干扰素-γ对猪脂肪细胞增殖分化和脂解相关基因表达的影响

论文摘要

脂肪组织是哺乳动物体内能量存储场所,在机体能量代谢中发挥重要的作用,随着研究的深入,人们发现,脂肪组织还具有内分泌功能和免疫调节功能,但其与免疫系统的关系至今尚不清楚,因而,本实验以3-7日龄健康长白猪为实验动物,以培养的前体脂肪细胞为研究对象,用免疫细胞因子干扰素-γ（interferon-γ, IFN-γ）处理前体脂肪细胞,采用MTT比色、油红O染色提取法、半定量RT-PCR和免疫印迹等方法,研究了其对猪前体脂肪细胞增殖分化及脂解作用的影响。得出如下研究结果:1.检测IFN-γ对猪前体脂肪细胞增殖的影响。采用MTT比色法检测了在不同浓度IFN-γ作用下,其对猪前体脂肪细胞增殖能力的影响。结果表明,100 IU/mL和1000 IU/mL的IFN-γ显著抑制前体脂肪细胞的增殖（p<0.05）,抑制效果呈时间和剂量依赖性;而10 IU/mL的IFN-γ对增殖的影响与对照组相比在处理第2天和第4天差异不显著,之后在第6、第8和第10天差异显著（p<0.05）。2.研究IFN-γ对猪前体脂肪细胞分化的作用。采用油红O染色提取法、形态学观察法,检测了IFN-γ对脂肪细胞内甘油三酯积聚量的变化以及前体脂肪细胞充脂率、充脂程度及形态变化的影响,结果显示,10 IU/mL、100 IU/mL和1000 IU/mL的IFN-γ均显著抑制猪前体脂肪细胞的分化（p<0.05）,其抑制作用呈剂量依赖性;用半定量RT-PCR检测IFN-γ对猪前体脂肪细胞分化标志基因LPL和PPARγ2转录水平表达的影响,结果表明,在分化过程中可IFN-γ下调LPL和PPARγ2 mRNA的表达;用免疫印迹（Western blot）检测IFN-γ对PPARγ蛋白表达的影响,结果显示,IFN-γ可下调PPARγ1和PPARγ2的表达。3.研究IFN-γ对猪脂肪细胞脂解相关基表达的影响。采用半定量RT-PCR技术分析100 IU/mL和1000 IU/mL两种浓度的IFN-γ对脂肪细胞脂解相关基因ATGL、TGH和HSL mRNA表达的影响;结果显示,成熟猪脂肪细胞中100 IU/mL和1000 IU/mL的IFN-γ均能诱导ATGL、TGH和HSL mRNA表达,1000 IU/mL的IFN-诱导作用明显高于100 IU/mL（p<0.05）,同时,这三种基因对IFN-γ的敏感性不同,其中,HSL最敏感,其次是TGH ,ATGL最不敏感。以上结果表明,IFN-γ抑制猪脂肪细胞的增殖和分化,促进脂解。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 文献综述
• 第一章 脂肪细胞的增殖、分化及脂解
• 1.1 脂肪细胞的起源
• 1.2 脂肪细胞的增殖
• 1.3 脂肪细胞的分化
• 1.4 脂肪细胞的脂解
• 第二章 干扰素-γ的研究进展
• 2.1 IFN-γ的结构
• 2.2 IFN-γ的生物学作用
• 2.3 IFN-γ与脂肪细胞
• 实验研究
• 前言
• 第三章 IFN-γ对猪前体脂肪细胞增殖的影响
• 3.1 实验材料与方法
• 3.2 结果与分析
• 3.3 讨论
• 第四章 IFN-γ对猪前体肪细胞分化的影响
• 4.1 实验材料与方法
• 4.2 结果与分析
• 4.3 讨论
• 第五章 IFN-γ对猪脂肪细胞脂解相关基因表达的影响
• 5.1 材料与方法
• 5.2 结果与分析
• 5.3 讨论
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介