苍耳素Ⅱ有效抑菌成分的分离纯化及其剂型加工

论文摘要

苍耳素Ⅱ是从植物苍耳中提取分离出的抑菌活性物质,对番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea Pers.）、辣椒丝核病菌（Rhizoctonia solani）、黄瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporium Schl.）、黄瓜黑星病菌（Cladosporium cucumerinum Ell. et Arthur）和番茄早疫病菌等蔬菜常见病害有较强的抑制作用[1]。本文通过对苍耳素Ⅱ中的抑菌成分进一步分离纯化及鉴定,获得苍耳素Ⅱ活性物质的化学结构式,通过对制剂助剂的筛选研究,确定了制剂配方中最佳助剂及乳油、水乳剂剂型配方,加工成了20%苍耳素Ⅱ乳油（EC）及10%苍耳素Ⅱ水乳剂（EW）,并进行了质量检测和室内药效评价。研究内容及所得结果如下:1.以氯仿-丙酮（体积比30:2）混合溶剂为淋洗液采用柱层析法对苍耳素Ⅱ分离物进一步分离纯化,经柱层析分离后抑菌成分主要集中在流分2到流分5中,其抑制率大于30%。以流分3对黄瓜枯萎病菌菌丝生长的抑制率最高为96.79%;对黄瓜黑星病菌菌丝生长的抑制率最高为84.80%。流分3经过二次柱层析得到32个流分,而活性也主要集中在2～6流分之间,对枯萎病菌抑制较高的是流分2（抑菌率为38.25%）,而对黑星病菌抑制作用最高的是流分3（抑菌率为49.12%）。对高活性流分采用柱层析和GC-MS联用仪鉴定,苍耳素Ⅱ主要抑菌物质有:棕榈酸、十八烷酸、西柏二烯-丙烯酸内酯、二十烷酸、邻苯二甲酸单异辛酯、十八烯-9-酸、3,5-二特丁基-2-羟基-苯丙酸、十六烯-9-酸、降姥鲛酮-2、5-丙氧基-6-甲氧基-8-胺基-喹啉、邻苯二甲酸单乙酸乙酯酯、3-苯基-2,4-戊二酮、2-烯丙基-1,4-二甲氧基-3-乙烯氧甲基苯、乙酸三甲基苯酚酯、邻苯二甲酸单乙酯、二十二烷酸、角鲨烯及未知物质等41种物质,可以证实苍耳提取物苍耳素Ⅱ中存在大量的抑菌活性物质。2.以苍耳素Ⅱ为原药,通过对其加工助剂及配合量的筛选研究,确定了二甲苯,二甲基甲酰胺（DMF）,农乳0203B为最适的溶剂、助溶剂、乳化剂,加工出了质量稳定的20%苍耳素Ⅱ乳油。质量检测结果表明该制剂符合国家标准。3.在苍耳素Ⅱ加工成乳油的基础上,初步进行了苍耳素Ⅱ水乳剂的开发研究。通过对其加工助剂及配合量的筛选研究,确定了二甲基甲酰胺（DMF）,N-长链烷基吡咯烷酮,乙二醇,10%NaCl溶液,农乳500、农乳600及BY140按一定比例混配为最适的溶剂、助溶剂、抗冻剂、乳化剂,加工出了10%苍耳素Ⅱ水乳剂制剂。并对水乳制剂的进行了质量检测,各项性能指标达到国家标准。4.采用杀菌剂生物测定法,测定20%苍耳素Ⅱ乳油和10%苍耳素Ⅱ水乳剂对黄瓜枯萎病菌的抑菌活性。结果表明:20%苍耳素Ⅱ乳油和10%苍耳素Ⅱ水乳剂对黄瓜枯萎病菌具有较强的保护作用,防治效果在40%左右;而治疗作用不显著。

论文目录

• 摘要
• Summary
• 前言
• 第一章 文献综述
• 1.1 植物源农药研究的目的意义
• 1.2 植物源农药国内外研究进展
• 1.3 植物源农药活性成分提取方法研究进展
• 1.4 植物源农药制剂开发利用进展
• 1.5 植物源农药有效抑菌成分研究进展
• 1.6 植物源农药在农业生产中的应用研究
• 1.7 苍耳的研究进展
• 1.8 植物源农药研究存在问题
• 1.9 本论文研究内容及目的意义
• 第二章 苍耳素Ⅱ中抑菌成分的分离纯化及成分鉴定
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 供试材料
• 2.1.2 试验方法
• 2.2 苍耳素Ⅱ高活性流分的GC-MS 检测及生物测定结果
• 2.2.1 苍耳素Ⅱ高活性流分的 GC-MS 检测结果
• 2.2.2 GC-MS 检测物质的生物测定结果
• 2.3 结论与讨论
• 2.3.1 结论
• 2.3.2 讨论
• 第三章 20%苍耳素Ⅱ乳油的助剂筛选、加工及质量检测
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 试验方法
• 3.2 结果分析
• 3.2.1 20%苍耳素Ⅱ乳油有效成分含量、溶剂、助剂、乳化剂筛选结果
• 3.2.2 20%苍耳素Ⅱ乳油加工结果
• 3.2.3 20%苍耳素Ⅱ乳油质量检测结果
• 3.3 讨论
• 第四章 10%苍耳素Ⅱ的水乳剂加工配方及质量检测
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 材料
• 4.1.2 试验方法
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 10%苍耳素Ⅱ水乳剂有效成分含量、溶剂、乳化剂、抗冻剂筛选结果
• 4.2.2 10%苍耳素Ⅱ水乳剂加工结果
• 4.2.3 十种10%苍耳素Ⅱ水乳剂配方质量检测结果
• 4.3 讨论
• 第五章 20%苍耳素Ⅱ乳油和10%苍耳素Ⅱ水乳剂的室内药效评
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 供试样品
• 5.1.2 供试菌种
• 5.1.3 主要仪器及试剂
• 5.1.4 离体生物活性测定
• 5.1.5 活体生物活性测定
• 5.2 结果与分析
• 5.2.1 生长速率法才测定结果
• 5.2.2 黄瓜子叶法测定结果
• 5.3 结论与讨论
• 第六章 结论与讨论
• 致谢
• 参考文献
• 作者简介
• 导师简介