NPPB对顺铂诱导神经胶质瘤细胞损伤的作用

论文摘要

目的:观察氯离子通道阻断剂NPPB对顺铂（DDP）诱导的神经胶质瘤细胞损伤的影响。方法:应用四氮唑（MTT）比色法检测NPPB对顺铂诱导神经胶质瘤细胞的活性;用RT-PCR法测C6细胞和U251细胞Bcl-2、Bax、ClC-3的mRNA的表达;用WesternBlotting法测定C6细胞和U251细胞Bcl-2、Bax、ClC-3、Cyt-C蛋白的表达。结果:1.MTT比色法结果显示:与对照组相比,NPPB组C6和U251细胞生存率无明显变化;DDP组C6和U251细胞生存率明显下降,为74.95%（P＜0.05）。而DDP+NPPB联合组C6和U251细胞生存率与DDP组相比明显增高（P＜0.05）。2.RT-PCR结果表明:与对照组相比,NPPB组ClC-3、Bax、Bcl-2 mRNA表达无明显变化;DDP组ClC-3、Bcl-2 mRNA表达降低,而Bax mRNA表达明显增强,Bax/Bcl-2比值增加。而DDP+NPPB联合组与DDP组相比ClC-3 mRNA表达增高,Bax/Bcl-2比值下降。3.Western Blotting结果显示:与对照组相比,NPPB组Bax、Bcl-2、Cyt-C蛋白表达无明显变化;DDP组Bax/Bcl-2比值及Cyt-C蛋白表达明显增高。而DDP+NPPB联合组Bax/Bcl-2比值下降,Cyt-C蛋白表达明显降低。结论:1.DDP明显降低ClC-3表达,同时增加Bax/Bcl-2比值及Cyt-C蛋白表达;而Bcl-2表达降低,Bax表达增高则提示DDP可能诱导细胞凋亡甚至死亡。2.NPPB能明显逆转DDP诱导ClC-3表达的降低,降低Bax/Bcl-2比值及Cyt-C蛋白表达,由此说明细胞凋亡与DDP抑制C6和U251细胞的增殖作用密切相关。3.NPPB可能通过降低Bax/Bcl-2比值,抑制Cyt-C的释放从而拮抗DDP对肿瘤细胞增殖的抑制作用。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 英文缩写词表
• 第一章 引言
• 第二章 材料和方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 主要仪器
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.3 实验细胞
• 2.1.4 主要试剂的配制
• 2.2 方法
• 2.2.1 细胞培养
• 2.2.2 MTT法检测NPPB对DDP诱导的C6和U251细胞增殖的影响
• 2.2.3 观察NPPB对DDP诱导的C6和U251细胞形态的影响
• 2.2.4 RT-PCR检测Bcl-2、Bax、ClC-3的mRNA表达
• 2.2.5 Western Blotting检测Bcl-2、Bax、Cyt-C蛋白表达
• 2.3 统计学统计
• 第三章 结果
• 3.1 NPPB对DDP诱导的C6和U251细胞增殖的影响
• 3.2 NPPB对DDP诱导的C6和U251细胞形态的影响
• 3.3 RT-PCR检测Bcl-2、Bax、ClC-3的mRNA表达
• 3.4 Western Blotting检测Bcl-2、Bax、ClC-3、Cyt-C蛋白表达
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 参考文献