论文摘要
目的:研究白藜芦醇体外对淋巴细胞白血病MOLT-4细胞的抑制作用及其凋亡诱导作用,并探讨其作用机制,以期为白藜芦醇在抗白血病方面的临床应用提供实验依据。方法:1以人淋巴细胞白血病MOLT-4细胞为研究对象,设对照组和加药组（白藜芦醇终浓度分别为12.5、25、50、100、200μmol/L）,作用于MOLT-4细胞24、48、72h后,用MTT法检测细胞增殖抑制率。2设对照组和加药组（白藜芦醇终浓度为100μmol/L）,分别作用于MOLT-4细胞48h后,瑞-吉染色及透射电镜观察凋亡细胞的形态变化。3设对照组和加药组（白藜芦醇终浓度分别为50、100μmol/L）作用于MOLT-4细胞48h后,流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡率。4对照组和加药组（白藜芦醇终浓度分别为50、100μmol/L）,分别作用于MOLT-4细胞48h后,半定量RT-PCR技术检测WAVE1mRNA的表达水平,分析白藜芦醇诱导MOLT-4细胞凋亡的可能机制。结果:1与对照组相比,不同浓度白藜芦醇作用于MOLT-4细胞24、48、72h后,对该细胞均有抑制作用（p<0.05）,各浓度组24、48、72h抑制率如下:12.5μmol/L依次为3.84%、17.52%、29.32%;25μmol/L8.77%、23.86%、36.11%;50μmol/L11.38%、32.79%、53.92%;100μmol/L依次为19.24%、43.33%、62.50%;200μmol/L依次为26.51%、57.64%、74.98%;其中最大抑制率74.98%为200μmol/L终浓度作用72h后。在一定时间内,白藜芦醇对MOLT-4细胞的生长抑制作用随药物浓度的增加而增强;在同一药物浓度下,白藜芦醇对MOLT-4细胞的生长抑制作用随药物作用时间的延长而增强;白藜芦醇对MOLT-4细胞的抑制作用呈时间-剂量依赖性。2与对照组相比,白藜芦醇作用于淋巴细胞白血病MOLT-4细胞48h后,可出现细胞内部超微结构的改变及较典型的细胞凋亡形态学变化,如细胞体积变小,核染色质浓集,部分核膜呈锐角突起,线粒体和粗面内质网等细胞器减少,部分嵴和微绒毛消失,胞质内出现空泡变性等。3与对照组相比,不同浓度白藜芦醇作用于白血病MOLT-4细胞48h后,G0/G1期细胞和G2/M期细胞比率下降,S期细胞比率明显上升,由（42.5±0.2）%到（78.2±0.4）%,细胞发生了S期阻滞;对照组细胞凋亡率为（1.52±0.09）%,而白藜芦醇处理组细胞凋亡率分别上升为:50μmol/L（7.11±0.30）%,100μmol/L（17.8±0.40）%。4不同浓度白藜芦醇（50、100μmol/L）分别作用于MOLT-4细胞48h后,RT-PCR检测结果,对照组MOLT-4细胞WAVE1/GAPDH灰度值0.586±0.06,白藜芦醇处理组MOLT-4细胞WAVE1/GAPDH灰度值分别为:50μmol/L0.356±0.03;100μmol/L0.382±0.05;与对照组比较,经白藜芦醇作用后,随着药物浓度的增加MOLT-4细胞的WAVE1mRNA的表达水平明显降低。结论:白藜芦醇对白血病MOLT-4细胞有明显的增殖抑制作用,并且在一定范围内呈时间-剂量依赖性;白藜芦醇能影响MOLT-4细胞的细胞周期分布,将细胞周期阻滞于S期;白藜芦醇可以通过抑制WAVE1基因的表达,来诱导肿瘤细胞的凋亡。