论文摘要
[目的]MicroRNA (miRNA)是新发现的一类能够调控其靶基因表达水平的小分子RNA家族。miRNA的调控作用涉及到生物体生长发育的很多过程,例如:肿瘤发生、发育及细胞凋亡等方面。本研究利用细胞生物学、生物信息学、分子生物学技术验证了miR-214的靶基因,并对其在肿瘤增殖、凋亡过程中所发挥作用进行研究。[方法]首先利用表达谱芯片和Northern blot技术分析了miR-214在人宫颈癌组织和正常宫颈组织中的表达差异,随后联合运用基因芯片和生物信息学以及分子生物学技术确定了miR-214的靶基因。最后经MTT、软琼脂克隆形成实验证实了miR-214在宫颈癌细胞凋亡及增殖过程中所发挥的重要调控作用。[结果]1.通过表达谱芯片和Northern blot技术验证了miR-214在人宫颈癌组织中的表达水平低于在正常宫颈组织中的表达水平。2.利用mRNA表达谱芯片和生物信息学技术预测了miR-214的候选靶基因MEK3和JNK1,并通过RT-PCR及荧光报告载体实验得到验证。3.通过MTT、软琼脂克隆形成实验证实miR-214能够通过其靶基因MEK3和JNK1抑制HeLa细胞增殖。[结论]本实验首次证实了miR-214的两个靶基因MEK3和JNK1,并通过实验证明miR-214可通过其靶基因MEK3和JNK 1抑制HeLa细胞的增殖。对miR-214在肿瘤细胞凋亡和增殖过程中调节机制的研究,有助于更深刻了解肿瘤细胞自身的生物学特性,同时也可能为肿瘤的基因治疗提供一条新的途径。
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