盐藻钠/磷共转运通道基因及甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因的分离及功能分析

盐藻钠/磷共转运通道基因及甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因的分离及功能分析

论文摘要

利用通过抑制差减杂交(SSH)方法得到的两个明显受高盐胁迫诱导的差异片段A60及CP1F1为探针,我们从盐藻的cDNA文库中分离得到两个钠/磷共转运通道基因全长cDNA(DsSPT1和DsSPT2),它们分别编码一个由672个氨基酸组成的蛋白DsSPT1和一个由675个氨基酸组成的蛋白DsSPT2。蛋白序列同源性分析表明,DsSPT1和DsSPT2与周氏扁藻高亲合性无机磷转运通道TcPHO的同源性分别为31.2%和29.6%。二级结构跨膜预测表明,DsSPT1和DsSPT2均为具有11个跨膜区的膜蛋白。Northern进一步分析表明: DsSPT1和DsSPT2的均受盐胁迫和磷饥饿诱导而转录表达增强。利用SSH片段A60 cDNA片段为探针,从盐藻的基因组文库中分离到盐藻钠磷共转运通道基因GDsSPT1,并发现在GDsSPT1基因的启动子区域(-711~-715bp)存在一个响应环境胁迫的顺式元件(CACGT)。Southern分析表明:在盐藻基因组中至少存在2个以上的无机磷转运通道基因。酵母功能表达结果显示:DsSPT1和DsSPT2这两个基因均使盐敏感突变体G19变得更敏感。上述结果表明,我们从盐藻中首次分离得到了两个受NaCl和无机磷差异调控的无机磷转运通道基因cDNA。

论文目录

  • 第一部分 研究论文部分
  • 第一章 盐藻钠/磷共转运通道基因的分离及功能分析
  • 1. 中文摘要
  • 2. 英文摘要
  • 3. 前言
  • 4. 结果
  • 5. 讨论
  • 参考文献
  • 第二章 盐藻甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因cDNAs 的分离及初步分析
  • 1. 中文摘要
  • 2. 英文摘要
  • 3. 前言
  • 4. 结果
  • 5. 讨论
  • 参考文献
  • 第二部分 实验材料与方法
  • 一、实验材料
  • 二、实验方法
  • 第三部分 专业综述
  • 第一章 盐藻响应盐胁迫机制的研究进展
  • 1. 盐藻简介
  • 2. 盐藻响应盐胁迫的机制
  • 2.1 渗透调节
  • +外排'>2.2 Na+外排
  • 2.3 盐藻几种重要的耐盐模式蛋白
  • 2.3.1 碳酸酐酶
  • +-ATPase'>2.3.2 P 型H+-ATPase
  • 2.3.3 转铁蛋白
  • 2.4 信号转导蛋白在响应盐胁迫过程中的分子机制
  • 3. 结语
  • 参考文献
  • 第二章 无机磷转运通道研究进展
  • 1. 无机磷转运通道概述
  • 1.1 无机磷转运通道的分类
  • 1.2 无机磷转运通道的调节方式
  • 1.3 无机磷转运通道的结构组成
  • 2. 酵母无机磷转运通道
  • 3. 大肠杆菌无机磷转运通道
  • 4. 盐藻无机磷转运通道
  • 5. 高等植物无机磷转运通道
  • 6. 脊椎动物无机磷转运通道
  • 7. 小结
  • 参考文献
  • 第三章 甘油醛-3-磷酸脱氢酶的研究进展
  • 1. 前言
  • 2. 甘油醛-3-磷酸脱氢酶的分类
  • 2.1 糖酵解途径的甘油醛-3-磷酸脱氢酶
  • 2.2 卡尔文循环途径的甘油醛-3-磷酸脱氢酶
  • 2.3 质体型甘油醛-3-磷酸脱氢酶
  • 3. 甘油醛-3-磷酸脱氢酶的演化
  • 4. 卡尔文循环途径中甘油醛-3-磷酸脱氢酶的活性调控
  • 4.1 关键酶
  • 4.2 GAPDH/CP12/PRK 蛋白复合体
  • 4.3 CP12
  • 4.4 高等植物GAPDH/CP12/PRK 复合体在光诱导下的调控
  • 5. 展望
  • 参考文献
  • 发表论文和会议摘要
  • 致谢
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