维化大鼠肾组织结缔组织生长因子的影响
• 实验四 肾炎防衰液对5/6 肾切肾纤维化大鼠对细胞外基质 FN、LN 的影响
• 结论
• 创新点
• 个人简历
• 致谢
• 图版