论文摘要
一、Toll-like受体在小鼠Sertoli细胞中的表达及功能Toll-like受体（Toll like receptors,TLRs）是近来发现的一种模式识别受体,识别病原微生物进化中的保守分子。在人中已发现10个成员（TLR1-10）,小鼠中发现了12个成员（TLR1-9,11-13）。TLRs在介导天然免疫和获得性免疫中发挥着重要的作用。本文旨在研究TLRs在小鼠Sertoli细胞的表达及其功能。应用RT-PCR,流式细胞仪和Western blots的方法检测基因表达。免疫荧光染色用于检测NF-κB的活化。油红O染色检测脂滴的形成用来评价Sertoli细胞的吞噬功能。结果显示,TLR2-TLR5在Sertoli细胞中高表达,TLR6,TLR7和TLR13表达相对较低,而TLR1,TLR8,TLR9,TLR11和TLR12在Sertoli细胞中不表达。我们选择表达水平较高的TLR2-5进行深入研究。结果表明Sertoli细胞中的TLR2-5均可被其配体酵母多糖,poly（I:C）,脂多糖和鞭毛蛋白激活,进而活化NF-κB,诱导Sertoli细胞分泌主要炎症因子（IL-1α,IL-6,IFNα及IFNβ）。TLR2-5被激活后均可诱导IL-1α和IL-6的表达,而TLR3-4的激活还可诱导IFNα及IFNβ的分泌。另外,TLR3具有调节Sertoli细胞吞噬能力的作用,并且发现TLR介导的Sertoli细胞吞噬作用与清道夫受体的表达上调有关。上述结果表明TLR2-5可能在保护生精上皮抵抗外来病原体和自身抗原,维持睾丸的免疫获免特征中发挥着重要的作用。二、Tyro3家族受体敲除小鼠呈现高比率的末端阴道闭锁阴道闭锁是女性生殖系统的常见畸形,导致阴道发育缺陷的特异分子机制仍不清楚。我们报道缺失Tyro3家族受体的雌性小鼠表现高比率的末端阴道闭锁。Tyro3受体酪氨酸激酶家族包括三个成员:Tyro3、Axl与Mer。在分析三基因敲除小鼠(Tyro3-/-Axl-/-Mer-/-,TAM)表型的过程中,发现约16%的雌性小鼠表现为末端阴道闭锁。进而对双基因敲除及单基因敲除小鼠进行分析,发现Axl-/-Mer-/-（AM）与Tyro3-/-Mer-/-（TM）小鼠的阴道闭锁率分别为4.0%和3.7%,Mer-/-（M）雌性小鼠的发病率为2.5%。其它基因型小鼠Axl-/-Tyro3-/-（AT）、Axl-/-（A）、Tyro3-/-（T）及野生型小鼠从未见此变化。提示Tyro3亚家族成员在调节阴道发育上相互协调,Mer起着关键作用,Axl和Tyro3起辅助Mer的作用。Tyro3家族受体敲除小鼠可做为研究阴道闭锁发生机理的有用模型。