论文摘要
目的:观察慢性心力衰竭（chronic heart failure,CHF）患者外周血T淋巴细胞表面活化抗原CD25表达水平;探讨卡维地洛（Carvedilol,Car）体外对人外周血T淋巴细胞表达CD25的作用;研究Car对人外周血单个核细胞TNF-α和IL-6表达和分泌的影响。 方法:（1） 选取CHF患者18例,所有患者LVEF均<0.50;另选择正常的健康人12例作为对照组。用流式细胞仪检测CHF患者和健康对照者的外周全血CD25/CD3,以了解CHF患者外周血T淋巴细胞CD25的表达水平,并比较两组之间有无差别;（2） 采健康志愿者外周全血,Hypaque-Ficoll淋巴细胞分离液分离出外周血单个核细胞（PBMC）,用PMA+A23187作为刺激剂,加或不加Car,分组体外培养。用MTT方法检测PBMC的活性,流式细胞仪检测PBMC的凋亡率,进行Car对PBMC的毒性检测,确定Car体外用药的安全范围。（3） 按上述方法分离出健康志愿者PBMC,分为对照组和药物干预组体外培养。其中对照组（Car 0μM）仅加刺激剂;药物干预组先加入Car,2小时后再加入刺激剂,药物干预分为浓度1组（Car 2.5μM）、浓度2组（Car 5μM）、浓度3组（Car 10μM）。体外培养24小时后收集细胞,用流式细胞仪检测T淋巴细胞表面活化抗原CD25的表达水平,以了解Car体外对T淋巴细胞活化抗原CD25表达的影响;（4） 分离健康志愿者PBMC,分为A、B、C、D、E、F、G、H共8组（见表1）体外培养。4小时后收集细胞,用reverse transeription-polymerase chain reaction（RT-PCR）方法检测PBMC的TNF-α和IL-6的mRNA表达水平,了解Car体外对PBMC的TNF-α和IL-6的mRNA表达的影响;（5）按（3）的步骤分离并处理PBMC,培养24小时后收集培养上清,用ELISA方法检测TNF-α和IL-6的浓度。 结果:（1）与正常人相比,CHF患者T淋巴细胞CD25表达水平明显升高,且差异有显著性（p<0.05）;（2） 20μM以内的Car对人PBMC没有明显毒性:（3）与对照
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