太白泡沙参中化学成份研究

论文摘要

南沙参为常用中药,具有养阴清肺,化痰,益气之功效。最近研究表明,在抗菌、抗辐射、抗突变、免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、调节学习记忆损害和呼吸系统等方面起着重要的作用。泡沙参A.potaninii Korsh.为南沙参的一个变种,在我国分布广泛,资源丰富,分布于我国东北、河南、陕西等。陕西太白山区,海拔1700米,气候湿润,适合各种植物生长。太白山区泡沙参,植株粗壮,资源丰富,当地人长年食用,具有明显的保健作用。关于南沙参化学成分已有大量报道,但至今未见陕西太白泡沙参的研究报道。为了有效地开发陕西太白地区的药用资源,本文对太白泡沙参的化学成分进行了系统研究。本论文共7章。第1章综述1.沙参的有关研究概况包括沙参属植物化学成分研究进展和沙参属植物沙参药理的研究现状两部分内容。已经从沙参中发现的化学成分有糖类、萜类、甾醇、酚性甙、香豆素、脂肪酸、氨基酸、微量元素、磷脂、生物碱、皂甙、黄酮、树脂、单宁、Vc、Vp、亚油酸、二十八烷酸等。沙参的药理研究涉及调节免疫功能,对呼吸系统作用、抗突变、抗辐射、抗衰老、抗菌作用、降血糖作用、降血脂作用等。2.多糖的研究进展主要包括多糖的提取分离、分级、药理研究现状及其展望。第2章太白泡沙参根中多糖的含量测定采用苯酚-硫酸法,葡萄糖作对照品,在优化条件下,建立了太白沙参中总多糖含量的测定方法。在0.01～0.09 mg·mL-1范围内符合线性方程Y=9.695X—0.0092,r=0.9999,回收率为99.04%。应用此方法,测得太白泡沙参根中多糖含量为32.56%,RSD=0.12%（n=5）。第3章太白泡沙参根中多糖的提取工艺研究以水溶性总多糖得率为指标,对太白泡沙参水溶性总多糖的提取工艺进行了单因素试验和L9（34）正交试验研究,建立了太白泡沙参总多糖的优化提取工艺。第4章太白泡沙参总多糖的分级、纯化及抗氧化活性研究总多糖通过透析,分成两个部分。高分子量多糖用DEAE-纤维素柱层析分级,洗脱出3个级分,APK1、APK2和APK3；低分子量多糖用不同浓度乙醇沉淀出4个级分,APK4、APK5、APK6和APK7。7个级分经凝胶渗透色谱仪测定分子量,结果为APK1（842100）、APK2（425800）、APK3（22400）、APK4（12500）、APK5（6500）为单一成分,APK6（3900）和APK7（3800）是同一个级分,其质量之比为1：1.4：2.2：9.2：70.6：23.3。抗氧化活性试验证明,级分APK5（6500,52.96%）较为突出。第5章太白泡沙参中总黄酮的提取工艺及含量测定研究以总黄酮提取率为指标,对太白泡沙参中总黄酮的提取工艺进行了单因素试验和L9（34）正交试验研究,建立了太白泡沙参总黄酮的优化提取工艺。用此工艺对太白泡沙参总黄酮进行提取,用分光光度法测定得太白泡沙参中总黄酮的含量以芦丁计为0.053%。第6章太白泡沙参根中皂甙元的含量测定采用分光光度法,薯预皂甙元为对照品,在优化条件下,建立了太白沙参中皂甙元的测定方法。本方法在0.025～0.30 mg·mL-1浓度范围内符合线性方程Y=3.0117X-0.0034,r=0.9998,RSD=0.67%（n=7）,加样回收率为100.2%。太白泡沙参中皂甙元含量为0.82%,RSD=0.46%（n=7）。第7章太白泡沙参根中β-谷甾醇的含量测定建立了高效液相色谱（HPLC）法测定太白泡沙参根中β-谷甾醇的方法,检测波长为210nm,柱温为35℃,流动相为色谱纯甲醇,流速为0.7 mL·min-1,进样量为20 uL；以峰面积为纵坐标,对照品β-谷甾醇的浓度为横坐标,在4.0×10-7～2.0×10-5g范围,线性回归方程为Y=3474X-22.268, r=0.9999, RSD=0.83%（n=5）,加标回收率在96～102.8%之间,平均值为99.6%：测定得太白泡沙参根中β-谷甾醇的含量为0.134%,RSD=1.42%（n=5）。