荧光探针分子用于胺类和醇类化合物的标记及分离

论文摘要

反相高效液相色谱（RP-HPLC）已被广泛应用于许多领域如分析化学、生物化学、临床医学、药物化学、食品卫生和环境监测等。其超强的分离能力使之已成为分析化学中发展最快、应用最广的研究领域之一。然而,对于反相液相色谱并没有合适的高灵敏的通用型检测器,多年来研究人员一直采用化学衍生化的方法来提高分析物检测灵敏度和改善分离效果。新型荧光探针分子的开发及其在高效液相色谱中的应用研究一直是色谱领域中最为活跃的研究方向。本论文以修饰现有母体环及展现其广泛应用性为主导思想,对现有荧光探针分子修饰过程及结构确定、光谱性质、衍生化反应条件、色谱分离条件、质谱定性定量分析等方面进行了研究,建立相应的反相高效液相色谱分析方法,并应用于多种有意义的实际样品的分析中。具体工作内容如下：第一章：简述了高效液相色谱和高液相色谱-质谱联用技术的研究进展,简单介绍了化学衍生化、影响荧光衍生物荧光强度的因素及荧光探针分子的特点。最后列出了近几十年来常用的标记胺类和醇类物质的荧光试剂。第二章：新修饰的荧光标记试剂DBCEC-Cl用于生物胺的高效液相色谱分析,用响应面分析法对衍生化条件进行了优化,建立了生物胺的柱前衍生高效液相色谱荧光检测法,并将该方法用于实际样品腐鱼和臭豆腐的测定,检验了所建立的分析方法的可行性。第三章：DBCEIC中间体的合成及表征,以此作为标记试剂,用于脂肪胺的高效液相色谱分析。通过对衍生化条件的优化,建立了脂肪胺的柱前衍生高效液相色谱荧光检测法,并将该方法用于实际样品药厂废水的测定,检验了所建立的分析方法的可行性。第四章：ABIA的合成及表征,研究了试剂的光谱性质,以此作为标记试剂,用于脂肪胺和脂肪醇的高效液相色谱分析。通过对衍生化条件的优化,分别建立了脂肪胺和脂肪醇的柱前衍生高效液相色谱荧光检测法,并将该方法用于实际样品的测定,检验了所建立的分析方法的可行性。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 高效液相色谱及化学衍生的应用进展
• 1 高效液相色谱的研究现状
• 1.1 液相色谱基本原理
• 1.2 高效液相色谱的发展
• 1.3 高效液相色谱的分类及特点
• 1.4 高效液相色谱法的特点
• 1.5 高效液相色谱法的分析应用
• 1.6 高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS）的发展
• 2 荧光探针分子的发展
• 2.1 荧光现象的发现
• 2.2 荧光产生原理
• 2.3 影响荧光强度的因素
• 2.4 荧光探针分子的选择
• 3 化学衍生法
• 4 常用标记胺类和醇类的荧光探针分子
• 5 选题思想和主要研究内容
• 第二章 2-[2-（7H-二苯并[a,g]咔唑-乙氧基）-乙基氯甲酸酯用于生物胺的高效液相色谱-质谱分析
• 1 引言
• 2 实验部分
• 2.1 仪器与试剂
• 2.2 标准溶液的配制
• 2.3 标准品的衍生过程
• 2.4 实际样品的处理
• 2.4.1 臭豆腐中生物胺的提取
• 2.4.2 腐鱼中生物胺的提取
• 2.5 色谱与质谱条件
• 3 结果与讨论
• 3.1 衍生条件的优化
• 3.1.1 分析因素的选择及设计方案
• 3.1.2 模型的建立及显著性试验
• 3.2 标准品的高效液相色谱分离及质谱鉴定
• 3.3 线性回归方程及检测限
• 3.4 实际样品的色谱分离
• 3.4.1 腐鱼中游离多胺的测定
• 3.4.2 臭豆腐中游离多胺的测定
• 4 结论
• 第三章 2-（双苯并咔唑）-乙基咪唑酸酯探针分子用于脂肪胺的高效液相色谱-质谱分析
• 1 引言
• 2 实验部分
• 2.1 仪器与试剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 标准溶液的配制
• 2.2.2 色谱及质谱条件
• 2.2.3 脂肪胺的衍生化
• 2.3 衍生试剂的合成
• 2.4 药厂废水中脂肪胺的提取
• 3 结果与讨论
• 3.1 方法选择
• 3.2 衍生条件的优化
• 3.3 标准品的色谱分离及质谱鉴定
• 3.4 重现性、线性回归方程及检出限
• 3.5 应用
• 3.5.1 实际样品中脂肪胺的测定
• 3.5.2 回收率实验
• 4 结论
• 第四章 2-（2-（10-蒽基）-苯并咪唑）-乙酸在高效液相色谱-质谱分析中的应用
• 第一节 2-（2-（10-蒽基）-苯并咪唑）-乙酸的合成及光谱性质
• 1 衍生试剂的合成
• 1.1 2-（10-蒽基）-苯并咪唑的合成
• 1.2 2-（2-（10-蒽基）-苯并咪唑）-乙酸的合成
• 2 ABIA的光谱性质
• 2.1 紫外光谱性质
• 2.2 荧光光谱性质
• 2.2.1 溶剂极性对荧光光谱的影响
• 2.2.2 温度对荧光光谱的影响
• 第二节 2-（2-（10-蒽基）-苯并咪唑）-乙酸用于脂肪胺的高效液相色谱-质谱分析
• 1 引言
• 2 实验部分
• 2.1 仪器与试剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 标准溶液的配制
• 2.2.2 脂肪胺的衍生化
• 2.2.3 色谱及质谱条件
• 2.3 土壤中脂肪胺的提取
• 3 结果与讨论
• 3.1 ABIA的稳定性
• 3.2 衍生条件的优化
• 3.3 标准品的色谱分离及质谱鉴定
• 3.4 重现性、线性回归方程及检出限
• 3.5 应用
• 3.5.1 实际样品中脂肪胺的测定
• 3.5.2 回收率实验
• 4 结论
• 第三节 2-（2-（10-蒽基）-苯并咪唑）-乙酸用于脂肪醇的高效液相色谱-质谱分析
• 1 引言
• 2 实验部分
• 2.1 仪器与试剂
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 标准溶液的配制
• 2.2.2 标准品的衍生过程
• 2.2.3 色谱及质谱条件
• 2.3 实际样品中脂肪醇的提取
• 3 结果与讨论
• 3.1 衍生条件的优化
• 3.2 标准品的色谱分离及质谱鉴定
• 3.3 重现性、线性回归方程及检出限
• 3.4 洗发水中脂肪醇的测定
• 3.4.1 脂肪醇的提取
• 3.4.2 实际样品的测定
• 4 结论
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的论文
• 致谢