芪参益气方抗急性心肌缺血作用的蛋白质组学研究

论文摘要

蛋白质组学的诞生与发展,为研究蛋白质表达和功能变化提供了强有力的技术支持,使人们可以从系统的角度了解药物在蛋白质水平上对机体的作用。中药具有多组分、多靶点、整合调节的作用特点,运用蛋白质组学技术发现中药活性物质可能的作用靶点,了解中药作用途径,将有助于在分子层次上诠释传统中医药理论的现代生物学意义。本文以急性心肌缺血大鼠的心肌蛋白质组为研究对象,首先通过实验研究建立和优化心肌蛋白质组的双向电泳分析方法;然后利用该方法对芪参益气方的抗急性心肌缺血作用机制进行研究,主要研究内容如下:1.大鼠心肌蛋白质组分析方法研究:从大鼠急性心肌缺血模型中获取缺血区心肌组织,研究建立蛋白提取、纯化等方法。通过对心肌蛋白质组分析过程中各关键参数的优化（包括上样量,IPG胶条规格,等电聚焦条件和SDS-PAGE电压等条件）,建立了心肌蛋白质组学双向电泳分析方法。运用该方法对维拉帕米作用下急性心梗大鼠的心肌蛋白组进行分析,结果表明该法能较理想地分离出差异蛋白,并获取了15个差异蛋白进行质谱鉴定。2.芪参益气方抗急性心肌缺血作用的蛋白质组学研究:对中药方剂芪参益气方抗心肌缺血作用开展药效学实验,并利用已建立的方法对芪参益气方给药3天与7天的心肌缺血大鼠心肌蛋白质组进行分析,研究发现35个蛋白差异点。对这些差异表达的蛋白进行质谱鉴定后发现其与能量代谢、抗氧化应激等作用有关。研究结果表明,芪参益气方的心肌保护作用与恢复心肌损伤过程中的能量供应、对抗氧化应激等作用有关。通过以上研究,本论文成功建立了心肌蛋白质组学的实验研究方法,利用该法对芪参益气方的抗急性心肌缺血作用进行了蛋白质组学研究,研究结果为揭示该方剂多途径作用机制提供了一定的线索。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• Abstract
• 目录
• 1 绪论
• 1.1 研究背景
• 1.2 蛋白质组学的主要研究技术及其在中医药研究中的应用
• 1.3 抗心肌缺血类中药的药理学研究相关研究方法
• 1.4 本文主要研究内容
• 2 心肌蛋白质组分析方法研究
• 2.1 蛋白质组学方法在药物研究中的一般步骤
• 2.2 心肌组织蛋白样品制备方法的建立
• 2.3 心肌蛋白质组双向电泳实验方法的建立和优化
• 2.4 应用实例—维拉帕米作用下急性心梗大鼠的比较蛋白质组学研究
• 2.5 本章小结
• 3 芪参益气方抗急性心肌缺血作用的蛋白质组学研究
• 3.1 动物模型的建立以及实验准备
• 3.2 芪参益气方抗急性心肌梗塞的药效学研究
• 3.3 芪参益气方作用下大鼠心肌蛋白质组研究
• 3.4 本章小结
• 4 总结与展望
• 4.1 总结
• 4.2 展望
• 参考文献
• 作者简历