论文摘要
水杉(Metasequoia glyptostroboides Hu et)为世界珍稀孑遗物种,被世界生物界誉为活化石。受银杏黄酮类产品开发成功的启发,我国众多学者先后对水杉总黄酮(total flavonoids of metasequoia,TFM)进行了药理学研究,发现TFM具有抗心律失常和抗心肌肥厚等方面的作用,在开发心脑血管疾病药物方面具有很好的前景。本论文测定了贵州产水杉在不同生长时期的总黄酮含量;建立了一条提取、分离、纯化水杉总黄酮的工艺路线;并对TFM在抗氧化和降血脂方面的作用进行了研究。研究结果表明:1、不同生长期的贵州产水杉叶的总黄酮含量有差异,6月份采集的样品总黄酮含量值最高,在1.99~2.15%之间。此结果比文献报道的武汉产水杉叶的总黄酮含量高30%左右。2、采用水温70℃、液料比30:1、提取时间2h的条件对水杉样品进行预处理,除杂效果明显。3、热水除杂后乙醇提取总黄酮的最佳工艺条件为:乙醇浓度80%、提取温度70℃、液料比25:1、提取时间0.5h。该方法最后产物浸膏中总黄酮含量是传统方法的2.95倍。4、D140型大孔树脂纯化水杉总黄酮的优化条件为:上样浓度2mg/mL、上样速率2BV/h,总黄酮样液重复过柱两次。洗脱条件为:先用去离子水冲至流出液无色,再分别用2BV 30%和50%的乙醇以2BV/h进行梯度洗脱,弃去这两段洗脱液,最后用3BV 80%的乙醇以1BV/h的速率进行洗脱。收集该段洗脱液减压浓缩至无醇味,真空冷冻干燥后得精制TFM。以100g水杉粉为一个试验单位,得到的精制TFM的总黄酮含量为54.9±1.6%。5、TFM对超氧阴离子自由基、羟基自由基、DPPH自由基皆表现出很好的清除效果。100μg/ml样品对超氧阴离子自由基(O2-·)、羟基自由基(·OH)、DPPH自由基(DPPH·)的清除分别达到了46.3%、78.9%和73.1%。6、TFM有一定的降血脂的作用。各剂量组的小鼠血清中的TC、TG、LDL-C与模型组相比,都有一定程度的降低。其中,中剂量组和高剂量组,降脂效果尤为明显。