大鼠重症胰腺炎急性肺损伤TLR4/NF-κB信号传导通路及大黄附子汤治疗作用的实验研究

论文摘要

目的:探讨Toll-样受体4（TLR4）/核转录因子-κB（NF-κB）信号传导通路在大鼠重症胰腺炎急性肺损伤（SP-ALI）发病中的作用机制及中药大黄附子汤对SP-ALI的治疗作用。方法:SD大鼠随机分为假手术组（Ⅰ组）、SP-ALI（Ⅱ组）、大黄附子汤组（Ⅲ组）和血必净组（Ⅳ组）,每组32只。各组再按3、6、12、24h时间点分为四个亚组,每个亚组各8只。Ⅰ组开腹后翻动胰腺数次,行空肠造瘘;Ⅱ组采用胰胆管逆行注入4%牛磺胆酸钠（1ml/kg）诱导SP-ALI模型,行空肠造瘘;Ⅲ组、Ⅳ组在Ⅱ组的基础上于术后30min经空肠造瘘管分别注入大黄附子汤及血必净各2ml。各组按时间点处死大鼠,心脏取血测定内毒素（LPS）、淀粉酶含量,取胰腺及肺脏观察其病理形态学变化;应用免疫组化（Immunohistochemistry）定位检测肺组织TLR4、NF-κB p65的表达,免疫印迹（Western Blot）检测肺TLR4、NF-κB p65含量变化。结果:⑴Ⅱ组术后3～24h淀粉酶、内毒素及胰腺和肺损伤病理组织学评分较Ⅰ组均明显升高（P <0.05 ）。术后3h出现胰腺充血,肺轻度水肿;6h胰腺明显水肿,肉眼见肺水肿;12h和24h胰腺局部出现紫红色坏死灶,少量血性腹水和胰周脂肪皂化、出血,肺水肿加剧,暗红色肺表面可见散在小出血点。证明成功建立了大鼠SP-ALI模型。⑵免疫组化及免疫印迹结果显示肺组织TLR4、NF-κB p65各时间点表达显著增加（P<0.05）,TLR4与NF-κB表达呈显著正相关（r=0.992,P <0.01）。⑶Ⅲ组内毒素、淀粉酶及胰腺和肺损伤病理组织学评分在术后各时间点较Ⅱ组均显著降低（P <0.05）;Ⅲ组各时间点肺组织TLR4、NF-κB p65的表达结果较Ⅱ组均显著降低（P <0.05）;Ⅲ组各时间点上述指标结果较Ⅳ组均显著降低（P <0.05）。结论:⑴胰胆管逆行注入4%牛磺胆酸钠成功建立大鼠SP-ALI模型。⑵TLR4/NF-κB信号传导通路在SP-ALI发生发展过程中起重要作用。⑶大黄附子汤通过降低血清LPS水平,抑制肺组织TLR4、NF-κB p65活化,下调TNF-α、IL-1β的表达,从而减轻SP-ALI的程度。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料与方法
• （五） 结果
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢
• 四、基金资助