运动对高血压大鼠主动脉血管内皮功能的影响及其作用机制的研究

论文摘要

目的:高血压是导致心脑血管病变的主要危险因素,目前发病率和死亡率在我国居于前列。近年来,随着对原发性高血压发病机制研究的不断深入发现,血管内皮细胞与原发性高血压有密切关系,主要表现为血管内皮细胞分泌的多种活性物质对血管张力调节的失衡,血管的结构变化,导致血压升高。正常的血管内皮细胞功能是维持血压稳定的关键。NO是由血管内皮细胞合成分泌的一个重要的调节血管张力的物质,是一个血管内皮细胞损伤重要的标志物。大量研究表明,体内NO的来源主要是通过eNOS及相关辅助因子催化底物L-Arg产生的,其含量对高血压的发生和发展起到至关重要的作用且受到多种因素的调控。目前国内外研究发现,HSP90与c-Src是心血管疾病新的调节物,在调节eNOS产生NO过程中起到重要作用,血浆ox-LDL是eNOS的一个主要抑制物,是许多心血管疾病发生的重要因素。适宜运动可以降低血压,改善高血压患者心血管系统功能,作为一种高血压的非药物疗法已在实践中广泛应用,但其作用机制是否与运动提高了主动脉血管内皮细胞HSP90表达和c-Src活性以及抑制了ox-LDL产生有关,目前尚未见详细报道。本研究观察运动对高血压大鼠主动脉血管内皮细胞HSP90的表达和c-Src活性以及血浆ox-LDL含量的影响,探讨适宜的运动对高血压大鼠主动脉血管内皮功能的作用机制,为高血压及其并发症的防治和治疗提供理论依据。方法:选用SHR大鼠16只,随机分为SHR运动组（T组）和SHR安静组（S组）,T组每日进行90min无负重游泳,每周6次,共8周。另选Wistar大鼠8只（C组）作为正常对照组。均为雄性,6周龄,体重170-200g。实验期间每周测定大鼠血压和体重,8周后,分别测定各组大鼠主动脉血管内皮细胞HSP90表达量和c-Src活性,以及血清NO和血浆ox-LDL含量。结果:1.在游泳运动前两组SHR血压无显著性差异（ 160.6±4.58mmHg Vs 161.5±9.33mmHg）,8周游泳运动后,SHR运动组与SHR安静组相比,血压显著性降低（157.6±7.06mmHgVs185.9±6.64mmHg）（P<0.01）,说明8周游泳运动能有效抑制血压的进一步增高。2.SHR运动组与SHR对照组相比,运动组主动脉血管内皮细胞HSP90表达量、c-Src的活性及血清NO含量都显著性升高（P<0.05、P<0.01和P<0.05）,血浆ox-LDL的含量显著性降低（P<0.01）,说明运动对SHR大鼠主动脉血管内皮细胞相关的活性物质有明显影响。3.SHR对照组与Wistar对照组相比,主动脉血管内皮细胞c-Src活性无显著差异（P>0.05）,SHR运动组与Wistar安静对照组相比,运动组主动脉血管内皮细胞c-Src活性显著升高（P<0.01）,说明运动对SHR大鼠主动脉血管内皮细胞c-Src的活性升高起到一定作用。4.SHR对照组与Wistar安静对照组相比,高血压对照组血清NO含量显著较低（P<0.01）,血浆ox-LDL含量显著较高（P<0.01）,说明血清NO与血浆ox-LDL对高血压的发生有重要作用。5.SHR运动组大鼠主动脉血管内皮细胞HSP90表达量、c-Src活性及血浆ox-LDL含量变化与NO的升高有较大的相关性,相关系数分别为Pearson=0.083、0.805、-0.749,显著性均为P<0.05,说明HSP90、ox-LDL及c-Src活性对NO的合成分泌起重要作用。结论:长期规律的适宜运动对高血压患者血压的升高有一定的缓解作用,其作用机制可能是长期适宜运动使SHR大鼠主动脉血管内皮细胞HSP90表达量增加、c-Src活性增强,以及使NO主要的抑制物ox-LDL含量降低,它们共同作用促进NO的合成与分泌增加,以此维持和改善主动脉血管内皮的功能,起到保护血管内皮功能和降低血压的作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 符合说明
• 第一部分 文献综述
• 前言
• 1 一氧化氮合酶（NOS）概述
• 1.1 eNOS
• 1.2 iNOS
• 1.3 nNOS
• 2 NO的生物学来源及对主动脉血管内皮功能的影响
• 2.1 NO与ET
• 2.2 NO与血管紧张素（AngⅡ）
• 3 ox-LDL对主动脉血管内皮功能的影响及作用机制
• 3.1 ox-LDL概述
• 3.2 LOX-1受体
• 3.3 LOX-1在高血压大鼠主动脉血管内皮细胞上的表达
• 3.4 ox-LDL对主动脉血管内皮功能的影响机制
• 3.4.1 ox-LDL对NO的影响
• 3.4.2 ox-LDL与泡沫细胞的形成
• 3.4.3 ox-LDL与巨噬细胞
• 3.4.4 ox-LDL的细胞毒性作用
• 3.4.5 ox-LDL的免疫原性
• 3.4.6 ox-LDL与ICAM-1
• 3.4.7 ox-LDL与细胞因子
• 4 HSP90对主动脉血管内皮功能的影响及作用机制
• 4.1 HSP90概述
• 4.2 HSP90对主动脉血管内皮功能的影响机制
• 4.2.1 HSP90与eNOS的耦联途径
• 4.2.2 PI3K/Akt 信号途径
• 4.2.3 Ras/Raf/MEK/ERK信号途径
• 4.2.4 c-Src信号途径
• 5 c-Src对主动脉血管内皮功能的影响及作用机制
• 6 展望
• 参考文献
• 第二部分 实验部分
• 前言
• 1 材料及方法
• 1.1 实验动物与分组
• 1.2 运动方式
• 1.3 血压测定
• 1.4 指标的测试
• 1.4.1 血清NO的测定
• 1.4.1.1 样本采集与处理
• 1.4.1.2 NO检测原理
• 1.4.1.3 检测步骤
• 1.4.2 ox-LDL的测定
• 1.4.2.1 样本采集与处理
• 1.4.2.2 检测过程
• 1.4.3 HSP90测定
• 1.4.3.1 样本采集与处理
• 1.4.3.2 检测过程
• 1.4.4 c-Src活性测定
• 1.4.4.1 样本采集与处理
• 1.4.4.2 原理
• 1.4.4.3 磷酸肽标准曲线
• 1.4.4.4 c-Src 活性的定量分析
• 1.5 实验仪器及试剂
• 1.6 结果处理
• 2 结果
• 2.1 8 周90min 游泳运动后SHR 血压的变化
• 2.2 8 周90min 游泳运动后SHR 血清NO 含量的变化
• 2.3 8 周90min 游泳运动后SHR 血浆ox-LDL 含量的变化
• 2.4 8 周90min 游泳运动后SHR 主动脉血管内皮细胞HSP90 表达的变化
• 2.5 8 周90min 游泳运动后SHR 主动脉血管内皮细胞c-Src 活性比
• 3 讨论
• 3.1 运动对SHR 血压的影响
• 3.2 运动对SHR血清NO含量的影响
• 3.3 运动对SHR 血浆ox-LDL 含量的影响
• 3.4 运动对SHR主动脉血管内皮细胞HSP90表达的影响
• 3.5 运动对SHR 主动脉血管内皮细胞c-Src 活力的影响
• 4 结论
• 参考文献
• 致谢