论文摘要
第一章Ezrin在人脑星形细胞瘤的表达意义目的:探讨膜-细胞骨架联接蛋白埃兹蛋白（Ezrin）在人脑星形细胞瘤中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学SABC方法,检测107例人脑星形细胞瘤和10例正常脑组织中Ezrin的表达,并结合临床随访资料分析表达水平与星形细胞瘤临床预后的相关性。结果:Ezrin的表达在人脑星形细胞瘤组和对照组之间的差异有统计学意义（P＜0.05）。在107例的星形细胞瘤组织中发现96例Ezrin阳性表达,阳性表达率为89.7%,Ezrin表达与肿瘤恶性程度呈正相关（r=0.551,P＜0.01）,结合临床病理资料分析发现Ezrin的表达水平和肿瘤细胞分化、瘤周水肿程度具有统计学意义（P＜0.05）。Ezrin强阳性表达组和弱阳性+阴性表达组的术后无瘤生存时间之间差异具有统计学意义（x2=29.85,P=0.000）。结论:Ezrin的表达水平与人脑星形细胞瘤的恶性程度密切相关,Ezrin的过度表达对星形细胞瘤发展起重要作用,提示Ezrin可以作为反映星形细胞瘤预后的一种有价值的分子标志物。第二章黄芩素对SHG-44细胞增殖、侵袭迁移的影响目的:观察黄芩素干预人星形细胞瘤SHG-44细胞株后,肿瘤细胞周期、增殖以及运动侵袭能力的变化。方法:以体外培养的人星形细胞瘤SHG-44细胞为研究对象,用黄芩素干预后,显微镜观察细胞形态变化,MTT法观察细胞增殖,流式细胞仪（FCM）分析细胞周期,侵袭小室实验观察细胞侵袭力改变,蛋白质印迹法（Western Blot）检测细胞MMP2、MMP9、survivin、cyclinD蛋白表达的变化。结果:1、MTT法观察黄芩素对SHG-44细胞增殖的抑制作用随时间的延长和药物浓度的增加,抑制作用逐渐增强,有明显的时间和剂量依赖性;2、流式细胞仪检测显示随黄芩素浓度增加,凋亡率增高,差异有统计学意义（P＜0.05）;黄芩素将肿瘤细胞阻滞于G0/G1期,与对照组比较S期细胞减少近18%,差异有统计学意义（P＜0.05）;3、侵袭小室实验证实随着黄芩素干预浓度增加,SHG-44细胞48h后穿过人工基底膜的细胞数量明显更少,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）;4、黄芩素呈浓度依赖性地抑制SHG-44细胞MMP2、MMP9及survival、cyclinD蛋白的表达。结论:1.黄芩素对SHG-44细胞增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖性;2.48h黄芩素抑制SHG44细胞增殖的IC50为13.77μM;3.黄芩素抑制SHG44细胞侵袭迁移;4.黄芩素对星形细胞瘤治疗具有潜在应用价值。第三章黄芩素对SHG-44细胞Ezrin的表达和运动的影响目的:比较siRNA下调Ezrin在人脑星形细胞瘤SHG-44细胞中的表达,与黄芩素干预后,肿瘤细胞运动能力的变化,探讨黄芩素是否通过抑制Ezrin蛋白表达及活化实现抗肿瘤的机制。方法:以体外培养的人星形细胞瘤SHG-44细胞为研究对象,黄芩素干预后,蛋白质印迹法（Western Blot）检测细胞Ezrin、磷酸化Ezrin表达的变化,逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）检测细胞Ezrin mRNA表达量。进一步运用siRNA技术下调Ezrin细胞中的表达,划痕愈合实验和扫描电镜观察细胞运动和形态在干扰前后与黄芩素干预后变化。结果:黄芩素呈浓度依赖性地抑制Ezrin,磷酸化Ezrin及Ezrin-mRNA在SHG-44细胞中的表达,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。siRNA下调Ezrin在SHG-44细胞中的表达,细胞运动和形态与黄芩素干预后变化呈平行关系。结论:黄芩素可能部分地通过直接或间接抑制Ezrin蛋白的表达及磷酸化而发挥抗肿瘤作用。
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标签：星形细胞瘤论文; 埃兹蛋白论文; 预后论文; 黄芩素论文; 细胞论文; 细胞增殖论文; 细胞周期论文; 侵袭迁移论文; 磷酸化论文;