新型腺病毒载体制备及以其为趋化因子基因载体的肿瘤免疫治疗和机制研究

论文题目: 新型腺病毒载体制备及以其为趋化因子基因载体的肿瘤免疫治疗和机制研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 药理学

作者: 邱峰

导师: 周远大

关键词: 纤毛突变型腺病毒载体,修饰腺病毒载体,趋化因子,肿瘤免疫治疗

文献来源: 重庆医科大学

发表年度: 2005

论文摘要: 基因载体对于基因治疗成败起着关键作用,腺病毒载体(Adv)由于具有易于制备获得高滴度病毒、可转导分裂期和非分裂期细胞等优点而成为一种常用病毒载体,但由于存在基因转导的CAR依赖性、组织特异性低、可能引发免疫反应等缺点,影响了腺病毒载体在基因治疗研究中的应用。本研究针对上述不足,制备了一种新型纤毛突变型Adv(FM-Adv),在普通Adv纤毛头节区HI环上插入了具有整合素特异性的RGD肽,大大提高了对表达αv整合素的CAR(-)细胞的转导能力,其对CAR(-)或CAR弱表达细胞的转导效率约为普通Adv的10~1000倍。由于用活化的聚乙二醇(PEG)修饰蛋白质和多肽,可提高其体内稳定性、延长半衰期、减小免疫原性及抗原性,并对肿瘤具有一定的被动靶向性。所以,在研究中还使用甲氧基聚乙二醇(mPEGs)对Adv进行PEG修饰,制备得到PEG-Adv,大大延长了Adv的血浆半衰期,并减弱其可能引起的免疫反应。但是,Adv在经PEG修饰后,病毒颗粒表面PEG链产生的立体位阻使其转染能力大大降低。所以,实验中进一步使用RGD-mPEG(未端连接了RGD肽的PEG)对Adv进行PEG修饰,制备得到RGD-PEG-Adv,其基因转导能力与RGD-PEG-Adv相同,同时具有抵抗抗体中和、巨噬细胞呑食和血浆半衰期长等优点。趋化因子是一类在细胞的生理过程中发挥着重要作用的细胞因子样蛋白质,可趋化白细胞和免疫细胞向组织浸润。趋化因子在肿瘤生物学中具有较复杂的作用和重要意义,将趋化因子导入肿瘤组织,能

论文目录:

英汉缩略名词对照表

中文摘要

英文摘要

第一部分新型腺病毒载体的制备及功能研究

第一章纤毛突变型腺病毒载体的制备及适用性研究

第一节细胞中CAR 及整合素的表达

第二节整合素靶向性FM-Adv 的制备

第三节 FM-Adv 的基因转导效率

第四节 FM-Adv 细胞毒性评价

第五节 FM-Adv 稳定性实验

第六节 FM-Adv 的体内分布及毒性

第七节小结

第二章腺病毒载体的PEG 修饰

第一节 Adv 的PEG 修饰

第二节 PEG-Adv 的血液半衰期

第三节 PEG-Adv 载体的抗体抵抗能力

第四节 PEG-Adv 的基因转导效率

第五节小结

第三章靶向性PEG-Adv

第一节整合素靶向性PEG-Adv 的制备

第二节 RGD-PEG-Ad-Luc 的基因转导

第三节 RGD-PEG-Ad-Lu 的抗体抵抗

第四节小结

参考文献

第二部分以FM-Adv 为基因载体的肿瘤免疫治疗

第一章 RGD-Adv 肿瘤内注射后的体内分布

第二章 FM-Adv 对OV-HM 细胞的基因导入能力

第三章以RGD-Adv 为基因载体的肿瘤趋化因子治疗

第一节肿瘤趋化因子疗法的可行性研究

第二节趋化因子诱导的抗肿瘤作用

第三节小结

第四章趋化因子ILC 抗肿瘤作用机制

第一节表达趋化因子肿瘤细胞中的T 细胞浸润及其抗肿瘤作用

第二节表达趋化因子肿瘤细胞中NK 细胞的浸润

第三节表达ILC 肿瘤细胞所诱导的T 细胞、NK 细胞的抗肿瘤作用

第四节小结

参考文献

综述：基于腺病毒载体的基因给药系统

致谢

在读期间发表论文及学术活动

发布时间: 2005-07-22

参考文献

[1].细菌代谢产物在肿瘤免疫治疗中的应用研究[D]. 江华.中国人民解放军军事医学科学院2007
[2].基因半相合肿瘤特异性T淋巴细胞在肿瘤免疫治疗中的应用研究[D]. 崔乃鹏.河北医科大学2012
[3].环磷酰胺调控Treg基础上免疫治疗的抗瘤实验研究[D]. 李卫泊.河北医科大学2010
[4].免疫治疗过程中肿瘤微环境内免疫细胞可视化活体光学成像研究[D]. 祁淑红.华中科技大学2016
[5].一种新的人NK细胞系的特性及其抗肿瘤效应研究[D]. 程民.中国科学技术大学2010
[6].转染CD137L的人脐血树突细胞对结直肠癌患者自然杀伤细胞体外扩增及功能影响的实验研究[D]. 付泽娴.河北医科大学2016
[7].全人源抗PD-L1抗体的筛选及其与放疗联合治疗肿瘤的效果和机制研究[D]. 秦颂兵.苏州大学2015
[8].肿瘤相关基因t351的初步研究[D]. 吕俊海.中国协和医科大学2007

新型腺病毒载体制备及以其为趋化因子基因载体的肿瘤免疫治疗和机制研究

猜你喜欢