论文摘要
目前,在全球控制和预防艾滋病病毒（HIV）感染方面尚无完全有效的措施,要控制和预防HIV感染,最有效的方法是制备一种安全、有效的预防HIV感染的疫苗。DNA疫苗已成为当今HIV疫苗设计的新方案之一,它可以克服按传统方案设计的HIV疫苗所存在的病毒活力恢复、中和性抗体的特异性有限和缺乏CTLs等缺点。gag基因是HIV病毒重要的结构蛋白基因,其编码的核心蛋白Gag的氨基酸序列相对保守,在病毒的感染复制中起着重要的作用。 本研究将美国洛克菲勒大学艾伦戴蒙德艾滋病研究中心（ADARC）惠赠的重组质粒pVAX-gag（中国流行毒株HIV-1C亚型的gag基因插入载体pVAX而构建的重组质粒）在体外进行了表达。同时构建了含此gag基因的原核表达质粒pGEX-gag,表达纯化出重组蛋白Gag。Western Blot分析显示重组质粒pVAX-gag和pGEX-gag的表达产物能与抗p24单克隆抗体发生特异性反应。用惠赠的重组质粒pVAX-gag免疫Balb/C小鼠后,用流式细胞仪检测其细胞免疫反应。再以纯化后的重组蛋白Gag作为包被抗原,用ELISA检测其体液免疫反应。结果表明重组质粒pVAX-gag免疫小鼠后可有效地诱导机体产生细胞免疫和体液免疫反应,而且免疫剂量和免疫效果存在一定的正相关性。本研究为中国流行株HIV-1 DNA疫苗的研究奠定了一定的实验基础。
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