ABCC8基因和WFS1基因与中国汉族2型糖尿病的关系

论文摘要

目的:磺脲类受体1（SUR1）是ATP依赖型钾（KATP）通道的重要组成部分,编码SUR1的ABCC8基因突变会引起钾通道功能紊乱和胰岛素分泌紊乱。WFS1编码wolframin蛋白质,参与内质网应激,与胰岛β细胞的抑制凋亡机制有关。上述两个基因多态性与β细胞功能有关,可能与2型糖尿病（T2DM）的发生密切相关。本研究初步探讨ABCC8 rs1799859和WFS1 rs6446482位点基因多态性与中国汉族人群2型糖尿病的相关性。方法:随机选取久居天津、无血缘关系的2型糖尿病患者280例、糖调节受损（IGR）患者180例和糖耐量正常（NGT）人群100例为研究对象,收集空腹外周血标本,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法（PCR-PFLP）测定ABCC8基因rs1799859和WFS1基因rs6446482的基因型,收集受试者的—般临床资料和生化检测数据,并进行OGTT及胰岛素释放试验,血糖测定采用葡萄糖氧化酶法,胰岛素测定（德国罗氏）采用电化学发光法。用稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）评估胰岛素抵抗,以胰岛素敏感性指数（ISI）评价胰岛素敏感性。用稳态模型胰岛β细胞功能指数（HOMA-β）反应基础胰岛素分泌功能,通过糖负荷后30min胰岛素和血糖净增值的比值（△I30/△G30）来评价早时相胰岛素分泌,用胰岛素曲线下面积（AUCI）来评价晚时相胰岛素分泌。应用SPSS17.0软件进行统计分析,多组间比较采用单因素方差分析,各组基因型及等位基因频率比较采用R×C卡方检验。结果:（1）NGT组、IGR组和T2DM组在年龄、体质指数方面差异无统计学意义（P>0.05）,基线水平具有可比性。T2DM组的血压（SBP、DBP）、血糖（FPG、P2BG）、HbA1c、血脂（TG、TC、LDL）均高于NGT组,差异有统计学意义（P<0.05）;IGR组的餐后两小时血糖（P2BG）、甘油三酯（TG）高于NGT组,差异有统计学意义（P<0.05）。T2DM组的空腹血糖（FPG）、餐后两小时血糖（P2BG）、HbA1c高于IGR组,差异有统计学意义（P<0.05）。（2）在NGT、IGR和T2DM组,稳态模型胰岛β细胞功能指数、糖负荷后30min胰岛素和血糖净增值的比值、胰岛素曲线下面积逐渐降低,差异有统计学意义（P<0.05）,稳态模型胰岛素抵抗指数逐渐增高,胰岛素敏感性指数逐渐降低,差别有统计学意义（P<0.05）。（3）ABCC8 rs1799859 基因型 A/A、G/A、G/G 频率在本组人群 T2DM组为 12.9%、30.4%、56.8%,IGR 组为 7.2%、22.2%、70.6%和 NGT 组为 7.0%、18.0%、75.0%,危险等位基因A%在NGT组、IGR组和T2DM组分别为16%,18.3%,28.0%,NGT组与T2DM组、IGR组与T2DM组危险等位基因的频率分布差异有统计学意义（P<0.017）,A等位基因携带者患T2DM的风险是G等位基因的2.2倍。与G/G型相比,A/A型稳态模型胰岛β细胞功能指数、糖负荷后30min胰岛素和血糖净增值的比值、DI-HOMA和早期葡萄糖处置指数明显降低,差别有统计学意义（P<0.05）。（4）WFS1rs6446482基因型C/C、C/G、G/G 频率在本组人群 T2DM 组为 10%、11.4%、78.6%,IGR 组为 11.7%、14.4%、73.9%和NGT组为15%、16%、69%,等位基因C%在NGT组、IGR组和T2DM组分别为15%、11.7%、10%,三组在基因型频率、基因频率分布上无统计学意义（P>0.05）。稳态模型胰岛β细胞功能指数、糖负荷后30min胰岛素和血糖净增值的比值、胰岛素曲线下面积、胰岛素敏感性指数、稳态模型胰岛素抵抗指数在rs6446482C/C型、C/G型、G/G型三种基因型之间比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论:（1）天津地区人群存在ABCC8基因rs1799859和WFS1基因rs6446482基因多态性。（2）T2DM组ABCC8rs1799859位点的A等位基因频率显著高于NGT组;A等位基因携带者患T2DM的风险增高。