乙型肝炎治疗性疫苗的研究

论文题目: 乙型肝炎治疗性疫苗的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 遗传学

作者: 何晓文

导师: 孙树汉

关键词: 乙型肝炎,核酸疫苗,蛋白质疫苗,免疫原性,初免,加强免疫,制剂,微球,聚乙丙交酯,控制释放,表位,病毒样颗粒,生物信息学,预测,转墓因小,免疫耐受,表面抗原,核心抗原,抗原,抗体,杀伤性淋巴细胞,体液免,细胞免疫,免疫治疗,肝癌

文献来源: 第二军医大学

发表年度: 2005

论文摘要: 乙型肝炎是一种严重危险人类健康的全球性疾病,疫苗是预防和治疗乙肝的重要手段。本研究构建了表达HBV（中国流行株）表面抗原的DNA疫苗,并在表达载体中引入了人特异的CpG免疫刺激序列,摸索了一套适合于人用DNA疫苗中试生产的工艺路线。经过两步纯化,有效地去除菌液中的蛋白质和杂质核酸,降低了内毒素含量,使得到的DNA疫苗的质量符合有关标准。从体液免疫、细胞免疫全面地考察了乙肝DNA疫苗的免疫原性,发现DNA疫苗能在免疫小鼠体内表达目的抗原,能诱导出抗原特异性的体液反应和细胞免疫,诱导的抗体的IgG亚型疫IgG2（?）为主。进一步考察了乙肝DNA疫苗对HBV转基因小鼠的治疗作用。DNA疫苗免疫后,转基因小鼠血清中HBsAg水平均有不同程度地下降,部分小鼠HBsAg完全转阴;DNA疫苗能诱导出特异性的抗体反应,说明DNA疫苗能打破转基因小鼠对乙肝病毒的免疫耐受。 鉴于DNA疫苗的免疫原性较低,本课题分别通过改善疫苗的免疫方案、改善疫苗的剂型,来提高乙肝DNA疫苗的免疫效果。采用DNA疫苗、蛋白质疫苗联合免疫的策略,从不同免疫组合、不同免疫次序、不同免疫次数的8种免疫方案中筛选得到的一种最佳联合方案（2次DNA疫苗初免和1次蛋白质疫苗加强免疫的组合）,能明显地增强体液免疫和细胞免疫。本课题采用PLGA微球制剂的两种剂型分别包裹或吸附乙肝DNA疫苗,系统地考察了疫苗新剂型的免疫效果,并探讨了其增效的分子机制。结果表明两种微球给药系统明显地增强DNA疫苗的免疫原性,PLGA包裹的乙肝DNA口服疫苗缓慢释放质粒DNA,不仅诱导了系统的抗原特异性免疫,还能诱导高效的消化道粘膜免疫反应。增强的免疫原性与微球制剂的缓释、靶向给药的特点有关。研究发现乙肝DNA疫苗PLGA微球制剂延长目的基因的转录和表达,还能靶向性向抗原提呈细胞递送DNA疫苗。 HBx是一种多功能蛋白,为病毒基因组转录所必需。HBx与许多共刺激因子、转录因子相互作用,调控靶基因的转录,从而影响HBV感染的细胞的功能。由于HBx在乙肝以及乙肝引起的肝硬化、肝癌的肝组织上较HBV其他亚基有更高的表达率,所以本研究将其作为靶抗原,联合应用超基序法、延展基序法、量化基序法等生物信息学的表位预测方案,并结合生物学功能实验加以验证,筛选到3个来源于HBx、并能与HLA-A*0201分子高亲和性结合的抗原九肽VLHKRTLGL（92-100）,

论文目录:

