论文摘要
目的检测胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）在变应性鼻炎（AR）、鼻息肉组织中的表达情况,探讨TSLP在变应性鼻炎及鼻息肉发病机制中的作用。方法标本来源于厦门大学附属中山医院耳鼻咽喉科行鼻内镜手术治疗的病人,其中变应性鼻炎21例、鼻息肉30例及单纯鼻中隔偏曲患者下鼻甲黏膜上皮23例。将标本分为三份:一份经4 %多聚甲醛固定,常规脱水,石蜡包埋,连续切片后应用免疫组化Elivision染色法检测变应性鼻炎及鼻息肉患者鼻黏膜中的TSLP的表达;一份提取总RNA,逆转录为cDNA,以管家基因β-actin为内标基因,进行实时荧光定量PCR反应,检测各样本中的TSLP基因的表达水平;另一份标本提取组织总蛋白,进行Western blot杂交,以β-actin蛋白为内参,测定目的条带的灰度值与β-actin灰度值的比值,分析TSLP蛋白的相对表达量。结果1.免疫组织化学染色结果显示TSLP在变应性鼻炎及鼻息肉患者中有较强表达、在对照组鼻黏膜组织中表达较弱,染色阳性颗粒主要集中在鼻黏膜上皮细胞的胞浆。变应性鼻炎及鼻息肉患者TSLP的表达明显高于对照组黏膜组织（P<0.01）,而在鼻息肉患者中息肉组织与下鼻甲黏膜表达无明显差异（p>0.01）,变应性鼻炎与鼻息肉患者的表达无明显差异（p>0.01）。2.实时荧光定量RT-PCR的检测显示:变应性鼻炎及鼻息肉患者TSLPmRNA相对表达水平明显高于对照组鼻黏膜组织（P<0.05）,有显著性差异。而在鼻息肉患者中息肉组织与下鼻甲黏膜表达无明显差异（p>0.05）,变应性鼻炎与鼻息肉患者之间的表达无明显差异（p>0.05）。3.用western blot法分析变应性鼻炎及鼻息肉患者TSLP基因蛋白的表达并探讨其与对照组黏膜组织表达的差异,结果显示变应性鼻炎及鼻息肉患者TSLP蛋白的表达明显高于对照组黏膜组织（P<0.01）,而在鼻息肉患者中息肉组织与下鼻甲黏膜表达无明显差异（p>0.01）,变应性鼻炎与鼻息肉患者的表达无明显差异（p>0.01）。结论1.从组织学上证实了TSLP在变应性鼻炎、鼻息肉中呈高表达,主要分布于变应性鼻炎、鼻息肉黏膜的上皮细胞。2.实时荧光定量RT-PCR检测结果表明TSLPmRNA在变应性鼻炎、鼻息肉中的表达明显高于对照组。3.通过western blot检测,在蛋白质水平上证实TSLP在变应性鼻炎、鼻息肉中的表达明显高于对照组。4.以上结果提示TSLP在变应性鼻炎、鼻息肉的发病中起重要作用,详细机理有待进一步研究。
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