rs1799859基因多态性与β细胞功能受损、胰岛素分泌减少有关,与胰岛素抵抗、胰岛素敏感性无关。（3）WFS1基因rs6446482基因型频率分布在NGT、IGR、T2DM三组人群中无差别,WFS1基因多态性可能与中国天津地区汉族人群胰岛功能及T2DM的发病无关。（4）ABCC8基因rs1799859G/A变异、SBP、TG、TC为2型糖尿病独立危险因素,稳态模型胰岛β细胞功能指数、糖负荷后30min胰岛素和血糖净增值的比值为保护性因素。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 缩略语/符号说明
• 前言
• 1 对象和方法
• 1.1 研究对象
• 1.1.1 2型糖尿病组（T2DM组）
• 1.1.2 糖调节受损组（IGR组）
• 1.1.3 糖耐量正常组（NGT组）
• 1.2 临床资料收集
• 1.2.1 一般资料
• 1.2.2 生化指标
• 1.3 主要试剂
• 1.3.1 DNA提取试剂
• 1.3.2 PCR试剂
• 1.3.3 PCR引物
• 1.3.4 限制性核酸内切酶
• 1.3.5 电泳试剂
• 1.3.6 其他试剂
• 1.3.7 主要仪器设备
• 1.4 技术路线图以及实验方法和步骤
• 1.4.1 技术路线图
• 1.4.2 试验主要操作流程图
• 1.4.3 提取基因组DNA（蛋白酶K法）
• 1.4.4 目的基因的体外扩增
• 1.4.5 PCR扩增产物的RFLP分析
• 1.5 基因型分类及测序
• 1.6 统计学处理
• 2 结果
• 2.1 临床资料分析
• 2.1.1 糖耐量正常组、糖调节受损组、2型糖尿病组一般资料比较
• 2.1.2 糖耐量正常组、糖调节受损组、2型糖尿病组OGTT结果比较
• 2.1.3 糖耐量正常组、糖调节受损组、2型糖尿病组胰岛素、C-肽释放试验结果比较
• 2.1.4 糖耐量正常组、糖调节受损组、2型糖尿病组β细胞功能比较
• 2.1.5 糖耐量正常组、糖调节受损组、2型糖尿病组胰岛素抵抗指数比较
• 2.1.6 糖耐量正常组、糖调节受损组、2型糖尿病组葡萄糖处置指数比较
• 2.2 ABCC8基因rs1799859多态性分析
• 2.2.1 ABCC8基因rs1799859 PCR扩增产物的电泳检测结果
• 2.2.2 ABCC8基因rs1799859酶切产物的鉴定
• 2.2.3 ABCC8基因rs1799859基因分布比较
• 2.3 ABCC8基因rs1799859三种基因型各项功能指标的比较
• 2.3.1 NGT、IGR、T2DM人群ABCC8基因rs1799859三种基因型一般资料比较
• 2.3.2 NGT、IGR、T2DM人群ABCC8基因rs1799859三种基因型β细胞功能比较
• 2.3.3 NGT、IGR、T2DM人群ABCC8基因rs1799859三种基因型胰岛素抵抗指数、葡萄糖处置指数比较
• 2.3.4 ABCC8基因rs1799859三种基因型β细胞功能比较
• 2.3.5 ABCC8基因rs1799859三种基因型胰岛素抵抗指数、葡萄糖处置指数比较
• 2.4 WFS1基因rs6446482多态性分析
• 2.4.1 WFS1基因rs6446482PCR扩增产物的电泳检测结果
• 2.4.2 WFS1基因rs6446482酶切产物的鉴定
• 2.4.3 WFS1基因rs6446482 PCR扩增产物的测序结果分析
• 2.4.4 WFS1基因rs6446482基因分布比较
• 2.5 WFS1基因rs6446482三种基因型各项功能比较
• 2.5.1 WFS1基因rs6446482三种基因型一般情况比较
• 2.5.2 WFS1基因rs6446482三种基因型β细胞功能比较
• 2.6 2型糖尿病危险因素回归分析
• 3 讨论
• 3.1 2型糖尿病发展进程中的胰岛素分泌变化
• 3.2 ABCC8基因多态性与2型糖尿病的关系
• 3.3 ABCC8与胰岛细胞功能的关系
• 3.4 WFS1与2型糖尿病的关系
• 3.5 WFS1与胰岛β细胞功能的关系
• 3.6 T2DM危险因素
• 3.7 存在问题与展望
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 综述 ABCC8和WFS1基因与2型糖尿病的关系
• 综述参考文献
• 致谢