论文题目: 组织型纤溶酶原激活剂（tPA）在坐骨神经损伤与恢复过程中的作用研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 生物化学与分子生物学
作者: 邹铁
导师: 宋后燕,陈祖林,汤其群,朱运松
关键词: 组织型纤溶酶原激活剂,坐骨神经损伤,神经再生,纤维蛋白,巨噬细胞,金属基质蛋白酶
文献来源: 复旦大学
发表年度: 2005
论文摘要: 组织型纤溶酶原激活剂(tPA)是丝氨酸蛋白酶家族的一员，其主要的生物学功能是激活纤溶酶原(Plasminogen，Plg)转变为纤溶酶(Plasmin)，后者可以降解血栓中的纤维蛋白，用于治疗急性心肌梗塞等血栓性疾病。近年来的研究表明，除了参与循环系统的溶血栓过程之外，tPA在神经系统中也发挥了重要的作用，参与了癫痫和早老型痴呆症等神经系统疾病的发生和发展，在学习和记忆等生理过程中也发挥了重要作用；在外周神经系统中，tPA的活性在坐骨神经损伤后迅速增高，tPA基因缺失明显延迟了小鼠坐骨神经损伤的恢复，说明tPA在外周神经系统的损伤与恢复过程中也发挥了重要的作用。为了解tPA在小鼠坐骨神经损伤和恢复过程中的作用，我们研究了tPA及其它同坐骨神经损伤和恢复相关分子在坐骨神经损伤后不同时间点的变化，分析这种变化与小鼠坐骨神经损伤和损伤后再生之间的关系。我们建立小鼠坐骨神经钳夹伤的动物模型，通过形态和功能学的方法检测了小鼠坐骨神经损伤后不同时间点神经再生与功能恢复的情况。同时采用酶谱分析法检测了tPA活性在坐骨神经损伤后各阶段的变化，并分析这种变化与纤维蛋白沉积、髓鞘碎片沉积等影响神经再生的因素之间的关系。结果显示，从损伤后第8天开始，小鼠坐骨神经功能开始逐渐恢复，新生轴突和有髓轴突的数目也逐渐增多，沉积的纤维蛋白和髓鞘碎片逐渐被清除，tPA活性在损伤后第2天达到高峰，并持续至第8天，提示tPA参与清除沉积的纤维蛋白和髓鞘碎片，为神经再生提供了良好的微环境，外周神经系统损伤是常见的外科损伤，现在还缺乏很好的治疗手段。为了研究外源性tPA是否具有促进坐骨神经损伤后神经再生和功能恢复的作用，我们建立小鼠坐骨神经钳夹伤动物模型。实验动物分为3组，损伤双侧坐骨神经，在钳夹坐骨神经后第7天，分别将吸附有100ul(1ug／ul)tPA、Plg、tPA与Plg混合物(tPA／Plg)的明胶海绵包裹在左侧损伤的神经周围，右侧包裹吸附等体积PBS的明胶海绵作为对照，给药处理7天后处死动物。甲苯氨兰染色结果表明，外源性的tPA或tPA／Plg可以明显促进损伤后轴突和髓鞘的再生，tPA或tPA／Plg处理后的坐骨神经组织中有髓轴突和总的轴突数目明显高于对照组，单独给予Plg则没有影响。免疫荧光结果表明，外源性tPA或tPA／Plg也可以促进神经丝蛋白(NF)的表达，这同轴突再生的结果是一致的，同时tPA或tPA／Plg处理可以减少神经组织内的纤维蛋白沉积。此外，外源性tPA或tPA／Plg处理明显增加了神经组织内巨噬细胞的数量，而这些巨噬细胞都是表达MMP-9的阳性细胞，MMP-9水平赠高和巨噬细胞数量增多可以进一步降解神经组织中沉积的胶原纤维和变性髓鞘碎片。分析腓肠肌肌肉萎缩系数说明外源性tPA或tPA／Plg可以促进神经功能的恢复。这些结果说明外源性tPA或tPA／Plg通过降解沉积的纤维蛋白以及促进巨噬细胞浸润清除沉积的髓鞘碎片和胶原纤维，促进神经再生和功能恢复。tPA是美国FDA认证的唯一用于治疗急性脑梗塞的溶栓类药物，tPA用于治疗外周神经系统损伤也将有令人鼓舞的前景。坐骨神经损伤后神经再生能力很大程度上取决于新生轴突的穿越能力，为了穿过由细胞碎片和变性的细胞外基质组成的瘢痕组织，多种蛋白酶参与了新生轴突的生长，tPA和MMP-9是其中非常重要的两种蛋白酶。