日粮能量对朗德鹅和溆浦鹅生长性能及肌肉生成抑制因子(MSTN)基因表达影响的研究

日粮能量对朗德鹅和溆浦鹅生长性能及肌肉生成抑制因子(MSTN)基因表达影响的研究

论文摘要

朗德鹅和溆浦鹅是国内主要的鹅肥肝品种。在肥肝鹅产业化开发过程中,品系培育是其中的一个重要方面。大多数研究表明,日粮ME水平对早期鹅增重的影响比蛋白质水平影响大,但少有研究者就能量一个因素对肥肝鹅品系的早期生长发育进行特定研究。本课题通过改变日粮代谢能,结合朗德鹅和溆浦鹅早期生长情况、关键日龄屠体指标、相关血液生化指标和血清激素水平和肌肉生成抑制因子(MSTN)基因表达量等因素,探索朗德鹅和溆浦鹅早期生长发育规律、超饲养前期所需要的适宜ME营养需要和涉及早期生长发育的相关规律。试验结果分别摘要如下:试验1 0~70d阶段能量对朗德鹅公鹅生长发育影响的研究目的:研究不同日粮能量水平对朗德鹅公鹅超饲养前期(0~70d)生长性能指标、屠体性能、体尺指标、血液生化指标、激素水平和肌肉成分的影响研究。方法:本试验用90只0日龄初生重大致相同的朗德鹅公鹅为试验对象,通过添加豆油来设计不高中低三种不同代谢能水平(0~3w:13.38MJ/kg、12.13MJ/kg和10.87MJ/kg;4~10w:13.81MJ/kg、12.55MJ/kg和11.30MJ/kg)的日粮,试验鹅随机分为试验Ⅰ组,试验Ⅱ组,试验Ⅲ组,每组30只,分栏饲养70天。每周进行称重和体尺测定;于21d、70d进行屠宰试验,屠宰前采集血液进行血清参数和血清激素水平检测;屠宰后测定肌肉成分。结果:(1)适宜朗德鹅公鹅能量水平:0~21d为12.13MJ/kg、22~70d为12.55MJ/Kg;(2)日粮能量对于朗德鹅公鹅屠宰率、全净膛率、半净膛率、腿肌率的影响差异均不显著(p>0.05);(3)朗德鹅公鹅肌肉中的蛋白质含量超过21%;胸肌和腿肌总脂含量都是随着日粮能量浓度提高而提高,Ⅰ组胸肌和腿肌总脂含量比Ⅲ组分别高24.22%和34.73%;胸肌中各项化学成分含量高于腿肌;(4)21d时,朗德鹅公鹅血清中TG、LDL、HLDL差异不显著(p>0.05);70d时,朗德鹅公鹅血清中AST、LDL和HLDL的含量差异不显著(p>0.05);(5)21d血清IGF—Ⅰ测定值(♂Ⅲ除外)均高于70d时各组测定值;且ME水平对21d时血清IGF—Ⅰ水平影响差异显著(p<0.05);21d血清GH测定值随日粮能量的升高而升高,70d时,公鹅各组GH差异不显著(p>0.05)。试验2 0~70d阶段能量对朗德鹅母鹅生长发育影响的研究目的:研究不同日粮能量水平对朗德鹅母鹅超饲养前期(0~70d)生长性能指标、屠体性能、体尺指标、血液生化指标、激素水平和肌肉成分的影响研究。方法:同朗德鹅公鹅。结果:(1)适宜朗德鹅母鹅能量水平:0~21d为13.38MJ/kg、22~70d为13.81MJ/Kg;(2)各组母鹅腿肌中干物质含量分别要高于同组的胸肌干物质含量约4.58%、0.21%和10.29%;胸肌中总脂含量分别要高于同组的腿肌总脂含量约1.53%、6.91%和1.88%;(3)21d时,朗德鹅母鹅TG、LDL、HLDL差异不显著(p>0.05);70d时,朗德鹅母鹅血清中AST、LDL、TC、AKP和HLDL的含量差异不显著(p>0.05)。(4)21d血清IGF—Ⅰ测定值均高于70d测定值;21d时,母鹅IGF—Ⅰ各组差异不显著(p>0.05),70d差异显著(p<0.05)。21d时,母鹅GH随日粮能量的提高而提高。试验3 0~70d阶段能量对溆浦鹅生长发育影响的研究目的:研究不同日粮能量水平对溆浦鹅超饲养前期(0~70d)生长性能指标、屠体性能、体尺指标、血液生化指标、激素水平和肌肉成分的影响研究。方法:同朗德鹅公鹅。结果:(1)适宜溆浦鹅能量水平:0~21d能量水平为13.38MJ/kg、22~70d能量水平为13.81MJ/Kg。(2)采食中等能量的溆浦鹅Ⅱ组在屠宰率、全净膛率、半净膛率、腹脂率和胸肌率五个指标上和其余两组差异显著(p<0.05);对于皮下脂肪厚度和肌间脂肪厚度两个指标上溆浦鹅Ⅰ、Ⅱ组和Ⅲ组之间差异显著(p<0.05);Ⅱ组的腹脂重和腹脂率高于其余两组,差异显著(p<0.05)。