风疹病毒包膜糖蛋白E1的真核表达及其生物学活性研究

论文摘要

风疹病毒(rubella virus，RV)是披膜病毒科风疹病毒属的唯一成员，人类是RV的唯一自然宿主。人群对RV普遍易感，感染后可发生风疹。RV除了感染人外，实验室还能感染恒河猴、绒猴、猩猩、狒狒、乳鼠、地鼠和兔等野生和实验动物，并出现与人相似的感染过程，包括潜伏期、病毒血症及免疫应答反应等，但不出疹，仅狒狒感染RV后出现皮疹。 风疹(mbella)，也叫德国麻疹，通常是一种非常温和的疾病，一般不引起严重后果，通常只引起皮疹、颌下淋巴结肿大和其他轻微的体征。但在年长的儿童和成年人，尤其是妇女，风疹的后果可能要严重的多，包括关节疾病和紫癜。RV感染的危害主要在于先天性感染，即胎儿宫内感染。孕期前12周感染可导致胎儿先天风疹感染和80～90％的患风疹的孕妇流产。胎儿的先天性感染会导致先天性风疹综合征，累及多器官、多系统，并存在长期的活性感染。 临床上，病毒存在于病人的鼻咽分泌物、血液、粪便和尿液中。虽然风疹经常为隐性感染，但亚临床表现的病人也有传染性，这对风疹的预防带来了一定的难度。病毒通过气溶胶扩散，在出现皮疹前的7天和出现皮疹后的7天从鼻咽排出，具有传染性。 先天性风疹综合征包括结构畸形(主要表现为神经性耳聋，白内障，心脏疾病如肺动脉和心脏瓣膜狭窄、动脉导管未闭)和智力发育障碍，晚期并发症包括糖尿病、甲状腺疾病、生长激素缺乏和进行性脑炎。 1962年，风疹的病原体RV分离成功，为RV的分子生物学研究、血清学检测、RV感染特别是先天性感染的诊断及疫苗研制等奠定了基础。 RV基因组为单股正链40S RNA，全长9 762个核苷酸，其5′端和3′端含

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 符号说明
• 前言
• 一、风疹
• 二、风疹病毒及其分子生物学研究
• 三、风疹病毒的血清流行病学研究现状
• 四、风疹病毒的实验室诊断研究现状
• 五、风疹病毒的疫苗研究进展
• 材料与方法
• 一、材料
• 二、方法
• 结果
• 一、目的基因扩增
• 二、克隆载体的构建和序列分析
• 三、含目的基因真核表达载体的构建
• 四、氨基酸序列分析
• 五、重组蛋白E1的表达
• 六、重组蛋白E1表达产物的鉴定
• 七、重组蛋白E1在ELISA应用中的研究
• 八、重组蛋白E1的免疫原性研究
• 讨论
• 一、风疹病毒包膜糖蛋白E1酵母表达载体的构建
• 二、风疹病毒JR23株糖蛋白E1在毕赤酵母表达系统中的表达和抗原性分析
• 三、酵母系统表达的风疹病毒E1糖蛋白在ELISA诊断中的应用研究
• 四、重组蛋白E1的免疫原性研究
• 结论
• 创新之处
• 附录、附图
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文
• 学位论文评阅及答辩情况表