黄瓜品种鉴定的RAPD分析与“碧玉”黄瓜纯度检测

论文摘要

黄瓜（Cucumis sativus L．）是世界上重要的蔬菜作物之一，其种植面积大，市场上种类繁多，极其容易造成品种的混杂；同时黄瓜具有较强的杂种优势，目前市场上广泛利用的均为杂交一代种子，由于杂交种多是利用人工制种，质量难以控制，时常发生伪劣种子上市，极易给生产带来重大损失。因此准确、迅速、简便地鉴定黄瓜品种与检测遗传纯度是当前蔬菜生产和种子工作的重要内容。目前田间小区种植是鉴定品种真实性和测定品种纯度的最为常见的方法。本研究首先对长江中下游主栽的31个黄瓜品种进行田间种植鉴定，提出了春提早黄瓜的种植技术，并结合生产实际中比较重要的性状，较详细调查了31个主要品种的田间植物学性状与重要园艺学性状，并对品种的特性进行了综合评价分析，为早春黄瓜生产中品种的选用与鉴定提供了一定的理论依据。利用RAPD分子标记技术对长江中下游地区31个黄瓜主栽品种进行了分子鉴定，并分析其遗传多样性分析。总共选用了13条可以有效扩增并具有多态性的引物，共产生了84条带，其中多态性条带共有52条，多态性位点百分率为61.90％，平均每个引物扩增出4条多态性带；品种间的平均相似系数为0.90，利用任何1个单一引物都不能将所有品种区分开，说明黄瓜栽培种间的多态性不高。通过聚类分析发现RAPD标记技术在一定程度上能够揭示品种之间园艺学性状的相似性及亲缘关系的远近，研究结果将为黄瓜品种鉴定与种质资源材料鉴定打下重要技术基础。利用RAPD分子标记技术对黄瓜商品种’碧玉’F1进行了遗传纯度检测。从395个随机引物中筛选出具有父母本差异位点可应用于种子纯度检测的引物44个，其中15个偏母型引物，15个偏父型引物，4个特异性引物及10个缺失型引物。利用2个偏母型引物NAURP1184，NAURP120结合2个偏父型引物NAURP287，NAURP1100，鉴定碧玉黄瓜种子的纯度。经鉴定，在205个单株中有2个单株为其他种子混杂，1个单株为父本混杂种。该黄瓜种子遗传纯度为98.54％。这一结果与田间形态鉴定结果高度一致，从而表明RAPD标记是鉴定黄瓜杂交种子遗传纯度的高效准确地方法。

论文目录

• 目录
• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1 作物品种常规鉴定技术
• 1.1 种子鉴定
• 2 作物品种现代鉴定技术
• 2.1 蛋白质指纹图谱技术
• 2.2 DNA指纹图谱技术
• 2.2.1 RFLP标记技术
• 2.2.2 RAPD标记技术
• 2.2.3 SSR标记技术
• 2.2.4 ISSR标记技术
• 2.2.5 AFLP标记技术
• 2.2.6 几种标记技术的比较
• 3 指纹图谱技术在作物品种鉴定中的应用
• 3.1 品种鉴定、新品种登记,保护专利权
• 3.2 分析、检验品种的真实性及纯度
• 3.3 品种的亲缘关系和分类研究
• 参考文献
• 第二章 黄瓜主要品种田间形态学鉴定
• 1 引言
• 2 材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.2 方法
• 3 结果与分析
• 3.1 春提早黄瓜的生产技术
• 3.2 田间性状调查记载与评价
• 参考文献
• 第三章 黄瓜主要品种指纹图谱与分子鉴定的RAPD分析
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 基因组DNA提取
• 1.3 基因组DNA的RAPD-PCR标记分析与检测
• 1.4 数据分析
• 2 结果与分析
• 2.1 RAPD扩增结果分析
• 2.2 相似系数与聚类分析
• 3 讨论
• 参考文献
• 第四章 利用RAPD标记鉴定‘碧玉’黄瓜杂种遗传纯度的研究
• 1 材料与方法
• 1.1 供试材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果与分析
• 2.1 引物筛选
• 2.2 引物验证
• 2.3 碧玉黄瓜遗传纯度的检测
• 2.4 碧玉黄瓜遗传纯度的田间鉴定
• 3讨论
• 参考文献
• 致谢