越来越多的研究表明，tPA参与调节MMP-9的表达和活化，tPA基因缺失下调了坐骨神经损伤后MMP-9的活性，tPA基因缺失小鼠肾脏中MMP-9表达量较野生型小鼠明显减少，在体外实验中外源性tPA则可以促进了肾脏成纤维上皮细胞表达MMP-9。为了进一步阐明tPA对坐骨神经损伤后MMP-9表达的影响，我们利用tPA基因缺失小鼠作为研究对象，建立小鼠坐骨神经损伤动物模型，对照组采用野生型小鼠。结果表明，tPA基因缺失明显下调了神经损伤后神经组织中MMP-9的表达。野生型小鼠在神经损伤后第2天神经组织内出现巨噬细胞的浸润，巨噬细胞数量在损伤后第8天达到高峰，浸润的巨噬细胞正是表达MMP-9的阳性细胞，tPA基因的缺失则明显抑制了巨噬细胞向神经组织中的浸润。这些结果提示tPA基因缺失降低了巨噬细胞的浸润能力，导致了神经组织中MMP-9表达水平的降低。
论文目录:
英文缩略词表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 组织型纤溶酶原激活剂(tPA)在坐骨神经损伤及恢复过程中的变化
引言
材料与方法
结果
讨论
参考文献
附图
第二部分 外源性组织型纤溶酶原激活剂(tPA)促进坐骨神经损伤后功能恢复的研究
引言
材料和方法
结果
讨论
参考文献
附图
第三部分 tPA基因缺失对坐骨神经损伤后神经组织内 MMP-9表达的影响及其机制研究
引言
材料和方法
结果
讨论
参考文献
附图
综述
参考文献
致谢
发布时间: 2007-06-28
参考文献
- [1].NO合酶抑制剂促进坐骨神经损伤后再生的实验研究[D]. 刘浩宇.吉林大学2007
- [2].大鼠坐骨神经损伤后自发放电产生机制的研究[D]. 李建宁.陕西师范大学2012
- [3].甘草甜素促进小鼠周围神经损伤修复的实验研究[D]. 贾玉玺.吉林大学2014
- [4].缺氧及基质细胞衍生因子对神经干细胞移植治疗外周神经损伤的影响[D]. 刘素芳.郑州大学2013
- [5].腺病毒介导的BDNF基因转移治疗大鼠坐骨神经损伤[D]. 李培建.第三军医大学2002
- [6].促红细胞生成素及其受体在脊髓与周围神经系统中表达及作用的实验研究[D]. 冯亚高.华中科技大学2007
- [7].长链非编码RNA调控雪旺细胞促进周围神经再生的实验研究[D]. 潘彬.天津医科大学2017
相关论文
- [1].组织型纤溶酶原激活物（tPA）和尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）在小鼠肝纤维化中的作用[D]. 萧瑶.复旦大学2008
- [2].组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）突变体的构建及其表达研究[D]. 李敏.中国人民解放军军需大学2002
- [3].组织纤溶酶原激活物在脑缺血后神经损伤中的作用及其机制研究[D]. 李亚军.重庆医科大学2006
- [4].兔坐骨神经电损伤后形态与功能的实验研究[D]. 李学拥.第四军医大学1999
- [5].重组组织型纤溶酶原激活剂变异体（RETEPLASE）工程菌的培养与体外复性的研究[D]. 孔扬.山东大学2005
- [6].不同干预方法对大鼠坐骨神经损伤导致神经病理性疼痛的影响[D]. 刘甬民.华中科技大学2006
- [7].细胞外ATP对周围神经损伤后脊髓神经元作用及机制的实验研究[D]. 陆新颜.华中科技大学2006
- [8].NO合酶抑制剂促进坐骨神经损伤后再生的实验研究[D]. 刘浩宇.吉林大学2007
- [9].周围神经损伤后近侧端雪旺细胞变化的实验研究[D]. 魏壮.吉林大学2007
- [10].周围神经损伤后雪旺细胞与轴突再生关系的实验研究[D]. 李军.吉林大学2008
标签：组织型纤溶酶原激活剂论文; 坐骨神经损伤论文; 神经再生论文; 纤维蛋白论文; 巨噬细胞论文; 金属基质蛋白酶论文;