论文摘要
本实验室以往用反义技术抑制人鼻咽癌细胞CNE-2L2的α-甘露糖苷酶Man2cl基因表达,观察到CNE-2L2细胞的恶性生物学行为,包括在培养中生长、成瘤性生长和转移力等均明显抑制。为探讨其机制,本实验室曾用基因芯片比较了野生型CNE-2L2细胞（W细胞）与Man2cl基因表达抑制的CNE-2L2细胞（AS细胞）间基因表达的差异。与W细胞相比,有些基因在AS细胞的表达增强,有些则减弱。BCSC-1基因（又称LOH11CR2A）是表达增强得最高的基因。鉴于Martin等提出BCSC-1基因是1个候选肿瘤抑制基因。本实验室研究了BCSC-1基因在人鼻咽癌的抑癌作用。前博士生陈双玲把BCSC-1转染入BCSC-1弱表达的野生型CNE-2L2细胞,观察到BCSC-1基因异位表达使CNE-2L2细胞在培养中的生长、集落生成、细胞的成瘤性生长明显抑制。我参与了BCSC-1基因异位表达对CNE-2L2细胞恶性行为影响的研究。但是,要证明BCSC-1基因的抑癌作用,单凭基因的异位表达是不够的,因为异位表达的基因是外源的,而非细胞自身基因的表达。因此,我用siRNA抑制BCSC-1强表达的AS细胞的BCSC-1基因表达,观察是否发生与BCSC-1基因异位表达相反的作用,即导致AS细胞恶性行为增强。我确实观察到了AS细胞在培养中的生长、集落生成、细胞的成瘤性生长等恶性行为增强的现象。在此基础上,我还用裸鼠做了BCSC-1基因治疗CNE-2L2细胞所长肿瘤的实验研究,进一步证明了BCSC-1基因对CNE-2L2细胞恶性生物学行为的抑制作用。这样,我的实验与陈双玲的实验一起,证明了BCSC-1基因在人鼻咽癌细胞CNE-2L2确起着抑癌基因的作用。为从蛋白质水平检测BCSC-1基因在人鼻咽癌组织的表达,我制备了1个能用于免疫组化检测的抗BCSC-1蛋白质的单克隆抗体。用此抗体作探针,在蛋白质水平检测了3例正常鼻咽组织和9例鼻咽癌活检组织的BCSC-1基因表达,见BCSC-1基因在所检测的正常鼻咽上皮细胞有强表达,而在9例人鼻咽癌组织中有4例的表达明显减弱,占44.4%。为探讨BCSC-1基因抑癌作用的分子机制,另外,我从3个方面作了初步探索:1)用全基因组芯片分析了BCSC-1基因异位表达对CNE-2L2细胞基因表达的影响,观测到有91个基因表达增强,有97个基因表达减弱。我对这些基因作了GO分析和Pathway分析;2)用microRNA芯片BCSC-1基因异位表达对CNE-2L2细胞microRNA表达的影响;3)用RT-PCR检测了BCSC-1基因经siRNA抑制后,CNE-2L2细胞中WNT家族基因mRNA表达的变化。我的实验结果进一步表明,BCSC-1是人鼻咽癌的1个肿瘤抑制基因。此外,我还对α-甘露糖苷酶Man2cl表达抑制致CNE-2L2细胞恶性行为减弱的分子机制作了初步的蛋白组学分析。
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相关论文文献
- [1].BCSC-1基因慢病毒干扰载体的构建与鉴定[J]. 潍坊医学院学报 2014(01)
- [2].BCSC-1过表达抑制肝癌Bel-7402细胞的增殖、侵袭、黏附和迁移[J]. 中国肿瘤生物治疗杂志 2013(06)
- [3].BCSC-1基因异位表达对人小细胞肺癌细胞增殖的抑制效应[J]. 中国癌症杂志 2012(05)
- [4].BCSC-1基因异位表达对MDA-MB-231侵袭能力影响及其机制探讨[J]. 中华肿瘤防治杂志 2014(06)
标签：鼻咽癌论文; 肿瘤抑制基因论文; 细胞生长论文; 基因治疗论文; 全基因组表达分析论文;