论文摘要
目的 研究苦参碱对体外培养的肝星状细胞(HSC)增殖和凋亡的影响,同时观察其对肝细胞有无毒性作用,探讨苦参碱抗肝纤维化的作用机制。 方法 1.体外培养的大鼠肝星状细胞系rHSC-99和肝细胞株HL-7702,以0.125mg/ml、0.25mg/ml、0.5mg/ml的苦参碱处理24小时后,MTT比色法检测细胞增殖。2.体外培养的大鼠肝星状细胞系rHSC-99,以0.25mg/ml的苦参碱处理HSC细胞系rHSC-9924小时后,倒置相差显微镜和透射电镜观察形态改变,TUNEL法原位检测DNA断裂;以0.125mg/ml、0.25mg/ml、0.5mg/ml的苦参碱处理rHSC-9924小时后,Annexin v-FITC/PI双染色流式细胞分析法检测早期细胞凋亡。 结果 1.苦参碱对HSC增殖有明显的抑制作用,且作用呈剂量依赖性(P<0.05);苦参碱对肝细胞增殖有促进作用,但其促增殖作用不随浓度的增加而增强。2.Annexin v-FITC/PI双染色流式细胞分析:对照组、苦参碱0.125mg/ml组、0.25mg/ml组、0.5mg/ml组凋亡率分别是0.99%±0.45%、5.00%±0.98%、13.6%±2.19%、17.2%±2.17%,差异有显著性(F=63.14,P<0.05)。苦参碱处理组细胞TUNEL检测发现DNA断裂,透射电镜观察到苦参碱处理组部分细胞核仁消失,染色质浓缩并凝聚成团块状,沿核膜排列。 结论 苦参碱可抑制HSC增殖、诱导HSC凋亡,可能是苦参碱抗肝纤维化的机制之一。
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