(3)采食不同能量日粮溆浦鹅胸肌和腿肌蛋白质含量差异不显著(p>0.05);Ⅰ组胸肌中总脂含量分别比Ⅱ、Ⅲ组胸肌总脂含量高4.46%和8.66%;Ⅰ组腿肌中总脂含量分别比Ⅱ、Ⅲ组腿肌总脂含量高4.99%和11.63%。(4)21d和70d时,溆溆浦鹅血清IGF—Ⅰ测定值差异不显著(p>0.05);21d时血清GH测定值低于70d时测定值。试验1—3结论:(1)朗德鹅公鹅、朗德鹅母鹅和溆浦鹅早期适宜ME水平:0~21d分别为12.13MJ/kg、13.38MJ/kg和13.38MJ/kg;22~70d分别为12.55MJ/kg、13.81MJ/kg和13.81MJ/kg;(2)本试验中,日粮能量水平可以影响鹅的体尺发育;(3)ME水平显著影响朗德鹅部分屠宰指标(公鹅屠体重、全净膛重、半净膛重、胸肌重、腿肌重和腹脂重);日粮能量水平对朗德鹅屠宰率、全净膛率、半净膛率、腿肌率的影响差异均不显著;(4)ME水平极显著影响溆浦鹅的屠宰率、全净膛率、半净膛率、腹脂率和胸肌率等五个指标;(5)朗德鹅肌肉粗脂肪含量高于溆浦鹅肌肉粗脂肪含量;同等能量水平下朗德鹅公鹅粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分含量高于朗德鹅母鹅;ME水平会影响肌肉化学组成;(6)GH水平随ME提高而提高;血清IGF—Ⅰ水平和日粮能量水平无相关性。试验4朗德鹅、溆浦鹅肌肉生成抑制因子(MSTN)基因的克隆和能量对其表达量影响的研究目的:采用反转录—聚合酶链反应(RT—PCR)技术,克隆朗德鹅、溆浦鹅肌肉生成抑制因子(MSTN)基因,研究MSTN基因表达和日粮能量及其部分血清激素含量的相互关系,了解MSTN的功能,为水禽分子营养和分子育种提供基础资料。方法:从朗德鹅、溆浦鹅的腿肌中抽提总RNA,用两步法RT—PCR扩增出MSTN基因的cDNA编码序列,以pGEM—T Vector为载体,将该片段克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)中。通过筛选阳性克隆,双酶切鉴定后测序;以MSTN基因的克隆为基础,以β—actin为内标,构建优化的半定量RT—PCR方法,研究三种不同能量对朗德鹅公鹅、朗德鹅母鹅和溆浦鹅在21d和70d两个时期肌肉组织MSTN基因表达的差异;同时用放免法测定21、70d的血清GH、IGF—Ⅰ浓度。结果:(1)克隆到朗德鹅、溆浦鹅MSTN基因cDNA的部分序列,其片段大小为1128bp,编码375个氨基酸组成的多肽,与已发表的鸡、鸭、鹅的MSTN核苷酸相似性分别为94%、94%、99%;氨基酸的相似性分别为98%、97%、98%;(2)21d时,朗德鹅公鹅、母鹅和溆浦鹅MSTN表达量差异不显著;(3)70d时朗德鹅公鹅MSTN的表达量情况为Ⅰ>Ⅲ>Ⅱ,朗德鹅母鹅MSTN的表达量情况为Ⅲ>Ⅱ>Ⅰ,溆浦鹅MSTN的表达量情况为Ⅲ>Ⅱ>Ⅰ;(4)日粮能量对21d后朗德鹅、溆浦鹅MSTN基因的表达有影响,MSTN基因的表达量和血清IGF—Ⅰ的变化趋势基本一致;与血清GH含量无相关性,GH和能量的高低呈正相关。结论:日粮能量对21d后朗德鹅、溆浦鹅MSTN基因的表达有影响,且MSTN基因表达量和血清IGF—Ⅰ具有相关性,和血清GH无相关性。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 英文缩写
  • 第一章 文献综述
  • 1 引言
  • 2 鹅的起源及朗德鹅和溆浦鹅简介
  • 2.1 鹅的起源
  • 2.2 朗德鹅简介
  • 2.3 溆浦鹅简介
  • 3 不同饲料能量营养价值及其在水禽生产中的应用
  • 3.1 碳水化合物能量营养价值及其实际应用
  • 3.2 脂肪能量营养价值及其实际应用
  • 3.3 蛋白质能量营养价值及其实际应用
  • 4 水禽早期生长营养需要研究进展
  • 4.1 鹅早期生长能量营养需要研究进展
  • 4.2 鹅早期生长氨基酸营养需要研究进展
  • 4.3 鹅早期生长微量元素营养需要研究进展
  • 4.4 鹅早期生长维生素营养需要研究进展
  • 5 水禽生长发育阶段相关血液生化指标和激素研究进展
  • 5.1 水禽生长发育阶段相关血液生化指标的研究进展