本文首次对太白泡沙参根中多糖、薯预皂甙元、总黄酮和β-谷甾醇的提取及含量测定进行了研究,实验结果表明：太白泡沙参根中多糖含量为32.56%,薯预皂甙元含量为0.82%,总黄酮含量0.053%,β-谷甾醇含量为0.134%,其中太白泡沙参中总多糖的含量在沙参属中是最高的品种之一。在多糖研究中,所得到的6个多糖组分中,低分子量的APK5（6500,52.96%）抗氧化生物活性较为突出。这表明,太白泡沙参根中低分子量的多糖具有抗氧化活性,这在沙参属植物中较为少见。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 综述
• 1.1、沙参属植物化学成分研究概况
• 1.1.1 沙参属植物化学成分研究
• 1.1.2 沙参属植物药理作用研究
• 1.2 多糖的研究进展
• 1.2.1 多糖的来源
• 1.2.2 多糖的生物活性
• 1.2.3 多糖的结构研究
• 1.2.4 多糖的研究状况
• 1.2.5 本课题的研究意义及研究内容
• 第2章 太白泡沙参总多糖的含量测定
• 2.1 前言
• 2.2 实验试剂和仪器
• 2.3 实验方法与结果
• 2.3.1 葡萄糖对照品贮备液的配制
• 2.3.2 供试品贮备液的配制
• 2.3.3 苯酚试剂的配制
• 2.3.4 试验条件的选择
• 2.3.5 标准曲线绘制
• 2.3.6 精密度试验
• 2.3.7 换算因子的测定
• 2.3.8 重复性试验
• 2.3.9 加样回收率试验
• 2.3.10 总多糖含量测定
• 2.4 讨论
• 第3章 太白泡沙参总多糖的提取工艺研究
• 3.1 前言
• 3.2 材料与仪器
• 3.3 实验方法与结果
• 3.3.1 样品测定
• 3.3.2 太白泡沙参总多糖提取过程中的单因素影响研究
• 3.3.3 正交实验设计
• 3.3.4 最佳工艺条件的验证
• 3.4 讨论
• 第4章 太白泡沙参中总多糖的分级及抗氧化活性研究
• 4.1 引言
• 4.2 实验试剂和仪器
• 4.3 实验与结果
• 4.3.1 总多糖的提取
• 4.3.2 总多糖含量测定
• 4.3.3 太白泡沙参总多糖纯化
• 4.3.4 总多糖分级
• 4.3.5 多糖级分分子量测定
• 4.3.6 多糖各级分抗氧化活性研究
• 4.4 小结
• 第5章 太白泡沙参中总黄酮的提取工艺及含量测定研究
• 5.1 引言
• 5.2 材料与仪器
• 5.3 方法与结果
• 5.3.1 测定方法考察
• 5.3.2 黄酮含量的测定
• 5.3.3 太白泡沙参黄酮类物质提取工艺的研究
• 5.3.4 正交实验设计
• 5.3.5 最佳工艺条件的验证
• 5.4 讨论
• 第6章 太白泡沙参中皂甙元含量的测定研究
• 6.1 前言
• 6.2 实验试剂与仪器
• 6.3 方法与结果
• 6.3.1 对照品溶液配制
• 6.3.2 标准工作曲线绘制
• 6.3.3 稳定试验
• 6.3.4 精密度试验
• 6.3.5 回收率
• 6.3.6 太白泡沙参中皂甙元含量测定
• 6.4 讨论
• 第7章 高效液相色谱法测定太白泡沙参中β-谷甾醇的含量
• 7.1 前言
• 7.2 仪器与试剂
• 7.3 方法与结果
• 7.3.1 色谱条件
• 7.3.2 对照品溶液配制
• 7.3.3 供试样品溶液的制备
• 7.3.4 标准工作曲线绘制
• 7.3.5 精密度试验
• 7.3.6 稳定性试验
• 7.3.7 重现性试验
• 7.3.8 检出限
• 7.3.9 加样回收率
• 7.3.10 样品测定
• 7.4 讨论
• 7.4.1 色谱条件选择
• 7.4.2 提取方法选择
• 总结
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间科研成果