英文缩写词表

中英文摘要

第一部分 乙肝DNA疫苗的研制及增强免疫效果的策略

引言

第一章 乙肝DNA疫苗的构建与纯化

第二章 乙肝DNA疫苗的免疫原性研究

实验材料和方法

结果

讨论

参考文献

第三章 乙肝DNA疫苗联合基因工程蛋白疫苗增强免疫效果的研究

引言

实验材料和方法

结果

讨论

参考文献

第四章口服乙肝DNA疫苗微球新剂型的免疫效果的研究

引言

实验材料和方法

结果

讨论

参考文献

第二部分 含乙肝X亚基多个CTL表位的病毒颗粒样疫苗的构建及免疫原性的研究

引言

第一章 含HBx多个CTL表位的病毒颗粒样疫苗的构建与表达

引言

实验材料和方法

结果

讨论

第二章 含HBx多个CTL表位的病毒颗粒样疫苗HLA-A2.1／Kb转基因小鼠体内免疫原性的研究

引言

实验材料和方法

结果

讨论

参考文献

总结

主要创新点和学术意义

致谢

在读期间发表论文情况

在读期间获奖情况

在读期间参加学术会议情况

综述

附录

发布时间: 2005-07-19

参考文献

• [1].融合表达Ag85B-ESAT6的结核病疫苗的构建及其免疫学特性研究[D]. 师长宏.第四军医大学2004
• [2].结核DNA疫苗的构建、免疫功能及保护效果研究[D]. 朱中元.华南热带农业大学2004
• [3].融合表达ESAT6-CFP10结核病疫苗的构建及其免疫学特性研究[D]. 张海.第四军医大学2005
• [4].甲、乙型肝炎口服二价DNA疫苗的研究[D]. 万家余.吉林大学2005
• [5].HIV-1治疗性重组DNA疫苗的构建、纯化及实验免疫研究[D]. 宋英今.吉林大学2005
• [6].治疗性乙型肝炎病毒DNA疫苗的基础研究[D]. 赫兢.中国人民解放军军医进修学院2005
• [7].SARS冠状病毒分离鉴定、疫苗构建及免疫血清制备研究[D]. 王瑞琳.吉林大学2006
• [8].异型M-CSF/M-CSFR DNA疫苗构建及其免疫效应的研究[D]. 王敏慧.中国协和医科大学2002
• [9].肿瘤基因工程纳米乳剂疫苗的药效学研究[D]. 葛伟.第四军医大学2006
• [10].乙型肝炎病毒HBsAg DNA疫苗的实验研究[D]. 王海燕.第四军医大学2000

相关论文

• [1].靶向DC的治疗性乙肝疫苗实验研究[D]. 张萍.中国人民解放军军事医学科学院2009
• [2].乙型肝炎免疫接种策略的评价[D]. 于淑丽.复旦大学2003
• [3].乙肝病毒大分子表面抗原PreS1区相关片段的表达、免疫性质及应用[D]. 胡维国.中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）2004
• [4].乙型肝炎核酸疫苗的安全性研究[D]. 章亚男.第二军医大学2005
• [5].治疗性乙型肝炎病毒DNA疫苗的基础研究[D]. 赫兢.中国人民解放军军医进修学院2005
• [6].增强核酸疫苗免疫效果的策略及其作用机制的研究[D]. 王芳.第二军医大学2006
• [7].体内增强治疗性乙型肝炎核酸疫苗免疫应答的研究[D]. 华瑞.吉林大学2006
• [8].HSP65-HBV多表位融合蛋白乙肝治疗性疫苗的研制[D]. 王华.吉林大学2006
• [9].以HBcAg-preS1表位融合蛋白为基础的新型HBV治疗性疫苗的构建、表达和免疫活性研究[D]. 孙红光.吉林大学2006
• [10].RNA干扰及治疗性DNA疫苗抗乙型肝炎病毒研究[D]. 彭金良.上海交通大学2006

标签：乙型肝炎论文;  核酸疫苗论文;  蛋白质疫苗论文;  免疫原性论文;  初免论文;  加强免疫论文;  制剂论文;  微球论文;  聚乙丙交酯论文;  控制释放论文;  表位论文;  病毒样颗粒论文;  生物信息学论文;  预测论文;  转墓因小论文;  免疫耐受论文;  表面抗原论文;  核心抗原论文;  抗原论文;  抗体论文;  杀伤性淋巴细胞论文;  体液免论文;  细胞免疫论文;  免疫治疗论文;  肝癌论文;