绿色筛选标记论文-张晓娟,李小颖,施海霞,葛文平,梁虹

绿色筛选标记论文-张晓娟,李小颖,施海霞,葛文平,梁虹

导读:本文包含了绿色筛选标记论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:红色荧光蛋白,绿色荧光蛋白,转基因,造血干细胞

绿色筛选标记论文文献综述

张晓娟,李小颖,施海霞,葛文平,梁虹[1](2011)在《造血干细胞全标记红色和绿色荧光转基因小鼠的筛选》一文中研究指出目的对五种荧光转基因小鼠造血干细胞中的荧光标记细胞进行分析,筛选造血干细胞全标记红色和绿色荧光转基因小鼠,为造血干细胞分化机制体内示踪研究提供理想的动物模型。方法采用活体荧光影像系统对两种红色荧光转基因小鼠品系C57BL/6J-TgN(CAG-DsRed-1和CAG-DsRed-2)ZLFILAS和叁种绿色荧光转基因小鼠品系C57BL/6J-TgN(CAG-EGFP-1、CAG-EGFP-2和CAG-EGFP-3)ZLFILAS的荧光标记进行比较;采用流式细胞术检测各转基因小鼠的骨髓lin(-)c-kit(+)Sca-1+(LSK)造血干细胞荧光标记细胞比率,根据标记比率筛选造血干细胞全标记红色和绿色荧光转基因小鼠。结果活体荧光影像分析表明转基因小鼠均系统性表达红色或绿色荧光。流式细胞术检测表明LSK造血干细胞中高度表达红色和绿色荧光,其中,C57BL/6J-TgN(CAG-DsRed-1)ZLFILAS和C57BL/6J-TgN(CAG-EGFP-1)ZLFILAS的造血干细胞全部为荧光标记细胞。结论筛选获得在造血干细胞中全标记的红色和绿色荧光转基因小鼠,可为造血干细胞体内研究提供有效示踪工具。(本文来源于《中国比较医学杂志》期刊2011年05期)

唐金宝,陈永,梁淑娟,王焕芹,李青春[2](2009)在《利用增强型绿色荧光蛋白基因作筛选标记克隆载体的构建及鉴定》一文中研究指出目的构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为筛选标记的新型pUC18筛选载体。方法将EGFP基因克隆至pUC18载体的PstI/HindⅢ位点,构建筛选载体pUC18-EGFP,并验证pUC18-EGFP能否利用EG-FP的荧光特性筛选出含基因重组体的阳性克隆。结果经酶切和基因测序鉴定pUC18-EGFP载体构建正确;在外源基因插入该载体后,对LB氨苄平板上的绿色菌落进行酶切和基因测序鉴定,结果证明LB平板上的绿色菌落即为含有重组质粒的克隆。结论成功构建pUC18-EGFP筛选载体,利用EGFP的绿色荧光可筛选出阳性克隆。(本文来源于《中国海洋药物》期刊2009年02期)

黄琼[3](2008)在《新疆甜瓜果实绿色条纹性状AFLP标记的初步筛选》一文中研究指出甜瓜(Cucumis melo L.)是新疆有特色的重要经济作物,新疆甜瓜以其特有的优良风味和品质享誉国内外,且种质资源丰富。对于新疆甜瓜生产来说,选育优良品种是最重要的环节。传统的常规育种方法育种周期长且工作量大,不能满足目前生产需要。而分子标记技术的产生和应用为加快育种进程提供了新的思路,利用分子标记技术对重要的农艺性状进行标记可更为准确快速,并对育种和基因克隆提供理论依据。建立合适的分子标记技术及辅助育种平台,对利用分子标记辅助育种,构建遗传图谱以及基因的定位克隆都具有重要的意义。目前国内在对甜瓜农艺性状进行分子标记方面的研究较少,本研究以新疆甜瓜为研究对象,通过对AFLP(扩增片段长度多态性)标记技术中的几个关键参数进行优化,建立了成熟的适合新疆甜瓜的AFLP技术体系,并初步筛选了果实绿色条纹性状的AFLP标记。主要研究结果如下:1.通过反复试验,采用改进后的CTAB法提取的新疆甜瓜基因组DNA质量好,符合AFLP反应要求;2.通过对酶切时间及各步扩增中模板的稀释倍数等进行研究,建立了适于新疆甜瓜分析的AFLP银染技术体系。双酶切必须完全彻底,基因组DNA300ng用EcoR I和Mse I各3U,37℃酶切5h;连接产物稀释10倍用于预扩增;预扩增产物的稀释75倍后进行选择性扩增;6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染法检测多态性;3.利用64对选择性引物组合对两亲本新疆甜瓜自交系k4-13和k4-15进行AFLP多态性分析。64对引物组合扩增条带总数为3622条,其中多态性带881条,占总条带数的24.3%。本研究筛选出扩增带型清晰,多态性丰富的引物组合14对;4.以新疆甜瓜自交系k4-13和k4-15配置杂交组合,构建F2代分离群体,通过AFLP-BSA技术初步筛选到果实绿色条纹性状的6个AFLP标记。本研究填补了新疆在甜瓜分子标记研究方面的空白,为新疆甜瓜分子标记辅助育种创建了一个重要的技术平台,对新疆甜瓜优质品种选育具有指导意义,这将为新疆甜瓜功能基因的克隆和应用、分子遗传图谱的构建以及遗传多样性的研究奠定坚实基础,从而加快新疆甜瓜分子育种的进程,具有重要的理论意义与应用价值。(本文来源于《新疆大学》期刊2008-05-01)

李寿东,齐义鹏,胡建红,林宏[4](1997)在《用绿色荧光蛋白基因作为筛选标记的新型克隆载体的构建》一文中研究指出用绿色荧光蛋白基因作为筛选标记的新型克隆载体的构建李寿东齐义鹏胡建红林宏(武汉大学病毒研究所武汉430072)目前通常使用的质粒克隆载体,如pUC系列、pGEM系列和pBluescript等,都是以lacZ’作为筛选标记的插入失活型载体。lacZ’...(本文来源于《生物工程学报》期刊1997年03期)

绿色筛选标记论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为筛选标记的新型pUC18筛选载体。方法将EGFP基因克隆至pUC18载体的PstI/HindⅢ位点,构建筛选载体pUC18-EGFP,并验证pUC18-EGFP能否利用EG-FP的荧光特性筛选出含基因重组体的阳性克隆。结果经酶切和基因测序鉴定pUC18-EGFP载体构建正确;在外源基因插入该载体后,对LB氨苄平板上的绿色菌落进行酶切和基因测序鉴定,结果证明LB平板上的绿色菌落即为含有重组质粒的克隆。结论成功构建pUC18-EGFP筛选载体,利用EGFP的绿色荧光可筛选出阳性克隆。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

绿色筛选标记论文参考文献

[1].张晓娟,李小颖,施海霞,葛文平,梁虹.造血干细胞全标记红色和绿色荧光转基因小鼠的筛选[J].中国比较医学杂志.2011

[2].唐金宝,陈永,梁淑娟,王焕芹,李青春.利用增强型绿色荧光蛋白基因作筛选标记克隆载体的构建及鉴定[J].中国海洋药物.2009

[3].黄琼.新疆甜瓜果实绿色条纹性状AFLP标记的初步筛选[D].新疆大学.2008

[4].李寿东,齐义鹏,胡建红,林宏.用绿色荧光蛋白基因作为筛选标记的新型克隆载体的构建[J].生物工程学报.1997

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