  • 5.2 水禽生长发育阶段相关激素研究进展
  • 6 畜禽生长发育相关基因的研究进展
  • 6.1 动物肌肉生长发育调控基因的研究进展
  • 6.2 动物脂肪生长发育调控基因的研究进展
  • 6.3 动物肉质调控基因的研究进展
  • 第二章 本研究的主要目的意义和技术路线
  • 1 本研究的主要目的意义和内容
  • 1.1 本研究的主要目的意义
  • 1.2 研究目标、研究内容和拟解决的关键问题
  • 1.3 本研究的主要技术难点
  • 2 研究方法和技术路线
  • 2.1 研究方法
  • 2.2 技术路线
  • 第三章 0~70d阶段能量对朗德公鹅生长发育影响的研究
  • 1 前言
  • 2 材料和方法
  • 2.1 试验材料
  • 2.2 试验设计和动物饲养试验
  • 2.3 指标测定
  • 2.4 数据统计和处理
  • 3 结果与分析
  • 3.1 朗德鹅公鹅早期生长阶段增重情况
  • 3.2 朗德鹅公鹅早期生长发育阶段体尺变化情况
  • 3.3 朗德鹅公鹅屠体性能分析
  • 3.4 朗德鹅公鹅鹅肌肉成分分析
  • 3.5 朗德鹅公鹅血清生化指标分析
  • 3.6 朗德鹅公鹅血清IGF—Ⅰ和GH分析
  • 第四章 0~70d阶段能量对朗德母鹅生长发育影响的研究
  • 1 前言
  • 2 材料和方法
  • 2.1 试验材料
  • 2.2 试验设计和动物饲养试验
  • 2.3 指标测定
  • 2.4 数据统计和处理
  • 3 结果与分析
  • 3.1 朗德鹅母鹅早期生长发育阶段增重情况
  • 3.2 朗德鹅母鹅早期生长发育阶段体尺变化情况
  • 3.3 朗德鹅母鹅屠体性能分析
  • 3.4 朗德鹅母鹅肌肉成分分析
  • 3.5 朗德鹅母鹅血清生化指标分析
  • 3.6 朗德鹅母鹅血清IGF—Ⅰ和GH分析
  • 第五章 0~70d阶段能量对溆浦鹅生长发育影响的研究
  • 1 前言
  • 2 材料和方法
  • 2.1 试验材料
  • 2.2 试验设计和动物饲养试验
  • 2.3 指标测定
  • 2.4 数据统计和处理
  • 3 结果与分析
  • 3.1 溆浦鹅早期生长阶段增重情况
  • 3.2 溆浦鹅早期生长发育阶段体尺变化情况
  • 3.3 溆浦鹅屠体性能分析
  • 3.4 溆浦鹅肌肉成分分析
  • 3.5 溆浦鹅血液生化指标分析
  • 3.6 溆浦鹅血清激素IGF—Ⅰ和GH分析
  • 第六章 0~70d阶段能量对鹅早期生长情况的影响研究
  • 1 讨论
  • 1.1 能量对鹅早期生长的营养作用
  • 1.2 能量对鹅体尺变化的影响
  • 1.3 能量对鹅屠体性能的影响
  • 1.4 能量对鹅肌肉成分的影响
  • 1.5 能量对鹅血液生化指标的影响
  • 1.6 能量对鹅血清IGF—Ⅰ和GH的影响
  • 2 小结
  • 第七章 朗德鹅、溆浦鹅肌肉生成抑制因子(MSTN)基因的克隆和能量对其表达量影响的研究
  • 1 前言
  • 2 材料和方法
  • 2.1 试验材料
  • 2.2 试验方法
  • 2.3 数据统计和处理
  • 3 结果与分析
  • 3.1 鹅MSTN-cDNA的扩增和重组质粒pGEM-T-MSTN的构建
  • 3.2 朗德鹅、溆浦鹅内标β—actin基因浓度的调整
  • 3.3 不同能量状况下21和70d不同性别朗德鹅MSTN基因的表达量
  • 3.4 不同能量状况下21和70d不同性别溆浦鹅MSTN基因的表达量
  • 4 讨论
  • 4.1 朗德鹅和溆浦鹅MSTN基因的克隆及预试验
  • 4.2 朗德鹅早期生长阶段MSTN基因表达量和能量的关系
  • 4.3 朗德鹅早期生长阶段MSTN基因表达量和激素的关系
  • 4.4 溆浦鹅早期生长阶段MSTN基因表达量和能量的关系
  • 4.5 溆浦鹅早期生长阶段MSTN基因表达量和激素的关系
  • 本研究的小结、创新点和尚待进一步解决的问题
  • 参考文献
  • 附录
  • 致谢
  • 相关论文文献

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