兴安白芷茎化学成分及抗肿瘤活性的初步分析

论文摘要

兴安白芷（Angelica dahurica（Fisch.）Benth.et Hook.）,伞形科（Umbelliferae）当归属多年生草本植物,分布于黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、山西、河北等省区,为常用中药。本文对其茎的化学成分及抗肿瘤活性进行了初步研究。1.建立了一种简便、可靠的测定兴安白芷中欧前胡素含量的高效液相色谱分析方法:大连依利特hypersil ODS2色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相:甲醇-水（体积比65:35）,流速1 mL/min,检测波长254 nm。利用均匀设计试验筛选了分析样品的制备方法,确定欧前胡素最佳提取条件为:以78%乙醇为溶剂在20℃下超声波提取22 min。用上述方法测定了不同产地兴安白芷中欧前胡素含量,各部位产地间含量差异都很明显,在兴安白芷茎中,塔河地区所产欧前胡素含量最高,所以以下试验均选用塔河产兴安白芷茎为试验材料。2.采用水蒸气蒸馏法从兴安白芷茎中提取挥发油,用GC-MS法分析其中的成分,首次分离鉴定了79种挥发性成分,主要为脂肪酸酯、倍半萜类化合物,其次为酮类、碳烷。所鉴定的79种成分中,除4-甲基-1-（1,5-二甲基-4-己烯基）-苯、3-甲基-丁酸-十六烷基酯、十六碳酸乙酯、亚麻酸甲酯、油酸乙酯外,其余的74种成分均在根的挥发油中未曾检出。3.对兴安白芷茎乙醇提取物的化学成分进行了研究,首先,用80%乙醇对其进行提取,然后用乙醚乙酸乙酯等对醇提物进行萃取,得到了乙醚萃取部分、乙酸乙酯萃取部分、水溶性部分等三个部分,之后通过硅胶柱色谱和制备薄层色谱等对其进一步分离纯化,分离得到了13个化合物。4.对兴安白芷茎乙醇粗提物以及分离纯化得到的化合物中含量相对较高的9种进行了细胞活性测定,分别检测其对HT29结肠癌细胞株、DU145前列腺癌细胞株、MiaPaCa-2人类胰腺癌细胞株、T47D乳腺癌细胞株、Brown黑色素瘤细胞株、2774卵巢癌细胞株、Spark肺癌细胞株的活性影响,结果表明化合物5有良好的抗癌活性。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 绪论
• 1.1 白芷简介
• 1.2 白芷的化学成分研究进展
• 1.2.1 挥发油类成分
• 1.2.2 香豆素类成分
• 1.2.3 其他化合物及矿物元素
• 1.3 白芷的药理作用研究进展
• 1.3.1 解热、镇痛作用
• 1.3.2 抗病原微生物作用
• 1.3.3 抗肿瘤作用
• 1.3.4 对心血管与神经系统的作用
• 1.3.5 保肝作用
• 1.3.6 其他作用
• 1.4 研究方法
• 1.4.1 色谱法（chromatography）
• 1.4.2 细胞毒作用检测方法
• 1.5 立题依据
• 2 不同产地兴安白芷中欧前胡素含量的HPLC分析
• 2.1 实验材料、仪器和试剂
• 2.1.1 实验材料
• 2.1.2 实验仪器与试剂
• 2.2 色谱条件
• 2.3 欧前胡素标准曲线
• 2.3.1 标准溶液的配制
• 2.3.2 标准曲线的绘制
• 2.4 均匀设计实验优选样品制备条件
• 2.4.1 供试品溶液的制备
• 2.4.2 欧前胡素超声波辅助提取实验条件的确定
• 2.5 方法学考证
• 2.5.1 精密度试验
• 2.5.2 重复性试验
• 2.5.3 回收率试验
• 2.6 不同产地兴安白芷中欧前胡素含量测定
• 2.7 本章小结
• 3 兴安白芷茎挥发油成分分析
• 3.1 实验材料、仪器和试剂
• 3.1.1 实验材料
• 3.1.2 实验仪器与试剂
• 3.2 仪器装置的连接
• 3.3 兴安白芷茎挥发油的提取
• 3.3.1 挥发油测定法
• 3.3.2 提取结果
• 3.4 兴安白芷茎挥发油GC-MS联用分析
• 3.4.1 GC-MS联用分析条件
• 3.4.2 GC-MS联用分析结果
• 3.5 本章小结
• 4 兴安白芷茎乙醇提取物的化学成分
• 4.1 实验材料、仪器和试剂
• 4.1.1 实验材料
• 4.1.2 实验仪器与试剂
• 4.2 提取
• 4.3 分离
• 4.3.1 乙醚萃取部分的分离
• 4.3.2 乙酸乙酯部分的分离
• 4.3.3 水溶性部分的分离
• 4.4 本章小结
• 5 兴安白芷茎抗肿瘤活性的初步测定
• 5.1 实验材料、仪器和试剂
• 5.1.1 实验材料
• 5.1.2 实验仪器与试剂
• 5.2 药物活性检测方法
• 5.2.1 试剂制备
• 5.2.2 活性测定方法
• 5.3 兴安白芷茎提取物活性测定
• 5.3.1 癌细胞株的培养
• 5.3.2 提取物活性测定
• 5.4 本章小结
• 结论
• 参考文献
• 附录
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 致谢